买2送1活动进行中！购买任意2个规格产品，免费赠送100μL装一支。
活动截止时间：2024年1月31日
CheKine™ 髓过氧化物酶（MPO）活性检测试剂盒（微量法）是一款基于比色法设计的细胞代谢检测工具，可在微量体系内快速测定生物样本中髓过氧化物酶（MPO）的催化活性，适用于细胞、动物组织、血清/血浆及其他液体样本。
髓过氧化物酶（myeloperoxidase, MPO）是活化的中性粒细胞与单核-巨噬细胞分泌的关键白细胞酶，主要储存于嗜苯胺蓝颗粒中。当炎症或氧化应激发生时，MPO 被释放到吞噬泡及血浆，催化 H2O2 分解并氧化底物，引发氧化损伤。本试剂盒利用 MPO 催化 H2O2 氧化邻联茴香胺生成有色产物，在 460 nm 处呈现特征吸收峰；颜色深浅与 MPO 活性呈线性关系，从而实现对 MPO 活性的定量分析。
细胞代谢研究、炎症反应机制探索、氧化应激评估、药物筛选与药效学研究。
| 中文名称 | 髓过氧化物酶(MPO)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Myeloperoxidase (MPO) Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB1152 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | •Reagent I •Reagent Ⅱ •Reagent Ⅲ •Reagent Ⅳ •Reagent V |
| 分子 | MPO |
| 检测指标 | MPO |
| 注意事项 | •推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存数周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | -20℃，避光保存 6 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
注意：正式检测前，建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。
Reagent I：即用型；使用前，平衡到室温。4℃保存。
Working Reagent II：临用前配制；每瓶加入 60 mL ReagentⅠ充分溶解待用。4℃避光保存可稳定 2周。
Working Reagent III：临用前配制；48 T加入 18 mL ReagentⅠ，96 T加入 36 mL ReagentⅠ充分溶解待用。4℃避光保存可稳定 1个月。
注意：1. Reagent II 和 Reagent III 有毒，建议在通风橱进行实验。2. Working Reagent II 和Working Reagent III 较难溶，可以在 37℃加热并剧烈振荡以促进溶解，或者通过超声处理以促进溶解。每次用前需检查是否有粉剂析出。如果用高温助溶Working Reagent II，需要待其冷却至室温后再使用。
Reagent IV：即用型；使用前，平衡到室温。4℃避光保存。
Working Reagent：每孔样本准备 270 μL Working Reagent，现配现用。将Working Reagent III 和 Reagent IV 按照 999:1的体积比混匀待用。
Reagent V：即用型；使用前，平衡到室温。-20℃避光保存。
注意：建议使用新鲜样本。如果不立即使用，可将样品在-80℃下保存一个月。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在 4 h内完成样品解冻。
1. 动物组织：称取约 0.1 g样本，加入 1 mLWorking Reagent II，用匀浆器或研钵冰浴匀浆，12,000 g，4℃离心 10 min，取上清液待测。
2. 细胞：收集 500万细胞到离心管内，用冷 PBS清洗细胞，离心后弃上清，加入 1 mLWorking Reagent II，冰浴超声波破碎细胞 5 min（功率 20%或 200 W，超声 3 s，间隔 7 s，重复 30次），12,000 g，4℃离心 10 min，取上清液待测。
3. 血清（浆）等液体样本：取 0.5 mL样本，加入 0.5 mLWorking Reagent II 混匀（相当于稀释 2倍），12,000 g，4℃离心 10 min，取上清液待测。
注意：如需测定蛋白浓度，推荐使用 Abbkine货号：KTD3001的蛋白质定量试剂盒（BCA法）进行样本蛋白质浓度测定。
1. 酶标仪或可见光分光光度计预热 30 min以上，调节波长到 460 nm，可见光分光光度计用去离子水调零。
2. Working Reagent置于 37℃孵育 10 min。
3. 操作表（下述操作在 1.5 mL EP管中操作）：
| 试剂 | 测定孔（μL） | 对照孔（μL） |
|---|---|---|
| 样本 | 30 | 30 |
| ReagentⅠ | 0 | 270 |
| Working Reagent | 270 | 0 |
混匀，37℃孵育 30 min
| 试剂 | 测定孔（μL） | 对照孔（μL） |
|---|---|---|
| Reagent V | 3 | 3 |
4. 混匀，60℃孵育 10 min，迅速 12,000 g，室温离心 5 min，取 200 μL至 96孔板或微量玻璃比色皿中，记录 460 nm处吸光值，测定孔记为 A 测定，对照孔记为 A 对照。计算ΔA 测定=A 测定-A 对照。
注意：实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测定小于 0.01可适当加大样本量或者延长 37℃孵育时间，计算结果除以相应时间。如果ΔA 测定大于 0.5，样本可用Working Reagent II 进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数，或减少提取用样本量。
注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
A. 使用 96孔板测定的计算公式如下
单位的定义：每 mg组织蛋白在 37℃反应体系中每小时催化产生 1 μmol邻联茴香胺定义为一个酶活单位。
MPO (U/mg 蛋白)=ΔA÷(ε×d)×V 反总÷(Cpr×V 样)÷T=5,386.67×ΔA÷Cpr
单位的定义：每 g组织在 37℃反应体系中每小时催化产生 1 μmol邻联茴香胺定义为一个酶活单位。
MPO (U/g 鲜重)=ΔA÷(ε×d)×V 反总÷(W÷V 样总×V 样)÷T=5,386.67×ΔA÷W
单位的定义：每 104个细胞在 37℃反应体系中每小时催化产生 1 μmol邻联茴香胺定义为一个酶活单位。
MPO (U/104 cell)=ΔA÷(ε×d)×V 反总÷(n÷V 样总×V 样)÷T=5,386.67×ΔA÷n
单位的定义：每 mL液体在 37℃反应体系中每小时催化产生 1 μmol邻联茴香胺定义为一个酶活单位。
MPO (U/mL)=ΔA÷(ε×d)×V 反总÷V 样×F÷T=5,386.67×ΔA×F
ε：氧化型邻联茴香胺消光系数，7.5×10-3 mL/μmol/cm；d：光径，0.5 cm；V 反总：反应体系总体积，0.303 mL；V 样：加入反应体系中样本体积，0.03 mL；V 样总：加入Working Reagent II 体积，1 mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；T：反应时间，30 min=0.5 h；W：样本质量，g；n：细胞总数，以万计；F：液体样本前处理稀释倍数，2。
将上述计算公式中光径 d：0.5 cm调整为 d：1 cm进行计算即可。
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
请等待最新文献信息更新。
货号：BMU103
SuperKine™ 增强型抗体稀释液 (SuperKine™ Enhanced Antibody Dilution Buffer) 是一款即用型、通用型抗体稀释液，...
货号：BMU101
SuperKine™ 增强型ECL发光液（皮克级） (SuperKine™ West Pico PLUS Chemiluminescent Substrate) 是一套基于经典...
我们的技术团队为您提供全方位的产品支持服务
根据您的研究目标，提供个性化的实验设计方案
经验丰富的技术专家协助您解决实验中遇到的问题
7x24小时在线技术支持，随时为您答疑解惑
提供免费样品试用，让您先试后买更放心
