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活/死细胞双染色试剂盒

Live and Dead Cell Double Staining Kit

产品货号
KTA1001

产品特点:

  • 专为哺乳动物细胞优化,兼容贴壁与悬浮体系
  • 支持荧光显微镜流式细胞术双平台,实现快速、高通量细胞活力检测
  • 双色荧光信号分离度高,绿色活细胞红色死细胞一目了然,便于定量统计
  • 选择规格

    100 T
    ¥298
    现货(当天发货)
    500 T
    ¥598
    现货(当天发货)
    2000 T
    ¥1698
    现货(次日发货)
    🎉 限时优惠

    买2送1活动进行中!购买任意2个规格产品,免费赠送100μL装一支。

    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    亚科因生物研发的活/死细胞双染色试剂盒 (Live and Dead Cell Double Staining Kit, KTA1001)是一套基于荧光探针的快速双染体系,通过Ca-AM标记活细胞、PI标记死细胞,可在同一视野或流式通道内同时呈现细胞活力与死亡状态,为细胞毒性评估、药物筛选及细胞状态监测提供直观、可靠的数据。

    细胞毒性(cytotoxicity)指由外源化合物或环境刺激导致的单纯细胞杀伤事件,其发生机制可独立于凋亡或坏死。在药物开发、生物材料安全性评价及基础细胞生物学研究中,准确区分活细胞与死细胞是判断细胞生长抑制或死亡的关键环节。本试剂盒利用LiveDye(绿色荧光,Ex/Em=488/530 nm)穿透完整细胞膜并在胞内被酯酶激活,从而标记活细胞;而膜完整性受损的死细胞则允许NucleiDye(红色荧光,Ex/Em=535/617 nm)进入并与核酸结合,形成鲜明的双色对比。借助荧光显微镜或流式细胞仪,可在数分钟内完成细胞活力的定量分析。

    应用领域

    药物体外毒性筛查、肿瘤化疗敏感性评估、生物材料细胞相容性验证、细胞培养条件优化及基础细胞死亡机制研究。

    活/死细胞双染色试剂盒

    产品参数

    中文名称 活/死细胞双染色试剂盒
    英文名称 Live and Dead Cell Double Staining Kit
    产品货号 KTA1001
    试剂盒组分 • 活细胞染料:Ca-AM
    • 死细胞染料:PI
    • 实验缓冲液(10X)
    注意事项 NucleiDye是一种潜在的诱变剂,处理此试剂时,请采取适当的预防措施。
    保存建议 请参阅说明书中各个组分的存储条件。自发货之日起,在推荐温度下至少稳定12个月。
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    自备耗材

    • 24孔板、可调节式移液枪及枪头
    • 离心机
    • 荧光显微镜或流式细胞仪
    • 去离子水、PBS

    试剂准备

    Ca-AM: 冰上避光保存。

    PI: 冰上避光保存。

    1×Assay Buffer:用去离子水把 10×Assay Buffer稀释到 1×Assay Buffer。使用前加热到 37℃。

    Staining Solution: 每 1 mL Assay Buffer 中加入 1 µL Ca-AM 和 1 µL PI,根据使用样本的数量按比例放大实验。

    实验步骤

    A. 流式细胞术定量

    1. 用预期的方法处理细胞;
    2. 注意:对于所有的处理和未处理的细胞样本,建议把未染色的对照组细胞悬浮在 1×Assay Buffer(不含有 Ca-AM和 PI),用于流式细胞分析;
    3. 对于非贴壁细胞,收集 1-5×105个细胞离心 (4℃, 300 g, 5 min),用预冷的 PBS洗涤 2次,弃去 PBS。对于贴壁细胞,先用胰蛋白酶(不含 EDTA)消化细胞,然后离心;
    4. 在 500 uL Staining Solution 中悬浮细胞;
    5. 37℃避光孵育 15-30 min;
    6. 用流式细胞仪分析。

    B. 荧光显微镜检测

    1. 对于悬浮细胞:按照步骤 A.1到步骤 A.4进行流式细胞术,将步骤 A.4的细胞悬浮液放在载玻片上。用玻璃盖玻片盖住细胞。尽快使用适当的滤光片通过荧光显微镜分析细胞。
    2. 对于贴壁细胞,建议的方案如下:
    1. 在六孔板的盖玻片上养细胞,在 CO2细胞培养箱中 37℃培养至少 24 h,再进行后续实验;
    2. 用预期的方法处理细胞,在不含诱导剂条件下孵育细胞建立阴性对照组;
    3. 用 PBS 洗涤细胞两次;
    4. 把 0.5 mL 的 Staining solution 加入到细胞中,并在黑暗中于 37℃条件下孵育 15-30 min;
    5. 用 PBS 洗涤细胞两次;
    6. 将盖玻片覆盖到载玻片上,尽快使用适当的滤光片通过荧光显微镜分析细胞。

    注意:PI是一个潜在的诱变因子,使用本试剂时应采取适当的防护措施;Ca-AM 需要在干燥低温避光条件下储存,储存温度为-20℃。

    常见问题

    Q: 这个试剂盒染色后能固定再拍荧光吗?固定的话会不会影响染色结果?

    A: 该试剂盒区分活死细胞,不能固定

    Q: 细胞污染会影响实验结果吗?

    A: 会有影响的,有些污染的微生物会分解 Calcein-AM ,游离钙黄绿素吸附在死细胞碎片上会有荧光

    Q: 处理组细胞染色后既有绿光又有红光的是为什么呢?

    A: 双染情况可能是活细胞出现凋亡或膜损伤或者酯酶还有活性

    文献引用

    An implantable hydrogel-based phononic crystal for continuous and wireless monitoring of internal tissue strains.

    杂志名称: Nature Biomedical Engineering | 作者: Tian, Ye, et al.

    IF: 26.600 | 发表时间: 2025

    Magnetic soft microfiberbots for robotic embolization.

    杂志名称: Science Robotics | 作者: Liu, Xurui, et al.

    IF: 26 | 发表时间: 2024

    Bismuth-Nanosheet-Armed Pristine Silk Nanofiber Dressing for Multimodal Pathogenic Bacteria Eradication and Infected Wound Healing.

    杂志名称: Advanced Fiber Materials | 作者: Gu, Xiaoxue, et al.

    IF: 21.300 | 发表时间: 2025

    Subcellular Cavitation Bubbles Induce Cellular Mechanolysis and Collective Wound Healing in Ultrasound‐Inflicted Cell Ablation.

    杂志名称: Advanced Science | 作者: Bai, Ziyue, Zaimeng Li, and Yue Shao.

    IF: 14.100 | 发表时间: 2025

    Promoting bone regeneration with liquid crystal bone cement from a new perspective: Inhibiting BMSCs PANoptosis under aseptic inflammation.

    杂志名称: Chemical Engineering Journal | 作者: Zhang, Shuyun, et al.

    IF: 13 | 发表时间: 2024

    Anti-inflammatory coupled anti-angiogenic airway stent effectively suppresses tracheal in-stents restenosis.

    杂志名称: Journal of Nanobiotechnology | 作者: Zhao, Yanan, et al.

    IF: 12.600 | 发表时间: 2025

    Single-cell deconvolution algorithms analysis unveils autocrine IL11-mediated resistance to docetaxel in prostate cancer via activation of the JAK1/STAT4 pathway.

    杂志名称: Journal of Experimental & Clinical Cancer Research | 作者: Cheng, Bisheng, et al.

    IF: 11 | 发表时间: 2024

    MLCK inhibition induces synthetic lethality in MYC-driven cancer.

    杂志名称: Cancer Letters | 作者: Sun, Zhe, et al.

    IF: 10.100 | 发表时间: 2025

    A Laparoscopically Compatible Rapid‐Adhesion Bioadhesive for Asymmetric Adhesion, Non‐Pressing Hemostasis, and Seamless Seal.

    杂志名称: Advanced Healthcare Materials | 作者: Yang, Yueying, et al.

    IF: 10 | 发表时间: 2024

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