小鼠IgG ELISA试剂盒-EliKine™

Name: 小鼠IgG ELISA试剂盒-EliKine™
Brand: Abbkine
SKU: KTE7018
Price: 1598 CNY
Availability: InStock

EliKine™ Mouse IgG ELISA Kit

产品货号

KTE7018

产品特点：

高灵敏度检测：最低可检测0.5 ng/mL的小鼠IgG，满足低丰度样本分析需求

宽动态范围：标准曲线覆盖0.5-32 ng/mL，适配不同浓度样本的定量需求

即用型设计：包含预包被微孔板及全套试剂组分，实验流程标准化

多样本兼容：适用于细胞培养上清、血清、血浆等常见生物液体类型

严格质控：提供冻干标准品确保批次间一致性，配套详细操作注意事项

选择规格

48 T

¥1598

现货（次日发货）

96 T

¥2558

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🎉 限时优惠

买2送1活动进行中！购买任意2个规格产品，免费赠送100μL装一支。

活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

EliKine™ 小鼠IgG ELISA试剂盒是一款基于双抗体夹心法的酶联免疫吸附检测系统，专为定量测定小鼠来源样本中的免疫球蛋白G（IgG）而设计。该试剂盒通过预包被特异性捕获抗体与酶标检测抗体协同作用，可在细胞培养上清、血清、血浆及其他生物液体中实现IgG的精准定量。

背景信息
免疫球蛋白G（IgG）是由两条重链和两条轻链构成的多聚体抗体，占人类血清免疫球蛋白总量的75%，广泛分布于血液和组织液中。其双抗原结合位点结构使其能够高效识别病毒、细菌及真菌等病原体，通过经典补体激活途径、调理吞噬作用及毒素中和机制发挥免疫防御功能。本试剂盒利用IgG的特异性抗原表位识别特性，采用夹心ELISA技术，通过显色反应强度与标准品浓度梯度比对，实现0.5-32 ng/mL范围内的线性定量检测。

应用领域
该试剂盒适用于免疫学研究、抗体药物开发、疫苗效力评估及细胞治疗质量控制等场景，特别适用于小鼠模型中IgG水平的动态监测，如单克隆抗体生产过程中的表达量分析、免疫应答评估及疾病模型中的抗体效价测定。

产品参数

中文名称	小鼠IgG ELISA试剂盒-EliKine™
英文名称	EliKine™ Mouse IgG ELISA Kit
产品货号	KTE7018
反应性	小鼠
检测类型	ELISA
检测方法	夹心法
样本类型	细胞培养上清#血清#血浆#其它生物液体
试剂盒组分	•小鼠IgG微孔板 •小鼠IgG标准品•样品稀释剂 •分析缓冲液 •检测抗体 •色原体溶液 •停止溶液 •洗涤缓冲液 •板盖。
检测范围	0.5 ng/mL- 32 ng/mL
灵敏度	0.5 ng/mL
检测指标	IgG
注意事项	• Do not mix components from different kit lots or use reagents beyond the kit expiration date. • Allow all reagents to warm to room temperature for at least 30 minutes before opening. • Pre-rinse the pipet tip with reagent, use fresh pipet tips for each sample, standard and reagent to avoid contamination. • Unused wells must be kept desiccated at 4 °C in the sealed bag provided. • Mix Thoroughly is very important for the result. It is recommended using low frequency oscillator or slight hand shaking every 10 minutes. • It is recommended that all samples and standards be assayed in duplicate or triplicate.
保存建议	请将未开封使用的试剂盒保存于2-9℃；启用后的试剂盒，请参考说明书保存各个组分。
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

自备耗材

酶标仪（能测 450 nm处的吸光度）
多通道移液器或自动洗板机
恒温箱、低温离心机
可调节式移液枪及枪头
去离子水

酶标仪（能测 450 nm处的吸光度）

多通道移液器或自动洗板机

恒温箱、低温离心机

可调节式移液枪及枪头

去离子水

试剂准备

1×Sample Diluent：使用前，平衡到室温，用去离子水按 1：5的比例稀释 Sample Diluent (5×)得到 1×Sample Diluent，轻轻混合以避免起泡。4℃保存，此溶液可稳定保存 30天。1×Sample Diluent用于稀释标准品，血清和血浆样品。

1×Sample Diluent：

1×Assay Buffer：使用前，平衡到室温，用去离子水按 1：5的比例稀释 Assay Buffer (5×)得到 1×Assay Buffer，轻轻混合以避免起泡。4℃保存，此溶液可稳定保存 30天。1×Assay Buffer用于稀释 HRP-conjugated Mouse IgG Detect Antibody (100×)。

1×Assay Buffer：

Mouse IgG Standard: 加入 1 mL 1×Sample Diluent复溶 Mouse IgG Standard得到 32 ng/mL标准品。在进行稀释之前，将标准品至少放置 15 min并轻轻晃动。

Mouse IgG Standard:

1×HRP-conjugated Mouse IgG Detect Antibody：稀释前充分混合。根据标准品和样品所需要的量，在干净的塑料管中用 1×Assay Buffer对 HRP-conjugated Mouse IgG Detect Antibody（100×）进行 1:100 稀释。1×HRP-conjugated Mouse IgG Detect Antibody应在稀释后 30 min内使用。

1×HRP-conjugated Mouse IgG Detect Antibody：

HRP Substrate (TMB)：即用型；使用前，平衡到室温；4℃避光保存。

HRP Substrate (TMB)：

Stop Solution：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。

Stop Solution：

1×Wash Buffer：使用前平衡到室温，用去离子水进行 1:20稀释Wash Buffer (20×)得到 1×Wash Buffer。轻轻混合以避免起泡，室温保存，此溶液可稳定保存 30天。

1×Wash Buffer：

标准曲线设置

按下表所示，用 1×Sample Diluent将 32 ng/mL标准品稀释为 32、16、8、4、2、1、0.5、0 ng/mL的 Mouse IgG标准品。

序号	标准品体积	1×Sample Diluent体积 (μL)	标准品浓度（ng/mL）
Std.1	1,000 µL of 32 ng/mL	0	32
Std.2	500 µL of Std.1 (32 ng/mL)	500	16
Std.3	500 µL of Std.2 (16 ng/mL)	500	8
Std.4	500 µL of Std.3 (8 ng/mL)	500	4
Std.5	500 µL of Std.4 (4 ng/mL)	500	2
Std.6	500 µL of Std.5 (2 ng/mL)	500	1
Std.7	500 µL of Std.6 (1 ng/mL)	500	0.5
Std.8	0	500	0

序号	标准品体积	1×Sample Diluent体积 (μL)	标准品浓度（ng/mL）
Std.1	1,000 µL of 32 ng/mL	0	32
Std.2	500 µL of Std.1 (32 ng/mL)	500	16
Std.3	500 µL of Std.2 (16 ng/mL)	500	8
Std.4	500 µL of Std.3 (8 ng/mL)	500	4
Std.5	500 µL of Std.4 (4 ng/mL)	500	2
Std.6	500 µL of Std.5 (2 ng/mL)	500	1
Std.7	500 µL of Std.6 (1 ng/mL)	500	0.5
Std.8	0	500	0

序号标准品体积1×Sample Diluent体积 (μL)标准品浓度（ng/mL）序号标准品体积1×Sample Diluent体积 (μL)标准品浓度（ng/mL）序号标准品体积1×Sample Diluent体积 (μL)标准品浓度（ng/mL）Std.11,000 µL of 32 ng/mL032Std.2500 µL of Std.1 (32 ng/mL)50016Std.3500 µL of Std.2 (16 ng/mL)5008Std.4500 µL of Std.3 (8 ng/mL)5004Std.5500 µL of Std.4 (4 ng/mL)5002Std.6500 µL of Std.5 (2 ng/mL)5001Std.7500 µL of Std.6 (1 ng/mL)5000.5Std.805000Std.11,000 µL of 32 ng/mL032Std.11,000 µL of 32 ng/mL032Std.2500 µL of Std.1 (32 ng/mL)50016Std.2500 µL of Std.1 (32 ng/mL)50016Std.3500 µL of Std.2 (16 ng/mL)5008Std.3500 µL of Std.2 (16 ng/mL)5008Std.4500 µL of Std.3 (8 ng/mL)5004Std.4500 µL of Std.3 (8 ng/mL)5004Std.5500 µL of Std.4 (4 ng/mL)5002Std.5500 µL of Std.4 (4 ng/mL)5002Std.6500 µL of Std.5 (2 ng/mL)5001Std.6500 µL of Std.5 (2 ng/mL)5001Std.7500 µL of Std.6 (1 ng/mL)5000.5Std.7500 µL of Std.6 (1 ng/mL)5000.5Std.805000Std.805000

注意：每次实验都需要新配制标准品。

注意：

样本制备

1. 细胞培养上清：离心除去颗粒，立即测定或分装-20℃保存，避免反复冻融。

1. 细胞培养上清：

2. 血清：使用血清分离管，让样品在室温下凝结 30 min，然后 1,000 g 离心 15 min。取上层血清立即测定或分装-20℃保存，避免反复冻融。

2. 血清：

3. 血浆：使用 EDTA、肝素或柠檬酸盐作为抗凝剂收集血浆。在收集后 30 min内 1,000 g离心 15 min。立即测定或分装-20℃保存，避免反复冻融。

3. 血浆：

注意：不要使用严重溶血或脂血的标本。如果样品要在 24 h内使用，则可以将其储存在 2至 8℃，避免反复冻融。测定前，应将冷冻样品缓慢升至室温并轻轻混合。

注意：

实验步骤

从板框上取下多余的板条，将它们放回装有干燥剂包的铝箔袋中，然后重新密封。
每孔加入 100 μL稀释的标准品或样品。建议所有标准品和样品做复孔。给酶标板覆膜，在室温下孵育 2 h。
除去每孔中的液体并洗涤，重复该过程总共洗涤三次。使用多通道移液器或自动清洗机每孔加入 250 μL 1×Wash Buffer进行洗涤，然后静置 1-2 min。在每个步骤中完全去除液体对于获得良好性能至关重要。最后一次洗涤后，倒置酶标板并用干净的纸巾吸干以除去任何剩余的 1×Wash Buffer。
每孔加入 100 μL 1×HRP-conjugated Mouse IgG Detect Antibody。给酶标板覆膜，在室温下孵育 1 h。
按照步骤 3重复洗涤过程 5次。
每孔加入 100 μL HRP Substrate（TMB）。给酶标板覆膜，并在室温下避光孵育 15 min。
每孔加入 50 μL Stop Solution，Stop Solution应按照与 TMB 相同的顺序加到板中。孔中的颜色应从蓝色变为黄色。如果孔中的颜色为绿色或颜色变化不均匀，请轻轻敲击板以确保彻底混合。
在 30 min内，测定每孔 450 nm处的吸光值。

从板框上取下多余的板条，将它们放回装有干燥剂包的铝箔袋中，然后重新密封。

每孔加入 100 μL稀释的标准品或样品。建议所有标准品和样品做复孔。给酶标板覆膜，在室温下孵育 2 h。

除去每孔中的液体并洗涤，重复该过程总共洗涤三次。使用多通道移液器或自动清洗机每孔加入 250 μL 1×Wash Buffer进行洗涤，然后静置 1-2 min。在每个步骤中完全去除液体对于获得良好性能至关重要。最后一次洗涤后，倒置酶标板并用干净的纸巾吸干以除去任何剩余的 1×Wash Buffer。

每孔加入 100 μL 1×HRP-conjugated Mouse IgG Detect Antibody。给酶标板覆膜，在室温下孵育 1 h。

按照步骤 3重复洗涤过程 5次。

每孔加入 100 μL HRP Substrate（TMB）。给酶标板覆膜，并在室温下避光孵育 15 min。

每孔加入 50 μL Stop Solution，Stop Solution应按照与 TMB 相同的顺序加到板中。孔中的颜色应从蓝色变为黄色。如果孔中的颜色为绿色或颜色变化不均匀，请轻轻敲击板以确保彻底混合。

在 30 min内，测定每孔 450 nm处的吸光值。

结果计算

计算每个标准品和样品的复孔平均 OD值，并减去零浓度（Std.8）平均 OD值。
标准曲线的绘制：以标准品浓度为 x轴，各标准品的平均吸光度为 y轴，绘制标准曲线。可以使用作图软件来创建标准曲线。

计算每个标准品和样品的复孔平均 OD值，并减去零浓度（Std.8）平均 OD值。

标准曲线的绘制：以标准品浓度为 x轴，各标准品的平均吸光度为 y轴，绘制标准曲线。可以使用作图软件来创建标准曲线。

注意：如果样品被稀释，从标准曲线读取的浓度必须乘以稀释系数。

注意：

常见问题

Q: 普通大分子蛋白ELISA检测的原理是什么？

A: 双抗体夹心法是检测大分子抗原最常用的方法。双抗夹心法ELISA是将特异性抗体结合到固相载体上形成固相抗体，然后和待检样本中的相应抗原结合形成免疫复合物，洗涤后再加酶标记抗体，与免疫复合物中抗原结合形成酶标抗体— 抗原—固相抗体复合物，加底物显色，判断抗原含量；

Q: 试剂盒检测一个样品孔，一般用多少样本量？

A: 稀释好的液体样本100 μL，细胞样本1-2×106个cells，组织样本1 g左右。

Q: 为什么我们的ELISA试剂盒的最大吸收波长是450nm？

A: 因为TMB显色染料经过硫酸终止之后在450nm处有最大吸收峰，所以用酶标仪检测450nm处的OD值。

Q: 开封之后，未用完的ELISA酶标板的保存方法和保存时间？

A: 开封的酶标板应密封后在-20度保存，能保存一个月。

Q: ELISA实验制作标曲，X轴和Y轴弄反了，是否对结果有影响？

A: 无影响，只是计算的时候需注意，样本的OD值应代入计算式的X值中。

Q: 样本前处理：血加在抗凝管里后,离心出来的是血清还是血浆？

A: 血浆。

Q: 该系列试剂盒能否满足客户间断性采样的要求？

A: 可以满足，连续取的样本如果1周内检测，需保存于4℃；如1个月内检测，按一次使用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融；如6个月内检测，分装保存于-80℃，避免反复冻融。

Q: ELISA试验的标准曲线和测定的重复性差，这是由什么原因造成的？

A: 1. 加样本及试剂量不准，孔间不一致----重复测定时保持与上次操作条件一致； 2. 加样过快，孔间发生污染----加样不能过快； 3. 加样本及试剂时，加在孔壁上部非包被区----加样时枪头不要贴壁； 4. 不同批号试剂盒中组分混用----不同批号试剂盒中组分不可混用； 5. 温育时间、洗板、显色时间不一致----操作时间保持一致； 6. 试剂/样品没有混匀----充分混匀样品和试剂。

Q: 该类试剂盒的指标如何查找？

A: 建议在Abbkine官网搜索“KET”，客户可以了解到相关指标。如有疑问，请联系support@abbkine.com进行详细咨询。

Q: 该类试剂盒的标准品稀释液中偶见沉淀，应如何处理？

A: 为了避免基质效应，ELISA 试剂盒针对不同的样本都会配备不同的稀释液。一些稀释液，特别是血清稀释液的配方中，会含有一些动物蛋白成分（比如 BSA）和溶解度较低的盐。这些成分在低温或是稀释液微量蒸发的情况下，会出现结晶或浑浊的现象。在试剂盒开发的过程中，我们研发人员开展的大量验证实验表明，稀释液的沉淀不会影响试剂的使用性能。

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结果计算

常见问题

Q: 普通大分子蛋白ELISA检测的原理是什么？

Q: 试剂盒检测一个样品孔，一般用多少样本量？

Q: 为什么我们的ELISA试剂盒的最大吸收波长是450nm？

Q: 开封之后，未用完的ELISA酶标板的保存方法和保存时间？

Q: ELISA实验制作标曲，X轴和Y轴弄反了，是否对结果有影响？

Q: 样本前处理：血加在抗凝管里后,离心出来的是血清还是血浆？

Q: 该系列试剂盒能否满足客户间断性采样的要求？

Q: ELISA试验的标准曲线和测定的重复性差，这是由什么原因造成的？

Q: 该类试剂盒的指标如何查找？

Q: 该类试剂盒的标准品稀释液中偶见沉淀，应如何处理？

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