小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 ELISA定量试剂盒-EliKine™

Name: 小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 ELISA定量试剂盒-EliKine™
Brand: Abbkine
SKU: KTE7002
Price: 1598 CNY
Availability: InStock

EliKine™ Mouse GM-CSF ELISA Kit

产品货号

KTE7002

产品特点：

高灵敏度：检测限低至4 pg/mL，可准确捕捉低丰度GM-CSF

高特异性：针对小鼠GM-CSF设计，与同源蛋白交叉反应极低

宽线性范围：7.8–500 pg/mL，覆盖生理及病理状态下的表达差异

即用型预包被板：节省实验准备时间，减少批间差异

兼容多种样本：细胞培养上清、血清、血浆及其他生物液体均可直接检测

选择规格

48 T

¥1598

现货（次日发货）

96 T

¥2558

现货（次日发货）

🎉 限时优惠

买2送1活动进行中！购买任意2个规格产品，免费赠送100μL装一支。

活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

EliKine™ 小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 ELISA定量试剂盒（EliKine™ Mouse GM-CSF ELISA Kit, Cat. No. KTE7002）是一款基于经典双抗体夹心法的高灵敏度酶联免疫检测工具，专为定量检测小鼠来源样本中的GM-CSF蛋白而设计。试剂盒预包被特异性抗小鼠GM-CSF捕获抗体，配合生物素化检测抗体及Streptavidin-HRP信号放大系统，可在7.8 pg/mL–500 pg/mL的线性范围内实现精准定量，最低检测限达4 pg/mL。

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）是一种多效性细胞因子，由巨噬细胞、T细胞、肥大细胞、内皮细胞及成纤维细胞等多种细胞分泌，分子量约14–35 kDa。小鼠GM-CSF由141个氨基酸残基构成，其信号肽为17个氨基酸。GM-CSF通过促进造血干细胞向粒细胞与巨噬细胞谱系分化，在炎症反应、免疫调节及造血稳态中扮演关键角色。研究表明，GM-CSF表达异常与前列腺癌、甲状腺癌、真菌感染、艾滋病、骨髓移植后并发症、肾细胞癌、肺部炎症及多种血液系统恶性肿瘤密切相关。因此，准确测定小鼠模型中的GM-CSF水平对于疾病机制研究、药效评价及免疫微环境解析具有重要意义。

应用领域

本试剂盒适用于免疫学、肿瘤学、炎症研究、感染性疾病模型及造血干细胞移植研究等领域，可用于：

小鼠炎症或肿瘤模型中GM-CSF表达动态监测
药物干预后免疫微环境变化评估
细胞因子风暴相关机制研究
体外诱导巨噬细胞或树突状细胞分化实验中GM-CSF用量优化

产品参数

中文名称	小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 ELISA定量试剂盒-EliKine™
英文名称	EliKine™ Mouse GM-CSF ELISA Kit
产品货号	KTE7002
反应性	小鼠
检测类型	ELISA
检测方法	夹心法
样本类型	细胞培养上清#血清#血浆#其它生物液体
试剂盒组分	• 小鼠源 GM-CSF 抗体预包被微孔板 • 小鼠源 GM-CSF蛋白标准品 • 小鼠源 GM-CSF检测抗体 • Streptavidin-HRP • 标准品稀释液 • 实验缓冲液 • HRP底物 • 反应终止液 • 洗涤缓冲液 • 封板膜.
检测范围	7.8 pg/mL-500 pg/mL
灵敏度	4 pg/mL
基因ID	12981
蛋白质ID	P01587
蛋白序列链接	http://www.uniprot.org/uniprot/P01587
检测指标	GM-CSF
注意事项	• 试剂盒的试剂不能与其它批号的试剂或超出有效期的试剂混合使用。 • 试剂应按瓶上标签说明储存，使用前室温平衡30 分钟。 • 实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。 • 实验中未用的板条立即放回包装中，密闭封口，4℃保存。 • 充分混匀对反应结果尤为重要，推荐使用低速频率振荡器或者每10分钟手动摇匀。 • 对于样品和标准品，建议做双孔或者三孔检测（复孔）。.
保存建议	请将未开封使用的试剂盒保存于2-8℃；启用后的试剂盒，请参考说明书保存各个组分。
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

自备耗材

酶标仪（能测 450 nm处的吸光度）
多通道移液器或自动洗板机
恒温箱、低温离心机
可调节式移液枪及枪头
去离子水

酶标仪（能测 450 nm处的吸光度）

多通道移液器或自动洗板机

恒温箱、低温离心机

可调节式移液枪及枪头

去离子水

试剂准备

1×Sample Diluent：使用前，平衡到室温，用去离子水按 1：5的比例稀释 Sample Diluent (5×)得到 1×Sample Diluent，轻轻混合以避免起泡。4℃保存，此溶液可稳定保存 30天。 1×Sample Diluent用于稀释标准品，血清和血浆样品。

1×Sample Diluent：

1×Assay Buffer：使用前，平衡到室温，用去离子水按 1：5的比例稀释 Assay Buffer (5×)得到 1×Assay Buffer，轻轻混合以避免起泡。4℃保存，此溶液可稳定保存 30天。1×Assay Buffer用于稀释Mouse GM-CSF Detect Antibody (100×)和 Streptavidin-HRP (100×)。

1×Assay Buffer：

Mouse GM-CSF Standard: 加入 0.75 mL 1×Sample Diluent复溶Mouse GM-CSF Standard得到 500 pg/mL标准品。在进行稀释之前，将标准品至少放置 15 min并轻轻晃动。

Mouse GM-CSF Standard:

1×Mouse GM-CSF Detect Antibody： 稀释前充分混合。根据标准品和样品所需要的量，在干净的塑料管中用 1×Assay Buffer对 Mouse GM-CSF Detect Antibody (100×)进行 1:100稀释。1×Mouse GM-CSF Detect Antibody应在稀释后 30 min内使用。

1×Mouse GM-CSF Detect Antibody：

1×Streptavidin-HRP：稀释前充分混合。根据标准品和样品所需要的量，在干净的塑料管中用 1×Assay Buffer对 Streptavidin-HRP (100×)进行 1:100稀释。1×Streptavidin-HRP应在 30 min内使用。

1×Streptavidin-HRP：

HRP Substrate (TMB)：即用型；使用前，平衡到室温；4℃避光保存。

HRP Substrate (TMB)：

Stop Solution：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。

Stop Solution：

1×Wash Buffer：使用前平衡到室温，用去离子水进行 1:20稀释Wash Buffer (20×)得到 1×Wash Buffer。轻轻混合以避免起泡，室温保存，此溶液可稳定保存 30天。

1×Wash Buffer：

标准曲线设置：按下表所示，用 1×Sample Diluent将 500 pg/mL标准品稀释为 500、250、125、62.5、31.25、15.63、7.82、0 pg/mL的 Mouse GM-CSF标准品。

标准曲线设置：

序号	标准品体积	1×Sample Diluent体积 (μL)	标准品浓度（pg/mL）
Std.1	750 µL of 500 pg/mL	0	500
Std.2	375 µL of Std.1 (500 pg/mL）	375	250
Std.3	375 µL of Std.2 (250 pg/mL）	375	125
Std.4	375 µL of Std.3 (125 pg/mL)	375	62.5
Std.5	375 µL of Std.4 (62.5 pg/mL)	375	31.25
Std.6	375 µL of Std.5 (31.25 pg/mL)	375	15.63
Std.7	375 µL of Std.6 (15.63 pg/mL)	375	7.82
Std.8	0	375	0

序号标准品体积1×Sample Diluent体积 (μL)标准品浓度（pg/mL）序号标准品体积1×Sample Diluent体积 (μL)标准品浓度（pg/mL）序号标准品体积1×Sample Diluent体积 (μL)标准品浓度（pg/mL）Std.1750 µL of 500 pg/mL0500Std.2375 µL of Std.1 (500 pg/mL）375250Std.3375 µL of Std.2 (250 pg/mL）375125Std.4375 µL of Std.3 (125 pg/mL)37562.5Std.5375 µL of Std.4 (62.5 pg/mL)37531.25Std.6375 µL of Std.5 (31.25 pg/mL)37515.63Std.7375 µL of Std.6 (15.63 pg/mL)3757.82Std.803750Std.1750 µL of 500 pg/mL0500Std.1750 µL of 500 pg/mL0500Std.2375 µL of Std.1 (500 pg/mL）375250Std.2375 µL of Std.1 (500 pg/mL）375250Std.3375 µL of Std.2 (250 pg/mL）375125Std.3375 µL of Std.2 (250 pg/mL）375125Std.4375 µL of Std.3 (125 pg/mL)37562.5Std.4375 µL of Std.3 (125 pg/mL)37562.5Std.5375 µL of Std.4 (62.5 pg/mL)37531.25Std.5375 µL of Std.4 (62.5 pg/mL)37531.25Std.6375 µL of Std.5 (31.25 pg/mL)37515.63Std.6375 µL of Std.5 (31.25 pg/mL)37515.63Std.7375 µL of Std.6 (15.63 pg/mL)3757.82Std.7375 µL of Std.6 (15.63 pg/mL)3757.82Std.803750Std.803750

注意：每次实验都需要新配制标准品。

样本制备

细胞培养上清：离心除去颗粒，立即测定或分装-20℃保存，避免反复冻融。
血清：使用血清分离管，让样品在室温下凝结 30 min，然后 1,000 g 离心 15 min。取上层血清立即测定或分装-20℃保存，避免反复冻融。
血浆：使用 EDTA、肝素或柠檬酸盐作为抗凝剂收集血浆。在收集后 30 min内 1,000 g离心 15 min。立即测定或分装-20℃保存，避免反复冻融。

细胞培养上清：离心除去颗粒，立即测定或分装-20℃保存，避免反复冻融。

血清：使用血清分离管，让样品在室温下凝结 30 min，然后 1,000 g 离心 15 min。取上层血清立即测定或分装-20℃保存，避免反复冻融。

血浆：使用 EDTA、肝素或柠檬酸盐作为抗凝剂收集血浆。在收集后 30 min内 1,000 g离心 15 min。立即测定或分装-20℃保存，避免反复冻融。

注意：不要使用严重溶血或脂血的标本。如果样品要在 24 h内使用，则可以将其储存在 2至 8℃，避免反复冻融。测定前，应将冷冻样品缓慢升至室温并轻轻混合。

实验步骤

从板框上取下多余的板条，将它们放回装有干燥剂包的铝箔袋中，然后重新密封。
每孔加入 100 μL稀释的标准品或样品。建议所有标准品和样品做复孔。给酶标板覆膜，在室温下孵育 2 h。
除去每孔中的液体并洗涤，重复该过程总共洗涤三次。使用多通道移液器或自动清洗机每孔加入 250 μL 1×Wash Buffer进行洗涤，然后静置 1-2 min。在每个步骤中完全去除液体对于获得良好性能至关重要。最后一次洗涤后，倒置酶标板并用干净的纸巾吸干以除去任何剩余的 1×Wash Buffer。
每孔加入 100 μL 1×Mouse GM-CSF Detect Antibody。给酶标板覆膜，在室温下孵育 1 h。
重复步骤 3中的洗涤。
每孔加入 100 μL 1×Streptavidin-HRP。给酶标板覆膜，在室温下孵育 30 min，注意避光。
按照步骤 3重复洗涤过程 5次。
每孔加入 100 μL HRP Substrate (TMB)。给酶标板覆膜，并在室温下避光孵育 15 min。
每孔加入 50 μL Stop Solution，Stop Solution应按照与 TMB 相同的顺序加到板中。孔中的颜色应从蓝色变为黄色。如果孔中的颜色为绿色或颜色变化不均匀，请轻轻敲击板以确保彻底混合。
在 30 min内，测定每孔 450 nm处的吸光值。

从板框上取下多余的板条，将它们放回装有干燥剂包的铝箔袋中，然后重新密封。

每孔加入 100 μL稀释的标准品或样品。建议所有标准品和样品做复孔。给酶标板覆膜，在室温下孵育 2 h。

除去每孔中的液体并洗涤，重复该过程总共洗涤三次。使用多通道移液器或自动清洗机每孔加入 250 μL 1×Wash Buffer进行洗涤，然后静置 1-2 min。在每个步骤中完全去除液体对于获得良好性能至关重要。最后一次洗涤后，倒置酶标板并用干净的纸巾吸干以除去任何剩余的 1×Wash Buffer。

每孔加入 100 μL 1×Mouse GM-CSF Detect Antibody。给酶标板覆膜，在室温下孵育 1 h。

重复步骤 3中的洗涤。

每孔加入 100 μL 1×Streptavidin-HRP。给酶标板覆膜，在室温下孵育 30 min，注意避光。

按照步骤 3重复洗涤过程 5次。

每孔加入 100 μL HRP Substrate (TMB)。给酶标板覆膜，并在室温下避光孵育 15 min。

每孔加入 50 μL Stop Solution，Stop Solution应按照与 TMB 相同的顺序加到板中。孔中的颜色应从蓝色变为黄色。如果孔中的颜色为绿色或颜色变化不均匀，请轻轻敲击板以确保彻底混合。

在 30 min内，测定每孔 450 nm处的吸光值。

结果计算

计算每个标准品和样品的复孔平均 OD值，并减去零浓度（Std.8）平均 OD值。
标准曲线的绘制：以标准品浓度为 x轴，各标准品的平均吸光度为 y轴，绘制标准曲线。可以使用作图软件来创建标准曲线。

计算每个标准品和样品的复孔平均 OD值，并减去零浓度（Std.8）平均 OD值。

标准曲线的绘制：以标准品浓度为 x轴，各标准品的平均吸光度为 y轴，绘制标准曲线。可以使用作图软件来创建标准曲线。

注意：如果样品被稀释，从标准曲线读取的浓度必须乘以稀释系数。

常见问题

Q: 普通大分子蛋白ELISA检测的原理是什么？

A: 双抗体夹心法是检测大分子抗原最常用的方法。双抗夹心法ELISA是将特异性抗体结合到固相载体上形成固相抗体，然后和待检样本中的相应抗原结合形成免疫复合物，洗涤后再加酶标记抗体，与免疫复合物中抗原结合形成酶标抗体— 抗原—固相抗体复合物，加底物显色，判断抗原含量；

Q: 试剂盒检测一个样品孔，一般用多少样本量？

A: 稀释好的液体样本100 μL，细胞样本1-2×106个cells，组织样本1 g左右。

Q: 为什么我们的ELISA试剂盒的最大吸收波长是450nm？

A: 因为TMB显色染料经过硫酸终止之后在450nm处有最大吸收峰，所以用酶标仪检测450nm处的OD值。

Q: 开封之后，未用完的ELISA酶标板的保存方法和保存时间？

A: 开封的酶标板应密封后在-20度保存，能保存一个月。

Q: ELISA实验制作标曲，X轴和Y轴弄反了，是否对结果有影响？

A: 无影响，只是计算的时候需注意，样本的OD值应代入计算式的X值中。

Q: 样本前处理：血加在抗凝管里后,离心出来的是血清还是血浆？

A: 血浆。

Q: 该系列试剂盒能否满足客户间断性采样的要求？

A: 可以满足，连续取的样本如果1周内检测，需保存于4℃；如1个月内检测，按一次使用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融；如6个月内检测，分装保存于-80℃，避免反复冻融。

Q: ELISA试验的标准曲线和测定的重复性差，这是由什么原因造成的？

A: 1. 加样本及试剂量不准，孔间不一致----重复测定时保持与上次操作条件一致； 2. 加样过快，孔间发生污染----加样不能过快； 3. 加样本及试剂时，加在孔壁上部非包被区----加样时枪头不要贴壁； 4. 不同批号试剂盒中组分混用----不同批号试剂盒中组分不可混用； 5. 温育时间、洗板、显色时间不一致----操作时间保持一致； 6. 试剂/样品没有混匀----充分混匀样品和试剂。

Q: 该类试剂盒的指标如何查找？

A: 建议在Abbkine官网搜索“KET”，客户可以了解到相关指标。如有疑问，请联系support@abbkine.com进行详细咨询。

Q: 该类试剂盒的标准品稀释液中偶见沉淀，应如何处理？

A: 为了避免基质效应，ELISA 试剂盒针对不同的样本都会配备不同的稀释液。一些稀释液，特别是血清稀释液的配方中，会含有一些动物蛋白成分（比如 BSA）和溶解度较低的盐。这些成分在低温或是稀释液微量蒸发的情况下，会出现结晶或浑浊的现象。在试剂盒开发的过程中，我们研发人员开展的大量验证实验表明，稀释液的沉淀不会影响试剂的使用性能。

文献引用

请等待最新文献信息更新。

专业技术支持

我们的技术团队为您提供全方位的产品支持服务

实验方案设计

根据您的研究目标，提供个性化的实验设计方案

问题排查

经验丰富的技术专家协助您解决实验中遇到的问题

在线技术咨询

7x24小时在线技术支持，随时为您答疑解惑

免费样品申请

提供免费样品试用，让您先试后买更放心

分享产品