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土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
CheKine™ Micro Soil Leucine Arylamidase (S-LAP) Activity Assay Kit
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活动截止时间:2024年1月31日
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CheKine™ 土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)活性检测试剂盒(微量法)是一款基于比色法的微量检测工具,可在常规实验室条件下快速测定土壤样品中由微生物分泌的亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)活性,为研究土壤氮素循环及微生物代谢功能提供可靠数据。
S-LAP(Soil Leucine Arylamidase)是一类专一性水解肽链N-末端亮氨酸残基的胞外酶,主要由土壤细菌与真菌分泌。其活性高低直接反映土壤微生物对有机氮的矿化潜力,并与土壤肥力、植物营养供应及某些病理状态密切相关。本试剂盒利用S-LAP催化底物释放显色产物,在特定波长下通过比色法测定吸光度变化,从而定量计算酶活性。试剂盒配套ReagentⅠ与ReagentⅡ,操作步骤与结果计算公式均已优化,适合大批量土壤样本的快速筛查。
适用于农业生态、环境科学及土壤微生物学研究中土壤样品细胞代谢水平的评估,广泛用于监测土壤氮素转化效率、评价施肥措施对微生物功能的影响,以及探索土壤健康与植物病理状态的关联机制。
| 中文名称 | 土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Soil Leucine Arylamidase (S-LAP) Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB4020 |
| 检测类型 | 水土检测 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | • ReagentⅠ • ReagentⅡ |
| 分子 | S-LAP |
| 检测指标 | S-LAP |
| 注意事项 | • 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用;否则,可能导致结果异常。 • 产品经过严苛质量检测。欢迎随时与我们联系,我们致力于客户成功和客户满意。 |
| 保存建议 | 从发货之日起,4℃,避光保存12个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输(蓝冰) |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。 |
注意:正式检测前,建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。
ReagentⅠ:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
ReagentⅡ:临用前配制;临用前加入 36 mL ReagentⅠ;充分溶解待用(较难溶解时,可 60℃水浴加热约 30 min促进溶解),-20℃分装保存,禁止反复冻融。
注意:ReagentⅡ有一定的刺激性,建议在使用过程中做好个人防护。
推荐使用新鲜土壤样本
| 试剂盒组分 | 规格 | 储存条件 |
|---|---|---|
| ReagentⅠ | 72 mL | 4℃ |
| ReagentⅡ Powder×1 vial | - | 4℃,避光保存 |
1. 酶标仪或可见分光光度计预热 30 min,调节波长到 405 nm。可见分光光度计用去离子水调零。
2. 酶促反应(下述操作在 1.5 mL离心管中操作):
| 试剂 | 测定管(μL) | 对照管(μL) |
|---|---|---|
| 样本(mg) | 50 | 50 |
| ReagentⅠ | 0 | 300 |
| ReagentⅡ | 300 | 0 |
混匀,37℃振荡反应 1 h后,8,000 g,4℃离心 10 min,取 200 μL上清液于 96孔板或微量玻璃比色皿中,405 nm处测定吸光值 A,计算ΔA 测定=A 测定 - A 对照。每个测定管设一个对照管。
注意:实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测定小于 0.02可适当加大样本量。如果ΔA 测定 大于 1.0,样本可用 ReagentⅠ稀释后进一步稀释,计算结果乘以稀释倍数,或减少提取用样本量。
注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
单位的定义:每克土样每分钟生成 1 nmol对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。
S-LAP (U/g 土样)=ΔA×V 反总÷(ε×d)×109÷W÷T=1.013×ΔA÷W
V 反总:反应体系总体积,3×10-4 L;ε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.87×103 L/mol/cm;d:微量比色皿光径,0.5 cm;T:反应时间,1 h=60 min; W:样本质量,g;109 : 单位换算系数,1 mol=1×109 nmol。
将上述计算公式中的光径 d: 0.5 cm调整为 d: 1 cm进行计算即可。
A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
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