细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(绿色荧光)

Name: 细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(绿色荧光)
Brand: Abbkine
SKU: KTA2021
Price: 416 CNY
Availability: InStock

Cell Cycle and Apoptosis Detection Kit (Green Fluorescence)

产品货号

KTA2021

产品特点：

绿色荧光通道检测，与常用FITC、GFP等染料兼容，避免光谱串扰

Cycle Green Reagent 1000×浓缩液，单次用量少，支持高通量实验

附带RNase A (100×)，可快速去除RNA干扰，提升DNA定量准确性

无需固定破膜，活细胞或固定细胞均可直接染色，简化操作流程

适用于流式细胞仪、荧光显微镜、微孔板读板机等多平台检测

选择规格

50T

¥416

现货（次日发货）

100T

¥706

现货（次日发货）

🎉 限时优惠

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活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

亚科因生物研发的细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒（绿色荧光） (Cell Cycle and Apoptosis Detection Kit, Green Fluorescence) 是一种基于 Cycle Green Reagent 核酸嵌入染料的荧光检测体系，可通过流式细胞术或荧光显微镜对培养细胞进行DNA含量定量，从而同步分析细胞周期分布与细胞凋亡状态的试剂盒。

背景与原理

细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒（绿色荧光）通过Cycle Green Reagent与细胞内核酸结合后产生500倍荧光增强（Ex/Em：502/525 nm），实现高灵敏度的DNA含量测定。当细胞被Cycle Green Reagent染色后：

G0/G1期细胞含单倍DNA，荧光强度设为基准值1；
G2/M期细胞已完成DNA复制，荧光强度理论值为2；
S期细胞处于DNA合成阶段，荧光强度介于1–2之间；
晚期凋亡/坏死细胞因DNA片段化及核皱缩导致基因组DNA丢失，荧光强度<1，在流式图上呈现sub-G1凋亡峰。

应用领域

该试剂盒专为细胞水平研究设计，可广泛应用于：

肿瘤细胞周期阻滞与凋亡诱导机制研究
药物、化合物或基因编辑对细胞增殖与凋亡的影响评估
干细胞分化过程中周期动态监测
免疫细胞活化、衰老及死亡分析
高通量筛选平台的细胞毒性或抗凋亡活性评价

产品参数

中文名称	细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(绿色荧光)
英文名称	Cell Cycle and Apoptosis Detection Kit (Green Fluorescence)
产品货号	KTA2021
样本类型	细胞
试剂盒组分	• Cycle Green Reagent (1000×) • RNase A (100×)
保存建议	建议收到货后避光保存于-20°C，有效期为12个月。
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

自备仪器与试剂

自备资源类型	资源名称	备注
仪器	流式细胞仪	FITC通道
耗材	流式管	/
试剂	无水乙醇，PBS	至少提前一晚预冷
其他	离心机	/

注意事项

本产品仅供科学研究使用，不适用于临床诊断。

实验流程

试剂准备

试剂名称	试剂准备	注意事项
Cycle Green Reagent (1000×)	即用型	避光保存
RNase A	即用型	根据实际用量

实验步骤

实验前准备：建议将无水乙醇提前放置-20℃至少一晚，及准备 4℃预冷的 PBS

根据实验目的处理细胞；
收集单细胞悬液（建议不低于 1×10⁶个细胞）：对于非贴壁细胞，直接收集细胞悬液进行离心；对于贴壁细胞，需使用胰蛋白酶消化成单细胞（推荐使用温和消化液），然后离心（离心速度根据细胞大小而定），弃上清；
用预冷的 PBS洗涤细胞沉淀两次；
最后一次清洗离心后，弃上清，加入合适体积的预冷 PBS（比如加入 0.3 mL PBS，后期则要加 0.7 mL无水乙醇进行固定，使得乙醇最终固定浓度为 70%）重悬细胞，然后将细胞管转移至冰上；
然后缓慢加入预冷的无水乙醇至乙醇终浓度 70%，边加边混匀（避免局部乙醇浓度过高产生多聚体），将细胞转移到-20℃保存 2 h或更长时间（建议过夜固定 12-24 h）；进行染色之前，这些细胞可以在-20℃下保存数周；

注意：在固定过程中，细胞可能会聚集。缓慢加入无水乙醇，同时轻轻涡旋有助于防止细胞聚集；

4℃，300 g离心 5 min；
除去乙醇，并将细胞重悬于 1 mL冰冷的 PBS中；
4℃，1000 g离心细胞 5 min，然后弃上清，重复清洗一次；
将细胞重悬于 0.5 mL PBS中，加入 5 µL RNase A混匀，放 37℃孵育 0.5 h；
加入 0.5 µL Cycle Green Reagent (1000×)并避光在冰上孵育 30 min到 2h；
通过流式细胞仪检测细胞（建议 24 h内上机）。

注意：

乙醇固定后加入 PBS离心清洗过程中细胞极易损失，可以用水平离心机并增加离心速度，另增加始细胞量也可减少损失。
细胞培养时不要长得太满，可以维持 70%~80%密度，使得细胞处于增长期，有一定比例的 S和 G2期。细胞上机前可以进行过滤，采集时可以用低速采集，这样可以使得收集的细胞尽可能是单个细胞，如果因样本等原因无法避免产生多聚体，可以在细胞圈门时剔除掉该部分细胞。

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