IPKine™ 蛋白A/G磁珠

Name: IPKine™ 蛋白A/G磁珠
Brand: Abbkine
SKU: BMR2080
Price: 498 CNY
Availability: InStock

IPKine™ ProteinA/G Magnetic Beads

产品货号

BMR2080

产品特点：

一步法操作：磁响应速度快，无需离心，5 min内完成抗体-抗原捕获

广谱兼容：同时结合蛋白A与蛋白G，覆盖人、小鼠、兔、山羊等多物种IgG

低背景干扰：高度交联的磁珠表面降低非特异性吸附，提升信噪比

温和洗脱：支持酸性或变性条件洗脱，保持蛋白活性与复合物完整性

可重复使用：经再生缓冲液处理后，磁珠可重复用于同批次抗体实验

选择规格

1 ml

¥498

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5 ml

¥1998

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活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

IPKine™ 蛋白A/G磁珠 (IPKine™ ProteinA/G Magnetic Beads) 是一款专为免疫沉淀（IP）与免疫共沉淀（Co-IP）设计的磁性微球，通过将重组蛋白A与蛋白G共价偶联至超顺磁微粒表面，可在磁场作用下快速、温和地捕获多种物种来源的IgG抗体-抗原复合物，实现目标蛋白的高效富集与纯化。

背景信息
蛋白A与蛋白G是天然存在于细菌细胞壁的IgG结合蛋白，因其结构稳定、结合特异性高而被广泛用于抗体捕获。蛋白A对兔、人、猪等物种的IgG亲和力较强，蛋白G则对小鼠、大鼠、山羊等物种的IgG具有更广谱的结合能力。IPKine™蛋白A/G磁珠将两种蛋白的优势整合于同一磁珠表面，可覆盖绝大多数实验动物及人源IgG亚型，减少因抗体种属差异导致的结合效率波动。磁珠在磁场中数秒内即可完全分离，避免传统琼脂糖珠离心带来的机械剪切与蛋白损失，特别适合低丰度蛋白或瞬时相互作用的富集。

应用领域
适用于蛋白互作研究（Co-IP）、翻译后修饰分析（磷酸化/泛素化IP）、信号通路验证、抗体质量控制及重组蛋白纯化等场景，兼容细胞裂解液、血清、腹水、培养上清等多种样本类型。

产品参数

中文名称	IPKine™ 蛋白A/G磁珠
英文名称	IPKine™ ProteinA/G Magnetic Beads
产品货号	BMR2080
保存建议	4°C保存24个月，避免冷冻
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

ProteinA/G Magnetic Beads：即用型；4℃保存，避免冷冻。

用于配制缓冲液的水和化学试剂需要高纯度，缓冲液使用之前使用 0.22 μm或 0.45 μm滤膜过滤。对于大多数蛋白质，可以使用以下推荐缓冲液：

Lysis Buffer：50mM Tris-HCl, 0.15 M NaCl, 1% IGEPAL-CA630, 1mM PMSF, pH7.4
Wash Buffer：0.15 M NaCl, 20 mM Na2HPO4, pH 7.0
Elution Buffer：0.1 M Glycine, pH 3.0
Neutralization Buffer：1 M Tris-HCl, pH 8.5

实验步骤

一、免疫沉淀

A. 蛋白样品的准备

1. 细胞蛋白提取

(1) 细胞收集（贴壁细胞：10 cm细胞培养皿中单层细胞长满 80%-90%，吸除细胞培养液，PBS洗涤一次；悬浮细胞：离心收集5×106个细胞，PBS洗涤一次）。

(2) 加 0.5-1 mL预冷的 Lysis Buffer到细胞中，4℃裂解细胞 5 min，期间用移液器反复吹打，然后将细胞悬浮液转移到新的离心管中。

(3) 12,000 rpm，4℃，离心 10 min，收集上清，然后采用 BCA法测定蛋白浓度（推荐使用 Abbkine货号：KTD3001蛋白质定量试剂盒（BCA法））。

2. 组织蛋白提取：

(1) 植物或动物组织样品：称取 0.1 g组织，加入 1 mL Lysis Buffer，液氮或匀浆器研磨。

(2) 将匀浆液转移至新的离心管中，4℃冰上裂解 5 min。

(3) 12,000 rpm，4℃，离心 10 min，收集上清，然后采用 BCA法测定蛋白浓度（推荐使用 Abbkine货号：KTD3001蛋白质定量试剂盒（BCA法））。

注意：总蛋白浓度选择在 0.5-1 μg/μL范围内较为合适。通常针对目标蛋白的表达量不同，需要对总蛋白浓度进行预实验调整。免疫共沉淀(Co-IP)通常必须使用未经冻存的新鲜蛋白样品。普通的免疫沉淀虽然可以使用冻存的蛋白样品，但也宜用新鲜的蛋白样品为佳。

B. 去除非特异性结合(可选做)：

1. 取 20 μL的 Protein A/G Magnetic Beads加入到 1.5 mL离心管中，离心管置于磁分离架上，静置 10 s，吸弃上清。

注意：Protein A/G Magnetic Beads使用前一定要充分重悬，即充分颠倒若干次使混合均匀。

2. 加入 1 mL Wash Buffer，重悬 Protein A/G Magnetic Beads，离心管置于磁分离架上，静置 10 s，吸弃上清，重复 3次。

3. 加入 0.2-1 mL（0.2-1 mg）蛋白样品，4℃摇转孵育 30 min。（推荐用垂直旋转混合仪，低速旋转）

4. 离心管置于磁分离架上，静置 10 s，取上清用于后续的免疫沉淀。

C. 免疫沉淀：

1. 取 20 μL的 Protein A/G Magnetic Beads加入到 1.5 mL离心管中，离心管置于磁分离架上，静置 10 s，吸弃上清。

2. 加入 1 mL Wash Buffer，重悬 Protein A/G Magnetic Beads，离心管置于磁分离架上，静置 10 s，吸弃上清，重复 3次。

3. 加入 0.2-2 μg抗体溶液，重悬 Protein A/G Magnetic Beads，体积不足 500 μL时用Wash Buffer补足，室温下置于垂直旋转混合仪孵育 30 min，离心管置于磁分离架上，静置 10 s，收集上清液，沉淀用于后续 Step 4。可选做，IgG阴性对照：加入 0.2-2 μg抗体种属相同的正常 IgG，重悬 Protein A/G Magnetic Beads，室温下置于垂直旋转混合仪孵育 30 min，离心管置于磁分离架上，静置 10 s，收集上清液，沉淀用于后续 Step 4。此步可排除 IgG本身和目的蛋白或其它特定生物分子的非特异性结合。

4. 加入 1 mL Wash Buffer，重悬 Protein A/G Magnetic Beads，离心管置于磁分离架上，静置 10 s，吸弃上清，重复 3次。

5. 加入 0.2-1 mL（0.2-1 mg）蛋白样品或上清(去除非特异性结合蛋白的上清)，在室温下置于垂直旋转混合仪孵育 1 h或 4℃过夜。

6. 离心管置于磁分离架上，静置 10 s，收集上清液，沉淀用于后续 Step 7。

7. 加入 1 mL Wash Buffer，重悬 Protein A/G Magnetic Beads，离心管置于磁分离架上，静置 10 s，吸弃上清，重复 3次。

8. 洗脱

(1) 变性洗脱法：此方法洗脱的样品适用于 SDS-PAGE 和Western Blotting检测。向离心管中加入 20-50 μL 1×SDS-PAGE Loading Buffer混合均匀，100℃加热 5 min，离心管置于磁分离架上，静置 10 s，收集上清液至新的离心管中，进行 SDS-PAGE和Western Blotting检测分析。

(2) 非变性洗脱法：此方法洗脱的样品保持原有的生物活性，可用于后期功能分析。向离心管中加入 20-50 μL Elution Buffer混匀，然后在室温下孵育 10 min，离心管置于磁分离架上，静置 10 s，收集上清液至新的离心管中，并立即加入 1/10 Elution Buffer体积的 Neutralization Buffer，将洗脱组分 pH调节至 7.0-8.0，用于后续功能分析。

二、免疫共沉淀：

参考免疫沉淀的方法进行。

附表

表 1. Protein A、 Protein G 和 Protein A/G 对不同抗体的结合能力，++++=结合能力强; ++=结合能力中等; —=结合能力弱或没有结合
种属	亚型	Protein A	Protein G	Protein A/G
Human	IgA	Varible	－	++
	IgD	－	－	－
	IgE	－	－	－
	IgG1	++++	++++	++++
	IgG2	++++	++++	++++
	IgG3	－	++++	++++
	IgG4	++++	++++	++++
	IgM	Varible	－	－
	Avian egg yolk IgY	－	－	－
Cow	Total IgG	++	++++	++++
Dog	Total IgG	++++	++	++++
Goat	Total IgG	－	++++	++++
Guinea pig	IgG1	++++	++	++++
Hamster	IgG2	++++	++	++++
Horse	Total IgG	++	++++	++++
Koala	Total IgG	－	+
Llama	Total IgG	－	+
Monkey (rhesus)	Total IgG	++++	++++	++++
Mouse	IgG1	+	++++	++
	IgG2a	++++	++++	++++
	IgG2b	+++	+++	+++
	IgG3	++	+++	+++
	IgM	Varible	－	－
Pig	Total IgG	+++	+++	++++
Rabbit	Total IgG	++++	+++	+++
Rat	IgG1	－	+	++
	IgG2a	－	++++	++++
	IgG2b	－	++	++
	IgG3	+	++	++
	Sheep	Total IgG	+/-	++	++