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细胞核蛋白与胞浆蛋白提取试剂盒-ExKine™
ExKine™ Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit
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活动截止时间:2024年1月31日
                            
                                
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ExKine™ 细胞核蛋白与胞浆蛋白提取试剂盒(ExKine™ Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit,货号 KTP3001)是一款专为哺乳动物细胞或组织设计的快速分离工具,可在非变性条件下,于2小时内同时获得高纯度、高活性的细胞核蛋白与胞浆蛋白,为下游功能研究提供可靠原料。
细胞核与胞浆是细胞功能研究的两大核心区域。细胞核蛋白不仅决定基因表达调控,还参与信号转导、染色质重塑等关键生命活动;胞浆蛋白则主导代谢、信号级联及蛋白合成。传统分步提取常伴随交叉污染或耗时冗长,而ExKine™通过优化的缓冲体系与分级裂解策略,可在低温(2-8 °C)下实现核-浆高效分离,所得蛋白可直接用于EMSA(凝胶迁移实验)、Western Blot、转录因子活性检测及酶学分析等实验。
适用于细胞生物学、转录调控研究、信号通路分析及药物靶点验证等场景,特别适合需要高纯度核蛋白或胞浆蛋白的实验平台。
                                    | 中文名称 | 细胞核蛋白与胞浆蛋白提取试剂盒-ExKine™ | 
| 英文名称 | ExKine™ Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit | 
| 产品货号 | KTP3001 | 
| 试剂盒组分 | • 细胞浆蛋白溶液A (CES A)  • 细胞浆蛋白溶液B (CES B) • 核提取溶液 (NES) • DTT (500X) • 蛋白酶抑制剂 (100X)  | 
                                        
| 注意事项 | 所有实验步骤请在2-8°C下执行。使用预冷的缓冲液和设备,并确保所有溶液都是解冻和均匀的。 | 
| 保存建议 | -20℃保存 12 个月 | 
| 运输条件 | 冰袋运输(蓝冰) | 
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。 | 
Working Cytoplasmic Solution A (Working CESA):使用前,立即加入 10 µL Protease Inhibitor (100×)和 2 µL DTT(500×)到 1 mL CESA中,置于冰上;4℃保存。
Cytoplasmic Solution B (CESB):即用型;使用前,置于冰上;4℃保存。
Working Nuclear Extraction Solution (Working NES):使用前,立即加入 10 µL Protease Inhibitor (100×)和 2 µL DTT (500×)到 1 mL NES中,置于冰上;4℃保存。
DTT (500×):即用型;使用前,置于冰上;-20℃保存。用不完的试剂-20℃分装保存,避免反复冻融。
Protease Inhibitor (100×):即用型;使用前,置于冰上;-20℃保存。用不完的试剂-20℃分装保存,避免反复冻融。
注意:所有的实验步骤需在 2-8℃进行。使用预冷的缓冲液和设备。确保所有的溶液是解冻和均匀的。
注意:使用移液器小心吸取上清,使细胞沉淀尽可能干燥。
注意:使用移液器小心吸取上清,使细胞组织尽可能干燥。
可选步骤:为了从细胞核中去除残留的胞浆蛋白,用额外的预冷Working CESA或 PBS重悬沉淀,然后重复步骤 III的 3和 4步骤 1-2遍。
注意:如果沉淀有分散不开的情况,可剪断吸头后用吸头反复吹打。
注意:根据该实验步骤提取的核蛋白中含 NES(一种高盐缓冲液)。如果在随后的应用中需要大量的核提取物或者如果下游检测出现问题,可透析核蛋白以除去高盐物质。
| 问题 | 可能的原因 | 解决办法 | 
|---|---|---|
| 胞浆蛋白浓度低 | 裂解或提取缓冲液的体积和细胞数量不匹配 | 进行细胞计数,并使用合适体积的缓冲液 | 
| 细胞沉淀未分散 | 充分涡旋 | |
| 细胞未裂解 | 增加 CESB 用量 | |
| 核蛋白浓度低 | 细胞沉淀未分散 | 充分涡旋 | 
| 细胞核分离不完全 | 加入 CESB后,增加离心时间 | |
| 使用自己配制的裂解或提取缓冲液 | 使用该试剂盒中提供的裂解或提取缓冲液 | |
| 胞浆蛋白和核蛋白未完全分离 | 细胞裂解不充分 | 增加涡旋时间,以充分分散细胞沉淀 | 
| 增加 CESB用量 | 增加 CESB用量 | |
| 胞浆蛋白未完全移除 | 在细胞核裂解之前,小心操作,移除胞浆蛋白 | 
A: 可以。
A: 1、使用新鲜样本;2、离心时选用合适的离心力;3、取出及抽吸EP管的动作应轻柔,从大规格枪头切换成小规格枪头,吸上层液体用大规格枪头,下层液体用小规格枪头。
A: 可能有以下三个方面原因:1. 细胞裂解不充分,导致细胞核未进入提取液中;2. 选用的离心机型号不匹配,未达到细胞核和细胞质分离的离心力;3. 操作人员动作不轻柔,EP管取放过程中有振荡,导致分层的组分重新混合在一起。
A: 小分子杂蛋白是在纯化过程中的靶蛋白降解产物,建议客户纯化过程低温下进行,同时样本采用新鲜样本,同时纯化过程尽量在4度进行,去除保护液和洗杂的流速可适当加快。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 本公司的纯化填料中含有微量内毒素,如果客户样品对内毒素有要求,建议用曲拉通将内毒素萃取出来,。
A: 如果低分子量条带在原液中不存在,说明是在纯化过程中,靶蛋白出现降解,建议在低温下进行。去除保护液和洗杂的流速可以快一些,但是上样和洗脱的速度尽量不加快。
杂志名称: Redox Biology | 作者: Lu, Chenqi, et al.
IF: 11.900 | 发表时间: 2025
杂志名称: Journal of Neuroinflammation | 作者: Jia, Huafang, et al.
IF: 10.100 | 发表时间: 2025
杂志名称: International Journal of Biological Sciences | 作者: Zhao, Xupeng, et al.
IF: 10.000 | 发表时间: 2025
杂志名称: Free Radical Biology and Medicine | 作者: Yao, Zhengyang, et al.
IF: 7 | 发表时间: 2024
杂志名称: Inflammopharmacology | 作者: Chen, Zhaoyan, et al.
IF: 5.300 | 发表时间: 2025
杂志名称: Iscience | 作者: Ma, Yiyang, et al.
IF: 5 | 发表时间: 2024
杂志名称: Pigment Cell & Melanoma Research | 作者: Dan, Yanjun, et al.
IF: 4 | 发表时间: 2024
杂志名称: Frontiers in Pharmacology | 作者: Li, Yue, et al.
IF: 4 | 发表时间: 2024
杂志名称: Endocrinology | 作者: Jie, Hui-Ying, et al.
IF: 3.300 | 发表时间: 2025
杂志名称: Brain Research | 作者: Xu, Yajie, et al.
IF: 3 | 发表时间: 2024
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