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人催乳素 ELISA定量试剂盒-EliKine™

EliKine™ Human Prolactin ELISA Kit

产品货号
KTE6904

产品特点:

  • 检测范围宽:40 μIU/ml–2000 μIU/ml,覆盖生理及病理浓度区间
  • 灵敏度高:最低检测限可达 50 μIU/ml,可识别低丰度样本
  • 特异性强:对 PRL 类似物无明显交叉反应,背景干扰低
  • 即用型组分:预包被微孔板、梯度标准品、检测抗体、HRP 底物及终止液等一应俱全,实验流程标准化
  • 兼容多种样本:血清、血浆及其他生物液体均可直接检测
  • 选择规格

    48 T
    ¥1598
    期货(4天内发货)
    96 T
    ¥2558
    期货(4天内发货)
    🎉 限时优惠

    买2送1活动进行中!购买任意2个规格产品,免费赠送100μL装一支。

    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    EliKine™ 人催乳素 ELISA定量试剂盒(EliKine™ Human Prolactin ELISA Kit,货号 KTE6904)是一款基于双抗体夹心法的酶联免疫检测工具,可在 40 μIU/ml–2000 μIU/ml 线性范围内对人血清、血浆及其他生物液体中的催乳素(Prolactin,PRL)进行精确定量。

    催乳素(Prolactin,PRL)是由垂体前叶嗜酸细胞分泌的 199 个氨基酸多肽,分子量约 22 kDa,主要生理功能为促进乳腺发育并维持泌乳,同时参与卵泡 LH 受体生成等内分泌调控。血液中 PRL 水平异常升高与泌乳紊乱、垂体腺瘤及多种内分泌疾病密切相关。EliKine™ 人催乳素 ELISA定量试剂盒采用经典夹心法:预包被在微孔板上的抗人 PRL 捕获抗体首先结合样本中的 PRL;随后加入生物素化检测抗体,形成“捕获抗体–PRL–检测抗体”复合物;最后通过 HRP-链霉亲和素及 TMB 底物显色,450 nm 处读取吸光值,吸光值与样本中 PRL 浓度成正比,实现高灵敏度、高特异性的定量检测。

    应用领域

    本试剂盒适用于内分泌研究生殖医学垂体疾病机制探索药物干预评价等方向,可广泛用于临床检验、科研实验室及制药企业对人催乳素水平的定量分析。

    人催乳素 ELISA定量试剂盒-EliKine™

    产品参数

    中文名称 人催乳素 ELISA定量试剂盒-EliKine™
    英文名称 EliKine™ Human Prolactin ELISA Kit
    产品货号 KTE6904
    反应性
    检测类型 ELISA
    检测方法 夹心法
    样本类型 血清#血浆#其它生物液体
    试剂盒组分 • 人Prolactin 抗体预包被微孔板
    • 人Prolactin 标准品
    • 人Prolactin检测抗体
    • HRP底物A
    • HRP底物B
    • 反应终止液
    • 洗涤缓冲液
    • 封板膜.
    检测范围 40 μIU/ml-2000 μIU/ml
    灵敏度 40 μIU/ml
    基因ID 5617
    蛋白质ID P01236
    蛋白序列链接 http://www.uniprot.org/uniprot/P01236
    检测指标 Prolactin
    注意事项 • 试剂盒的试剂不能与其它批号的试剂或超出有效期的试剂混合使用。
    • 试剂应按瓶上标签说明储存,使用前室温平衡30 分钟。
    • 实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。
    • 实验中未用的板条立即放回包装中,密闭封口,4℃保存。
    • 充分混匀对反应结果尤为重要,推荐使用低速频率振荡器或者每10分钟手动摇匀。
    • 对于样品和标准品,建议做双孔或者三孔检测(复孔)。.
    保存建议 请将未开封使用的试剂盒保存于2-8℃;启用后的试剂盒,请参考说明书保存各个组分。
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    自备耗材

    • 酶标仪(能测450 nm处的吸光度)
    • 多通道移液器或自动洗板机
    • 恒温箱、低温离心机
    • 可调节式移液枪及枪头
    • 去离子水
  • 酶标仪(能测450 nm处的吸光度)
  • 多通道移液器或自动洗板机
  • 恒温箱、低温离心机
  • 可调节式移液枪及枪头
  • 去离子水
  • 试剂准备

    注意:提前20 min从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。如果浓缩试剂有结晶析出,轻轻加热直至完全溶解。

    注意:提前20 min从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。如果浓缩试剂有结晶析出,轻轻加热直至完全溶解。

    注意:
    1. 1× Wash Buffer:用去离子水1:20稀释20×Wash Buffer得到1×Wash Buffer,4℃保存。
    2. Human Prolactin Standard:在冻干标准样品瓶中加入500 µL去离子水。轻轻摇晃使粉末彻底溶解。
  • 1× Wash Buffer:用去离子水1:20稀释20×Wash Buffer得到1×Wash Buffer,4℃保存。
  • 1× Wash Buffer:
  • Human Prolactin Standard:在冻干标准样品瓶中加入500 µL去离子水。轻轻摇晃使粉末彻底溶解。
  • Human Prolactin Standard:

    样本制备

    1. 血清:使用血清分离管,让样品在室温下凝结30 min,然后1,000 g离心15 min。取上层血清立即测定或分装-20℃保存,避免反复冻融。
    2. 血浆:使用EDTA、肝素或柠檬酸盐作为抗凝剂收集血浆。在收集后30 min内1,000 g离心15 min。立即测定或分装-20℃保存,避免反复冻融。
  • 血清:使用血清分离管,让样品在室温下凝结30 min,然后1,000 g离心15 min。取上层血清立即测定或分装-20℃保存,避免反复冻融。
  • 血清:
  • 血浆:使用EDTA、肝素或柠檬酸盐作为抗凝剂收集血浆。在收集后30 min内1,000 g离心15 min。立即测定或分装-20℃保存,避免反复冻融。
  • 血浆:

    注意:不要使用严重溶血或脂血的标本。样品应分装保存,避免PRL失活。如果样品要在24 h内使用,则可以将其储存在2-8℃至℃。避免反复冻融。测定前,应将冷冻样品缓慢升至室温并轻轻混合。

    注意:不要使用严重溶血或脂血的标本。样品应分装保存,避免PRL失活。如果样品要在24 h内使用,则可以将其储存在2-8℃至℃。避免反复冻融。测定前,应将冷冻样品缓慢升至室温并轻轻混合。

    注意:

    实验步骤

    1. 1. 从板框上取下多余的板条,将它们放回装有干燥剂包的铝箔袋中,然后重新密封。
    2. 2. 每孔加入50 μL Human Prolactin Standard或样品。建议所有标准品和样品做复孔。设置一个不加任何溶液空白孔。
    3. 3. 每孔加入50 μLRP Conjugated Human Prolactin Detect Antibody(空白孔不加)。混匀,给酶标板覆膜,37℃孵育1 h。
    4. 4. 除去每孔中的液体并洗涤,重复该过程总共洗涤三次。使用多通道移液器或自动清洗机每孔加入250 μL 1×Wash buffer进行洗涤,然后静置10 s。完全去除液体对于获得良好性能至关重要。最后一次洗涤后,倒置酶标板并用干净的纸巾吸干以除去任何剩余的1×Wash buffer。
    5. 5. 每孔加入50 μLRP Substrate A和50 μLRP Substrate B,混匀,给酶标板覆膜,37℃避光孵育15 min,远离气流和其他温度波动。
    6. 6. 每孔加入50 μL Stop Solution,Stop Solution应按照与HRP Substrate相同的顺序加到板中。孔中的颜色应从蓝色变为黄色。如果孔中的颜色为绿色或颜色变化不均匀,请轻轻敲击板以确保彻底混合。
    7. 7. 30 min内测定每孔450 nm处的吸光值(OD)。
  • 1. 从板框上取下多余的板条,将它们放回装有干燥剂包的铝箔袋中,然后重新密封。
  • 1.
  • 2. 每孔加入50 μL Human Prolactin Standard或样品。建议所有标准品和样品做复孔。设置一个不加任何溶液空白孔。
  • 2.
  • 3. 每孔加入50 μLRP Conjugated Human Prolactin Detect Antibody(空白孔不加)。混匀,给酶标板覆膜,37℃孵育1 h。
  • 3.
  • 4. 除去每孔中的液体并洗涤,重复该过程总共洗涤三次。使用多通道移液器或自动清洗机每孔加入250 μL 1×Wash buffer进行洗涤,然后静置10 s。完全去除液体对于获得良好性能至关重要。最后一次洗涤后,倒置酶标板并用干净的纸巾吸干以除去任何剩余的1×Wash buffer。
  • 4.
  • 5. 每孔加入50 μLRP Substrate A和50 μLRP Substrate B,混匀,给酶标板覆膜,37℃避光孵育15 min,远离气流和其他温度波动。
  • 5.
  • 6. 每孔加入50 μL Stop Solution,Stop Solution应按照与HRP Substrate相同的顺序加到板中。孔中的颜色应从蓝色变为黄色。如果孔中的颜色为绿色或颜色变化不均匀,请轻轻敲击板以确保彻底混合。
  • 6.
  • 7. 30 min内测定每孔450 nm处的吸光值(OD)。
  • 7.

    结果计算

    1. 1. 计算每个标准品和样品的复孔平均OD值并减去0浓度标准品(Std1)平均OD值。
    2. 2. 标准曲线的绘制:以标准溶液浓度为x轴,各标准品的平均OD值为y轴,绘制标准曲线。可以使用计算机软件来创建标准曲线。
  • 1. 计算每个标准品和样品的复孔平均OD值并减去0浓度标准品(Std1)平均OD值。
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  • 2. 标准曲线的绘制:以标准溶液浓度为x轴,各标准品的平均OD值为y轴,绘制标准曲线。可以使用计算机软件来创建标准曲线。
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    常见问题

    Q: 普通大分子蛋白ELISA检测的原理是什么?

    A: 双抗体夹心法是检测大分子抗原最常用的方法。双抗夹心法ELISA是将特异性抗体结合到固相载体上形成固相抗体,然后和待检样本中的相应抗原结合形成免疫复合物,洗涤后再加酶标记抗体,与免疫复合物中抗原结合形成酶标抗体— 抗原—固相抗体复合物,加底物显色,判断抗原含量;

    Q: 试剂盒检测一个样品孔,一般用多少样本量?

    A: 稀释好的液体样本100 μL,细胞样本1-2×106个cells,组织样本1 g左右。

    Q: 为什么我们的ELISA试剂盒的最大吸收波长是450nm?

    A: 因为TMB显色染料经过硫酸终止之后在450nm处有最大吸收峰,所以用酶标仪检测450nm处的OD值。

    Q: 开封之后,未用完的ELISA酶标板的保存方法和保存时间?

    A: 开封的酶标板应密封后在-20度保存,能保存一个月。

    Q: ELISA实验制作标曲,X轴和Y轴弄反了,是否对结果有影响?

    A: 无影响,只是计算的时候需注意,样本的OD值应代入计算式的X值中。

    Q: 样本前处理:血加在抗凝管里后,离心出来的是血清还是血浆?

    A: 血浆。

    Q: 该系列试剂盒能否满足客户间断性采样的要求?

    A: 可以满足,连续取的样本如果1周内检测,需保存于4℃;如1个月内检测,按一次使用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融;如6个月内检测,分装保存于-80℃,避免反复冻融。

    Q: ELISA试验的标准曲线和测定的重复性差,这是由什么原因造成的?

    A: 1. 加样本及试剂量不准,孔间不一致----重复测定时保持与上次操作条件一致; 2. 加样过快,孔间发生污染----加样不能过快; 3. 加样本及试剂时,加在孔壁上部非包被区----加样时枪头不要贴壁; 4. 不同批号试剂盒中组分混用----不同批号试剂盒中组分不可混用; 5. 温育时间、洗板、显色时间不一致----操作时间保持一致; 6. 试剂/样品没有混匀----充分混匀样品和试剂。

    Q: 该类试剂盒的指标如何查找?

    A: 建议在Abbkine官网搜索“KET”,客户可以了解到相关指标。如有疑问,请联系support@abbkine.com进行详细咨询。

    Q: 该类试剂盒的标准品稀释液中偶见沉淀,应如何处理?

    A: 为了避免基质效应,ELISA 试剂盒针对不同的样本都会配备不同的稀释液。一些稀释液,特别是血清稀释液的配方中,会含有一些动物蛋白成分(比如 BSA)和溶解度较低的盐。这些成分在低温或是稀释液微量蒸发的情况下,会出现结晶或浑浊的现象。在试剂盒开发的过程中,我们研发人员开展的大量验证实验表明,稀释液的沉淀不会影响试剂的使用性能。

    文献引用

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