土壤中性转化酶(S-NI)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™

Name: 土壤中性转化酶(S-NI)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
Brand: Abbkine
SKU: KTB4062
Price: 578 CNY
Availability: InStock

CheKine™ Micro Soil Neutral Invertase (S-NI) Activity Assay Kit

产品货号

KTB4062

产品特点：

验证样本类型齐全，适配多种土壤基质，操作步骤精简，实验流程≤60 min

微量体系设计，最低仅需 0.03215 mg/mL 即可检出，节省珍贵样本

线性检测范围 0.03215–1 mg/mL，覆盖常见土壤酶活水平，结果可重复性强

4 ℃避光保存 6 个月，冰袋运输，常温实验室即可开展检测

选择规格

48 T/24 S

¥578

现货（次日发货）

96 T/48 S

¥969

现货（次日发货）

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活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

CheKine™ 土壤中性转化酶（S-NI）活性检测试剂盒（微量法）是一款专为土壤样本设计的微量酶活检测工具，通过经典3,5-二硝基水杨酸显色体系，可在 540 nm 处快速、定量地测定土壤中性转化酶（S-NI）活性，为研究土壤碳循环与微生物代谢提供可靠数据。

背景与原理

蔗糖转化酶（Invertase，Ivr）是高等植物及土壤微生物蔗糖代谢的关键限速酶，负责将蔗糖水解为果糖与葡萄糖。根据最适 pH，Ivr 被划分为酸性转化酶（AI）与中性转化酶（NI）。CheKine™ 土壤中性转化酶（S-NI）活性检测试剂盒利用 S-NI 催化蔗糖裂解生成还原糖，还原糖再与 3,5-二硝基水杨酸反应生成棕红色氨基化合物，在 540 nm 处产生特征吸收峰。在一定范围内，540 nm 吸光度的增加速率与还原糖生成量成正比，从而可准确计算土壤样本中的 S-NI 活性。

应用领域

广泛应用于土壤碳循环研究、微生物生态学、农业地力评价及环境修复监测等方向，为评估土壤蔗糖代谢强度、微生物活性及有机质周转速率提供核心数据支持。

产品参数

中文名称	土壤中性转化酶(S-NI)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
英文名称	CheKine™ Micro Soil Neutral Invertase (S-NI) Activity Assay Kit
产品货号	KTB4062
样本类型	土壤
试剂盒组分	• ReagentⅠ • ReagentⅡ • ReagentⅢ • Standard
检测范围	0.03215-1 mg/mL
灵敏度	0.03215 mg/mL
检测指标	土壤蔗糖中性转化酶
注意事项	•建议使用新鲜样本。如果不立即使用，可将样品在-80℃下保存一个月。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在 4 h 内完成样品解冻。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。
保存建议	4℃，避光保存 6 个月
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

注意：正式检测前，建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

自备耗材

酶标仪或可见光分光光度计（能测 540 nm处的吸光度）
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头、1.5 mL离心管
水浴锅、低温离心机、制冰机
去离子水、甲苯

试剂准备

ReagentⅠ：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。

Working Reagent II：临用前配制；48 T加入 14 mL ReagentⅠ，96 T加入 28 mL ReagentⅠ，充分溶解。用不完的试剂 4℃保存 2周。

Reagent III：即用型；使用前，平衡到室温；4℃避光保存。

注意：Reagent III 有刺激性气味，建议在通风橱进行实验。

Standard：临用前配制；加入 1 mL去离子水，充分溶解得 10 mg/mL，用不完的试剂 4℃保存 1个月。使用 10 mg/mL Standard，按照下表所示，进一步稀释标准品：

序号	Standard体积（μL）	去离子水体积（μL）	浓度（mg/mL）
Std.1	100 μL 10 mg/mL Standard	900	1
Std.2	500 μL of Std.1 (1 mg/mL Standard)	500	0.5
Std.3	500 μL of Std.2 (0.5 mg/mL Standard)	500	0.25
Std.4	500 μL of Std.3 (0.25 mg/mL Standard)	500	0.125
Std.5	500 μL of Std.4 (0.125 mg/mL Standard)	500	0.0625
Std.6	500 μL of Std.5 (0.0625 mg/mL Standard)	500	0.03125

注意：每次实验，请使用新配制的标准品；配制好的标准品需要在 4 h之内使用。

样本制备

注意：建议使用新鲜样本。如果不立即使用，可将样品在-80℃下保存一个月。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在 4 h内完成样品解冻。

新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干，过 30~50目筛。

实验步骤

1. 酶标仪或可见光分光光度计预热 30 min以上，调节波长到 540 nm，可见光分光光度计用去离子水调零。

2. 操作表（下述操作在 1.5 mL离心管中操作）：

试剂	空白管	标准管	对照管	测定管
风干土样（g）	0	0	0.05	0.05
Standard（μL）	0	400	0	0
去离子水（μL）	400	0	0	0
ReagentⅠ（μL）	0	0	400	0
Working Reagent II（μL）	0	0	0	400
甲苯（μL）	10	10	10	10

混匀，37℃水浴 1 h，置 95℃水浴中 10 min（盖紧，防止水分散失），流水冷却后充分混匀（以保证浓度不变），10,000 g, 25℃离心 10 min，取上清液

试剂	空白管	标准管	对照管	测定管
上清液（μL）	200	200	200	200
Reagent III（μL）	125	125	125	125

3. 混匀，95℃水浴 10 min（盖紧，以防止水分散失），流水冷却后充分混匀，取 200 μL至 96孔板或微量石英比色皿中，记录 540 nm处吸光值 A。空白管记为 A 空白，标准管记为 A 标准，对照管记为 A 对照，测定管记为 A 测定。计算ΔA 测定=A 测定-A 对照，ΔA 标准=A 标准-A 空白。

注意：空白管和标准管只需做 1-2次，每个测定管均需设置一个对照管。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本的ΔA 测定小于 0.004，可适当增大样本量，如果ΔA 测定大于 3.4，样本可用去离子水进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数，或减少提取用样本量。

结果计算

注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

1. 标准曲线的绘制

以标准溶液浓度为 x轴，ΔA 标准为 y轴，绘制标准曲线，得到标准方程，将ΔA 测定代入方程得到 x (mg/mL)。

2. S-NI含量的计算：

酶活单位定义：37℃每克土壤每天产生 1 mg还原糖定义为一个酶活力单位。

S-NI (U/g 土样)=x×V÷W÷T=9.6×x÷W

V：加入标准品体积，0.4 mL；W：土壤质量，g；T：反应时间，1/24 d。

注意事项

如果加入 Reagent III，95℃水浴 10 min后有混浊物出现，建议 12,000 g，4℃离心 5 min后，取上清测定吸光度。

常见问题

Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多？

A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。

Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证？

A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。