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活动截止时间：2024年1月31日
CheKine™ 土壤有效硼含量检测试剂盒（微量法）是一种基于甲亚胺显色反应的微量比色法试剂盒，专为快速、准确地测定土壤样本中可被植物直接吸收利用的有效硼含量而设计。
土壤中有效硼（soluble boron）是植物根系可直接吸收利用的硼形态，其丰缺直接影响作物生长、花粉萌发及细胞壁形成。CheKine™ 土壤有效硼含量检测试剂盒（微量法）利用硼在弱酸条件下与甲亚胺（Azomethine-H）形成稳定的棕黄色配合物，该配合物在 420 nm 处具有特征吸收峰。通过测定 420 nm 吸光度的变化，即可在微量体系内快速推算出土壤样本中有效硼的浓度，适用于不同质地土壤的批量检测。
本试剂盒主要应用于土壤农化研究、植物营养诊断、耕地质量监测及肥料配方优化等场景，可为精准农业、作物栽培及环境科学提供可靠的数据支持。
| 中文名称 | 土壤有效硼含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Soil Available Boron Content Assay Kit |
| 产品货号 | KTB4051 |
| 检测类型 | 水土检测 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 样本类型 | 土壤样本 |
| 试剂盒组分 | • Reagent I •Reagent Ⅱ •Reagent Ⅲ •Standard |
| 分子 | 土壤有效硼 |
| 检测指标 | 土壤有效硼 |
| 注意事项 | •推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存数周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 4℃，避光保存 6 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
注意：正式检测前，建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。
Reagent I：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
Working Reagent II：临用前配制；取一瓶加入 10 mL去离子水溶解，加 156.25 μL乙酸；充分混匀备用；用不完的试剂 4℃可保存一周。
Working Reagent III：临用前配制；取一瓶加入 5 mL去离子水溶解；用不完的试剂 4℃避光可保存一周。
Standard：临用前配制；加入 0.81 mL去离子水溶解，配制成 200 μmol/mL标准溶液待用；用不完的试剂 4℃避光可保存两周。
注意：Reagent III 有毒，建议在通风橱进行实验。
使用 200 μmol/mL标准溶液，用去离子水稀释 10倍，配制成 20 μmol/mL标准溶液，然后按照下表所示，进一步稀释成标准品：
| 序号 | Standard体积 | 去离子水体积（µL） | 浓度（μmol/mL） |
|---|---|---|---|
| Std.1 | 75 µL 20 μmol/mL Standard | 925 | 1.5 |
| Std.2 | 400 µL of Std.1 (1.5 μmol/mL) | 200 | 1 |
| Std.3 | 200 µL of Std.2 (1 μmol/mL) | 200 | 0.5 |
| Std.4 | 200 µL of Std.3 (0.5 μmol/mL) | 200 | 0.25 |
| Std.5 | 200 µL of Std.4 (0.25 μmol/mL) | 200 | 0.125 |
| Std.6 | 200 µL of Std.5 (0.125 μmol/mL) | 200 | 0.0625 |
| Blank | 0 | 200 | 0（空白孔） |
注意：每次实验都要做一次标准品检测，制作标曲；稀释后的标准品溶液不稳定，必须在 4小时内使用。
注意：推荐使用新鲜样本
新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干，过 100目筛，称取约 0.5 g土样于 2 mL带盖螺帽管中，加入 1 mL去离子水，沸水中浸提 10 min，待自然冷却，加入 50 μL Reagent I，震荡 5 min，8,000 g，25℃离心 10 min，取上清液待测。
1. 酶标仪或可见分光光度计预热 30 min，调节波长到 420 nm。可见分光光度计用去离子水调零。
2. 样本检测（下述操作在 96孔板或 1.5 mL EP管中进行）：
| 试剂 | 测定孔（μL） | 对照孔（μL） | 标准孔（μL） |
|---|---|---|---|
| 样本上清 | 40 | 40 | 0 |
| Standard | 0 | 0 | 40 |
| ReagentⅡ | 80 | 80 | 80 |
| Reagent III | 40 | 0 | 40 |
| 去离子水 | 40 | 80 | 40 |
充分混匀，25℃黑暗中静置 1 h，于 96孔板或微量玻璃比色皿中测定 420 nm处吸光值，分别记为 A 测定、A 对照、A 标准和 A 空白，计算ΔA 测定=A 测定-A 对照、ΔA 标准=A 标准-A 空白。
| 试剂 | 测定孔（μL） | 标准孔（μL） |
|---|---|---|
| 样本上清 | 40 | 0 |
| Standard | 0 | 40 |
| ReagentⅡ | 80 | 80 |
| Reagent III | 40 | 40 |
| 去离子水 | 40 | 40 |
充分混匀，25℃黑暗中静置 1 h于 96孔板或微量玻璃比色皿中，于 96孔板或微量玻璃比色皿中测定 420 nm处吸光值，分别记为 A 测定、A 标准和 A 空白，计算ΔA 测定=A 测定-A 空白、ΔA 标准=A 标准-A 空白。
注意：标准曲线只需测定 1次。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验，如果ΔA 测定小于 0.03，可适当增大样本量，同步修改计算公式；如果ΔA 测定大于 1.2，样本上清液可用去离子水进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数。
注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
1. 标准曲线的绘制
以标准溶液浓度为 x轴，ΔA 标准为 y轴，绘制标准曲线，得到标准方程，将ΔA 测定带入方程得到 x (μmol/mL)。
2. 有效硼的计算：
有效硼含量（mg/kg土样）=10.81×x×V 样总÷1,000÷（W÷1,000）=11.35×x÷W
V 样总：样本总体积，1.05 mL；10.81：硼分子量，10.81 μg/μmol；1,000：单位换算系数，1 mmol=1,000 μmol，1 kg=1,000 g；
W：样本质量，g
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
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