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活动截止时间：2024年1月31日
CheKine™ 脲酶（UE）活性检测试剂盒（微量法）是一种基于比色法的微量检测工具，用于定量测定细胞、组织、细菌、血清/血浆及其他生物体液中脲酶（Urease, UE）的活性。该试剂盒通过监测脲酶催化尿素水解生成氨和碳酸的反应，间接反映样本中氮素代谢状态。
背景原理：脲酶（UE）可特异性水解尿素，释放氨和碳酸。反应体系中生成的氨与显色试剂发生显色反应，产物在特定波长下的吸光度与脲酶活性成正比。UE活性与样本中有机物质、全氮及速效氮含量呈正相关，因此可作为氮素代谢水平的指标。本试剂盒通过标准品构建标准曲线，实现样本脲酶活性的准确定量。
应用领域：细胞代谢研究、微生物氮代谢分析、土壤/水体氮循环评估、农业科学及环境科学中的氮素监测。
| 中文名称 | 脲酶(UE)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Urease Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB3070 |
| 检测类型 | 氨基酸代谢 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | • Extraction Solution •ReagentⅠ •ReagentⅡ •ReagentⅢA •ReagentⅢB •ReagentⅣ •NH4Cl Standard（1 M） |
| 分子 | Urease Activity |
| 检测指标 | Urease Activity |
| 注意事项 | • 需用96 孔板或微量玻璃比色皿。 • 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用。 • 样品处理等过程均需要在冰上进行，且须在当日测定酶活力，匀浆液避免反复冻融。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 收到货后，请避光保存于4℃。请参阅说明书中各个组件的存储条件，自发货之日起，按照推荐的保存条件，有效期为12个月。 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
| 试剂盒组分 | 规格 | 储存条件 |
|---|---|---|
| Extraction Solution | 70 mL (48T) 70×2 mL (96T) | 4℃ |
| ReagentⅠ | Powder×1 vial | 4℃ |
| ReagentⅡ | 25 mL (48T) 50 mL (96T) | 4℃ |
| ReagentⅢA | 0.4 mL (48T) 0.8 mL (96T) | 4℃ |
| ReagentⅢB | 1.6 mL (48T) 3.2 mL (96T) | 4℃ |
| ReagentⅣ | 2 mL (48T) 4 mL (96T) | 4℃，避光保存 |
| NH4Cl Standard（1 M） | 0.2 mL (48T) 0.4 mL (96T) | 4℃ |
用 Extraction Solution将 1 M NH4Cl Standard 稀释成 1 mM。按下表所示，用 Extraction Solution将 1 mM NH4Cl Standard稀释至 500、250、125、62.5、31.25、15.625 µM。
| 序号 | 不同浓度的标准品的体积（µL） | Extraction Solution的体积（µL） | 标准品浓度（μM） |
|---|---|---|---|
| Std.1 | 200 µL of Standard | 0 | 1,000 |
| Std.2 | 100 µL of Std.1 (1,000 μM) | 100 | 500 |
| Std.3 | 100 µL of Std.2 (500 μM) | 100 | 250 |
| Std.4 | 100 µL of Std.3 (250 μM) | 100 | 125 |
| Std.5 | 100 µL of Std.4 (125 μM) | 100 | 62.5 |
| Std.6 | 100 µL of Std.5 (62.5 μM) | 100 | 31.25 |
| Std.7 | 100 µL of Std.6 (31.25 μM) | 100 | 15.625 |
| 试剂 | 测定管（μL） | 对照管（μL） |
|---|---|---|
| 样本 | 20 | 20 |
| ReagentⅠ | 90 | 0 |
| 去离子水 | 0 | 90 |
| ReagentⅡ | 190 | 190 |
混匀，放入 37℃水浴 1 h后，10,000g，25℃离心 10 min，取上清液。
| 试剂 | 测定孔（μL） | 对照孔（μL） | 标准孔（μL） | 空白孔（μL） |
|---|---|---|---|---|
| 稀释后的上清液 | 80 | 80 | 0 | 0 |
| Standard | 0 | 0 | 80 | 0 |
| 去离子水 | 0 | 0 | 0 | 80 |
| ReagentⅢ | 15 | 15 | 15 | 15 |
| ReagentⅣ | 15 | 15 | 15 | 15 |
充分混匀，室温放置 20 min。
| 试剂 | 测定孔（μL） | 对照孔（μL） | 标准孔（μL） | 空白孔（μL） |
|---|---|---|---|---|
| 去离子水 | 90 | 90 | 90 | 90 |
迅速混匀后，于 630 nm测定吸光值，记为 A 测定、A 对照、A 标准、A 空白，计算ΔA 测=A 测定-A 对照、ΔA 标=A 标准-A 空白。
V 反总：反应体系总体积，0.3 mL；V 样：加入样本体积，0.02 mL；T：反应时间，60 min；1,000：单位换算系数，1 L=1,000 mL；Cpr：蛋白浓度，mg/mL；V 样总：Extraction Solution体积，1 mL；W：样本质量，g；n：细胞（菌）总数，以百万计。
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
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