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活动截止时间：2024年1月31日
CheKine™ 食品中亚硝酸盐含量检测试剂盒（微量法）是一款基于经典重氮-偶合比色法的微量级检测工具，可在 96 孔板或微量玻璃比色皿中快速、定量地测定食品样品中的亚硝酸盐（NO₂⁻）含量，为细胞代谢与氧化应激研究提供可靠数据支持。
亚硝酸盐在食品加工过程中常被用作保色剂，通过与肌红素结合形成稳定的亚硝基肌红蛋白，使肉制品呈现诱人红色，同时抑制肉毒梭状芽孢杆菌的生长。然而，过量摄入亚硝酸盐可在胃酸环境中与胺类物质反应生成致癌性亚硝胺，长期暴露会显著增加消化道癌变风险。本试剂盒利用亚硝酸盐在酸性条件下与对氨基苯磺酰胺发生重氮化反应，再与 N-(1-萘基)乙二胺盐酸盐偶合生成紫红色偶氮化合物，在 540 nm 处具有特征吸收峰，其吸光度与亚硝酸盐浓度成正比，从而实现高灵敏定量。
本试剂盒适用于细胞代谢研究中食品来源亚硝酸盐的定量分析，可广泛应用于：
| 中文名称 | 食品中亚硝酸盐含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Food Nitrite Assay Kit |
| 产品货号 | KTB3051 |
| 检测类型 | 氧化应激 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | • Extraction SolutionⅠ •Extraction SolutionⅡ •Extraction SolutionⅢ • Activated Carbon •ReagentⅠ •ReagentⅡ •NaNO2 Standard (1 M) |
| 分子 | Food Nitrite Assay Kit |
| 检测指标 | Food Nitrite Assay Kit |
| 注意事项 | • 需用96 孔板或微量玻璃比色皿。 • 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用。 • 样品处理等过程均需要在冰上进行，且须在当日测定酶活力，匀浆液避免反复冻融。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 收到货后，请避光保存于4℃。请参阅说明书中各个组件的存储条件，自发货之日起，按照推荐的保存条件，有效期为12个月。 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
| 组分 | 规格（96 T） | 储存条件 |
|---|---|---|
| Extraction SolutionⅠ | 70 mL | RT |
| Extraction SolutionⅡ | 70 mL | RT |
| Extraction SolutionⅢ | 70 mL | RT |
| Activated Carbon Powder | ×1 vial (120 mg) | RT |
| ReagentⅠ | 10 mL | 4℃，避光保存 |
| ReagentⅡ | 10 mL | 4℃，避光保存 |
| NaNO2 Standard (1 M) | 500 μL | 4℃ |
Extraction SolutionⅠ：即用型；常温保存。Extraction SolutionⅠ为饱和溶液，有少量析出为正常现象，使用前充分摇匀。
Extraction SolutionⅡ：即用型；常温保存。
Extraction SolutionⅢ：即用型；常温保存。
Activated Carbon：即用型；常温保存。
ReagentⅠ：即用型；使用前，平衡到室温；4℃避光保存。
ReagentⅡ：即用型；使用前，平衡到室温；4℃避光保存。
用去离子水将 1 M NaNO2 Standard稀释成 100 μM。按下表所示，用去离子水将 100 μM NaNO2 Standard稀释至 50、25、12.5、6.25、3.125、1.563 µM。
| 序号 | 标准品体积 | 去离子水体积（µL） | 标准品浓度（μM） |
|---|---|---|---|
| Std.1 | 200 µL of 100 μM NaNO2Standard | 0 | 100 |
| Std.2 | 100 µL of Std.1 (100 μM) | 100 | 50 |
| Std.3 | 100 µL of Std.2 (50 μM) | 100 | 25 |
| Std.4 | 100 µL of Std.3 (25 μM) | 100 | 12.5 |
| Std.5 | 100 µL of Std.4 (12.5 μM) | 100 | 6.25 |
| Std.6 | 100 µL of Std.5 (6.25 μM) | 100 | 3.125 |
| Std.7 | 100 µL of Std.6 (3.123 μM) | 100 | 1.563 |
称取样品约 0.2 g鲜重或 0.05 g干重，破碎，加入 0.5 mL Extraction SolutionⅠ，沸水浴 15 min，冷却至室温，加入 0.5 mL Extraction SolutionⅡ，震荡摇匀，加 0.5 mL Extraction SolutionⅢ，用镊子加少量 Activated Carbon（约 1 mg），混匀，静置 30 min，8,000 g，25℃离心 15 min，取上清液待测。
1. 酶标仪或可见分光光度计预热 30 min，调节波长到 540 nm。可见分光光度计用去离子水调零。
2. 操作表（下述操作在 96孔板或微量玻璃比色皿中操作）：
| 试剂 | 测定孔（μL） | 标准孔（μL） | 空白孔（μL） |
|---|---|---|---|
| 样本 | 70 | 0 | 0 |
| Standard | 0 | 70 | 0 |
| 去离子水 | 0 | 0 | 70 |
| ReagentⅠ | 65 | 65 | 65 |
| ReagentⅡ | 65 | 65 | 65 |
混匀，25℃静置 15 min，于 540 nm处测定吸光值，记为 A 测定、A 标准、A 空白，计算ΔA 测=A 测定-A 空白、ΔA 标=A 标准-A 空白。
1. 标准曲线的绘制
以标准液浓度为 y轴，ΔA 标为 x轴绘制标准曲线。将ΔA 测代入标准曲线公式计算出 y（μM）。
2. 样本亚硝酸盐含量计算
NO2- (μg/g)=y×V 样总×46÷1,000÷W×n=0.069×y÷W×n
V 样总：样本总体积，1.5 mL；46：NO2-相对分子质量，g/mol；1,000：单位换算系数，1 L=1,000 mL；W：样本质量，g；n：样本的稀释倍数。
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
请等待最新文献信息更新。
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