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谷氨酸脱羧酶(GAD)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
CheKine™ Micro Glutamate Decarboxylase (GAD) Activity Assay Kit
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活动截止时间:2024年1月31日
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CheKine™ 谷氨酸脱羧酶(GAD)活性检测试剂盒(微量法)是一款基于比色法的微量检测工具,可在细胞代谢研究中对谷氨酸脱羧酶(GAD)活性进行快速、稳定的测定。该试剂盒专为细胞分析场景设计,适用于动物组织、血清或血浆等多种生物样本,帮助研究者精准评估GAD介导的γ-氨基丁酸(GABA)生成效率。
谷氨酸脱羧酶(Glutamate Decarboxylase,GAD)是催化谷氨酸转化为抑制性神经递质γ-氨基丁酸(GABA)的限速酶。GABA作为中枢神经系统中关键的抑制性神经递质,不仅参与神经信号调控,还被报道具有降血压、增进脑活力、营养神经细胞、保持神经安定、促进生长激素分泌及保肝利肾等多重生理作用,因此在医药与保健食品领域备受关注。CheKine™ 谷氨酸脱羧酶(GAD)活性检测试剂盒(微量法)通过GAD催化谷氨酸生成GABA,再利用经典的berthelot反应测定GABA含量,间接反映GAD活性水平,为细胞代谢及神经生物学研究提供可靠数据支持。
应用领域:细胞代谢研究、神经递质合成机制探索、GABA能神经元功能分析、药物筛选及保健食品功效评价等细胞水平实验场景。
| 中文名称 | 谷氨酸脱羧酶(GAD)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Glutamate Decarboxylase (GAD) Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB3044 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | •Reagent I •Reagent Ⅱ •Reagent Ⅲ •Reagent Ⅳ •Reagent Ⅴ •Reagent VI •Reagent VII |
| 分子 | GAD |
| 检测指标 | GAD |
| 注意事项 | •推荐使用新鲜样本,如果不立即进行实验,样本可在-80℃保存数周。测定时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 4℃,避光保存 6 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输(蓝冰) |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。 |
Reagent VII:即用型;使用前,平衡到室温。4℃保存。
| 试剂 | 测定孔(μL) | 对照孔(μL) |
|---|---|---|
| 样本 | 100 | 0 |
| 灭活样本(95℃反应 10 min) | 0 | 100 |
| ReagentⅠ | 100 | 100 |
| Reagent II | 100 | 100 |
混匀,40℃水浴反应 1 h后,95℃水浴 10 min终止反应,冷却至室温,取反应液待用。以下操作在新的 1.5 mL离心管中操作:
| 试剂 | 测定孔(μL) | 对照孔(μL) |
|---|---|---|
| 反应液 | 40 | 40 |
| Reagent III | 10 | 10 |
| Reagent IV | 50 | 50 |
| Reagent V | 100 | 100 |
混匀,室温静置 5 min。
| 试剂 | 测定孔(μL) | 对照孔(μL) |
|---|---|---|
| Reagent VI | 100 | 100 |
混匀,室温静置 5 min。
| 试剂 | 测定孔(μL) | 对照孔(μL) |
|---|---|---|
| Reagent VII | 200 | 200 |
3. 充分混匀,取 200 μL于 96孔板或微量玻璃比色皿,记录 640 nm处吸光值,测定孔记为 A 测定,对照孔记为 A 对照。计算ΔA=A 测定-A 对照。
标准条件下测定回归方程为 y=0.0682x-0.0432,R2=0.999;x为标准品浓度(μmol/mL),y为吸光值。
酶活单位定义:每毫克蛋白每分钟催化产生 1 nmol GABA定义为一个酶活力单位。
GAD(U/mg prot)=(ΔA+0.0432)÷0.0682×V反总÷(V样×Cpr)÷T×1,000=733×(ΔA+0.0432)÷Cpr
酶活单位定义:每克样本每分钟催化产生 1 nmol GABA定义为一个酶活力单位。
GAD(U/g 鲜重)=(ΔA+0.0432)÷0.0682×V反总÷(W×V样÷V样总)÷T×1,000=733×(ΔA+0.0432)÷W
酶活单位定义:每毫升液体每分钟催化产生 1 nmol GABA为一个酶活力单位。
GAD(U/mL)=(ΔA+0.0432)÷0.0682×V反总÷(V样÷V样总)÷T×1,000=733×(ΔA+0.0432)
V 反总:反应体系总体积,0.3 mL;V 样:加入的样本体积,0.1 mL;V 样总:提取液体积,1 mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;1,000:换算系数,1 μmol=1,000 nmol。
A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
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