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活动截止时间：2024年1月31日
亚科因生物推出的 CheKine™ 胃蛋白酶活性检测试剂盒（微量法） (CheKine™ Micro Pepsase Activity Assay Kit) 是一套基于比色法的微量体系，用于定量测定细胞及组织等生物样本中胃蛋白酶（Pepsin）活性的即用型试剂盒。
胃蛋白酶由胃粘膜主细胞分泌，负责将食物中的完整蛋白质水解为小肽段，是胃内蛋白消化的关键酶。临床上，胃蛋白酶活性降低常见于神经性低酸症、慢性胃炎、慢性胃扩张及慢性十二指肠炎等疾病，因此其活性水平常被用作胃功能评估的辅助指标。
本试剂盒利用胃蛋白酶对血红蛋白的特异性水解作用：样本中的胃蛋白酶在酸性条件下催化血红蛋白裂解，产生的小肽段与福林试剂（Folin-Ciocalteu reagent）发生显色反应，生成蓝色复合物。在 660 nm 处测定吸光度，颜色深浅与胃蛋白酶活性在一定范围内呈正比，从而实现高灵敏度的定量检测。
该试剂盒广泛适用于细胞代谢研究、胃功能机制探索、消化系统疾病模型评估及药物对胃蛋白酶活性影响的体外实验，为基础科研及药物筛选提供可靠数据支持。
| 中文名称 | 胃蛋白酶活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Pepsase Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB2340 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | •Reagent I •Reagent Ⅱ •Reagent Ⅲ •Reagent Ⅳ •Reagent Ⅴ •Reagent VI •Standard |
| 分子 | 胃蛋白酶 |
| 检测指标 | 胃蛋白酶 |
| 注意事项 | •推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存数周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 4℃，避光保存 6 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
注意：正式检测前，建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。
Reagent I：即用型；使用前，平衡到室温。4℃保存。
Reagent II：即用型；使用前，平衡到室温。4℃保存。
Working Reagent III：临用前配制；48 T加入 6 mL Reagent II，96 T加入 12 mL Reagent II，充分溶解，用不完的试剂 4℃避光保存 1周。
Working Reagent IV：临用前配制；48 T加入 6 mL去离子水，96 T加入 12 mL去离子水，充分溶解，用不完的试剂 4℃避光保存 1周。
Working Reagent V：临用前配制；48 T加入 7.5 mL去离子水，96 T加入 15 mL去离子水，充分溶解，用不完的试剂 4℃保存 1周。
Reagent VI：即用型；使用前，平衡到室温。4℃避光保存。
注意：Reagent IV、Reagent V 和 Reagent VI 有一定的刺激性，建议在使用过程中做好个人防护。
Standard：即用型；使用前，平衡到室温。4℃避光保存。
注意：建议使用新鲜样本。如果不立即使用，可将样品在-80℃下保存一个月。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在 4 h内完成样品解冻。
动物组织：称取约 0.1 g样本，加入 1 mL ReagentⅠ，冰浴匀浆，8,000 g，4℃离心 10 min，取上清液，置冰上待测。
注意：如需测定蛋白浓度，推荐使用 Abbkine货号：KTD3001的蛋白质定量试剂盒（BCA法）进行样本蛋白质浓度测定。
| 试剂 | 空白孔（μL） | 标准孔（μL） | 测定孔（μL） | 对照孔（μL） |
|---|---|---|---|---|
| 样本 | 0 | 0 | 20 | 0 |
| 去离子水 | 0 | 0 | 0 | 100 |
| Working Reagent III | 0 | 0 | 100 | 0 |
| 置于 37℃水浴保温 10 min | ||||
| Working Reagent IV | 0 | 0 | 100 | 100 |
| 盖紧后摇匀 1 min | ||||
| 样本 | 0 | 0 | 0 | 20 |
| 混匀后 8,000 g，4℃离心 10 min取上清，下述操作在 96孔板或微量玻璃比色皿中操作： | ||||
| 上清 | 0 | 0 | 20 | 20 |
| Standard | 0 | 20 | 0 | 0 |
| 去离子水 | 20 | 0 | 0 | 0 |
| Reagent II | 40 | 40 | 40 | 40 |
| Working Reagent V | 120 | 120 | 120 | 120 |
| Reagent VI | 20 | 20 | 20 | 20 |
4. 混匀后室温静置 20 min，记录 580 nm处吸光值，空白孔记为 A 空白，标准孔记为 A 标准，测定孔记为 A 测定，对照孔记为 A 对照。计算ΔA 测定=A 测定-A 对照，ΔA 标准=A 标准-A 空白。
注意：空白管和标准管只需做 1-2次。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测定小于 0.002可适当加大样本量。如果ΔA 测定大于 0.6，样本可用去离子水进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数，或减少提取用样本量。
注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
酶活单位定义：37℃每毫克蛋白每分钟催化血红蛋白水解生成 1 nmol酪氨酸定义为一个酶活力单位。
胃蛋白酶(U/mg prot)=C 标准×ΔA 测定÷ΔA 标准×V 样×F÷(Cpr×V 样)÷T
胃蛋白酶(U/mg prot)=550×ΔA 测定÷ΔA 标准÷Cpr
酶活单位定义：37℃每克组织每分钟催化血红蛋白水解生成 1 nmol酪氨酸定义为一个酶活力单位。
胃蛋白酶(U/g 鲜重)=C 标准×ΔA 测定÷ΔA 标准×V 样×F÷(W×V 样÷V 样总)÷T
胃蛋白酶(U/g 鲜重)=550×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W
C 标准：标准溶液的浓度，0.5 μmol/mL=500 nmol/mL；F：稀释倍数，(20+100+100)÷20=11；V 样总：样本总体积，1 mL；V 样：加入的样本体积，0.02 mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；T：反应时间，10 min；W：样本质量，g。
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
请等待最新文献信息更新。
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