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单宁含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™
CheKine™ Micro Tannin Assay Kit
产品特点:
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活动截止时间:2024年1月31日
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亚科因生物研发的CheKine™ 单宁含量检测试剂盒(微量法)是一款基于比色法的微量检测工具,专为快速、精准测定植物组织、果汁、蜂蜜等样品中的单宁含量而设计。通过标准曲线定量,用户可在 0.0156–1 mg/mL 范围内获得可靠结果。
单宁(Tannin)是一类广泛存在于植物体内的多元酚化合物,又称植物多酚,具有典型的涩味。根据化学结构,单宁可分为水解单宁与缩合单宁两大类。它们能够与蛋白质、生物碱、多糖形成沉淀,并与多种金属离子发生络合或静电作用。单宁与蛋白质结合的能力被称为“收敛性”或“涩性”,这一特性不仅是其止血、抑菌、抗过敏、抗突变、抗肿瘤及抗衰老等多种生理活性的基础,也直接影响食品与饮品的口感品质。因此,准确测定样品中的单宁含量,对于植物生理研究、食品风味评价及功能产品开发均具有重要意义。
本试剂盒主要用于细胞代谢及氧化应激相关研究,可广泛应用于植物生理学、食品科学、天然产物开发及细胞水平的功能评价实验。
| 中文名称 | 单宁含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Tannin Assay Kit |
| 产品货号 | KTB1541 |
| 检测类型 | 氧化应激 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | • Assay Buffer •Chromogen •Standard |
| 检测范围 | 0.0156-1 mg/mL |
| 分子 | Tannin |
| 检测指标 | Tannin |
| 注意事项 | • 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用。 • 混合或复溶组分时,避免产生气泡。 • 勤换吸头,避免各组分之间的交叉污染。 • 实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 建议收到货后避光保存于4℃,有效期为6个月。请参考说明书中各个组分的最佳保存条件进行储存。 |
| 运输条件 | 冰袋运输(蓝冰) |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。 |
注意:正式检测前,建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。
| 试剂盒组分 | 规格 | 储存条件 |
|---|---|---|
| Assay Buffer | 5 mL (48 T) 10 mL (96 T) | 4℃ |
| Chromogen | 5 mL (48 T) 10 mL (96 T) | 4℃,避光保存 |
| Standard Powder | ×1 vial (48 T) ×1 vial (96 T) | 4℃,避光保存 |
Assay Buffer:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
Chromogen:即用型;使用前,平衡到室温;4℃避光保存。
注意:Chromogen有一定的刺激性,建议在使用过程中做好个人防护。
Standard:临用前加入 1 mL去离子水溶解,配制成 5 mg/mL Standard备用,4℃避光保存。
按下表所示用蒸馏水将 5 mg/mL单宁标准品稀释为 1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.0313、0.0156 mg/mL的标准溶液。
| 序号 | 标准品体积 | 去离子水体积(µL) | 标准品浓度(mg/mL) |
|---|---|---|---|
| Std.1 | 200 µL of 5 mg/mL | 800 | 1 |
| Std.2 | 100 µL of Std.1(1 mg/mL) | 100 | 0.5 |
| Std.3 | 100 µL of Std.2 (0.5 mg/mL) | 100 | 0.25 |
| Std.4 | 100 µL of Std.3 (0.25 mg/mL) | 100 | 0.125 |
| Std.5 | 100 µL of Std.4 (0.125 mg/mL) | 100 | 0.0625 |
| Std.6 | 100 µL of Std.5 (0.0625 mg/mL) | 100 | 0.0313 |
| Std.7 | 100 µL of Std.6 (0.0313 mg/mL) | 100 | 0.0156 |
注意:每次实验都要做一次标准品检测,制作标曲;稀释后的标准品溶液不稳定,必须在 4小时内使用。
(1) 纤维较少的植物组织:称取约 0.1 g样本,加入 1 mL去离子水,充分匀浆后转移到 EP管中,80℃水浴提取 30 min,8,000 g,25℃离心 10 min,取上清液待测。
(2) 纤维较多的植物组织:将样本烘干至恒重,粉碎,过 40目筛之后,称取约 0.1 g,加入 1 mL去离子水,混匀,80℃水浴提取 30 min,8,000 g,25℃离心 10 min,取上清液待测。
1. 酶标仪或可见分光光度计预热 30 min以上,调节波长到 760 nm。可见分光光度计用去离子水调零。
2. 样本测定(在 96孔板或微量玻璃比色皿中依次加入下列试剂):
| 试剂 | 空白孔(μL) | 标准孔(μL) | 测定孔(μL) |
|---|---|---|---|
| 去离子水 | 100 | 90 | 90 |
| 不同浓度 Std. | 0 | 10 | 0 |
| 样本 | 0 | 0 | 10 |
| Chromogen | 50 | 50 | 50 |
| Assay Buffer | 50 | 50 | 50 |
3. 混匀后室温(25℃)放置 10 min,于 760 nm测定吸光值,计算ΔA 测定=A 测定-A 空白、ΔA 标准=A 标准-A 空白(空白管只需做 1管)。
注意:空白管和标准管只需做 1-2次。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验,如果ΔA 测定小于 0.02可适当加大样本量。如果 A 测定大于 1 mg/mL的ΔA 标准,样本可用去离子水进一步稀释,计算结果乘以稀释倍数。
注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
1. 标准曲线的绘制
以标准液浓度为 y轴,ΔA 标为 x轴绘制标准曲线(浓度为 y轴更方便计算结果)。将ΔA 测带入标准曲线公式计算出 y(mg/mL)。
2. 样本单宁含量计算
(1) 按样本质量计算
单宁含量(mg/g 质量)=y×V 提取÷W×n=y÷W×n
(2) 按液体体积计算
单宁含量(mg/mL)=y×n
V 提取:样本提取加入去离子水体积,1 mL;W:样本质量,g;n:样本进一步稀释的稀释倍数。
A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
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