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活动截止时间：2024年1月31日
亚科因生物研发的CheKine™ 淀粉含量检测试剂盒（微量法） (CheKine™ Micro Starch Assay Kit, KTB1371) 是一种基于蒽酮-比色法的微量检测体系，可快速、准确地从植物组织样本中分离并定量淀粉含量，为细胞糖代谢研究提供可靠数据。
淀粉是植物体内糖的主要储存形式，其含量变化直接反映细胞能量代谢状态。本试剂盒首先利用 80 % 乙醇 去除可溶性糖，随后通过 酸水解 将淀粉完全转化为葡萄糖；生成的葡萄糖与蒽酮试剂发生显色反应，在 620 nm 处产生稳定吸收峰。吸光度值与葡萄糖浓度成正比，进而可反推出原始样本中的淀粉含量。
适用于植物生理学、作物育种、食品营养评价等方向，可服务于细胞糖代谢研究、光合产物分配分析及逆境胁迫下淀粉动态监测等实验场景。
| 中文名称 | 淀粉含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Starch Assay Kit |
| 产品货号 | KTB1371 |
| 检测类型 | 糖代谢 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | • Extraction Buffer • Reagent I • Reagent II • Standard |
| 分子 | Starch Assay Kit |
| 检测指标 | Starch Assay Kit |
| 注意事项 | •快速加入工作试剂应该很快，混合彻底。 •以下物质会干扰，应避免样品制备。 EDTA（> 0.5mM），抗坏血酸，SDS（> 0.2％），叠氮化钠，NP-40（> 1％）和吐温-20（> 1％）。 |
| 保存建议 | 建议收到货后避光保存于4°C，有效期为6个月。请参考说明书中各个组分的最佳保存条件进行储存。 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
注意：正式检测前，建议选择 2-3 个预期差异较大的样本进行预实验。
注意：Reagent I 有刺激性气味，Reagent II 有毒，浓硫酸有强腐蚀性，建议在通风橱进行实验。
| 组分 | 规格（96 T） | 储存条件 |
|---|---|---|
| Extraction Buffer | 120 mL | 4℃ |
| Reagent I | 50 mL | 4℃ |
| Reagent II Powder | ×1 vial | 4℃，避光保存 |
| Standard Powder | ×1 vial | 4℃ |
Standard：临用前配制；加入 1 mL 去离子水使其溶解，即为 10 mg/mL 葡萄糖标准液，4℃可保存 2 周。
使用 10 mg/mL 标准液，按照下表所示，进一步稀释成标准品：
| 序号 | Standard 体积 | 去离子水体积（µL） | 浓度（mg/mL） |
|---|---|---|---|
| Std.1 | 200 µL 10 mg/mL Standard | 1,800 | 1 |
| Std.2 | 400 µL of Std.1 (1 mg/mL) | 600 | 0.4 |
| Std.3 | 200 µL of Std.1 (1 mg/mL) | 800 | 0.2 |
| Std.4 | 100 µL of Std.1 (1 mg/mL) | 900 | 0.1 |
| Std.5 | 50 µL of Std.1 (1 mg/mL) | 950 | 0.05 |
| Std.6 | 40 µL of Std.1 (1 mg/mL) | 960 | 0.04 |
| Std.7 | 30 µL of Std.1 (1 mg/mL) | 970 | 0.03 |
| Std.8 | 20 µL of Std.1 (1 mg/mL) | 980 | 0.02 |
| Blank | 0 | 1,000 | 0 |
注意：每次实验都要做一次标准品检测，制作标曲；稀释后的标准品溶液不稳定，必须在 4 小时内使用。
注意：1. 推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存一个月。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在 4 h 内完成样品解冻。2. 部分试剂有强腐蚀性，操作时须做好防护。
| 试剂 | 测定管（μL） | 标准管（μL） | 空白管（μL） |
|---|---|---|---|
| 样本上清 | 50 | 0 | 0 |
| Standard | 0 | 50 | 0 |
| 去离子水 | 0 | 0 | 50 |
| Reagent II | 250 | 250 | 250 |
3. 混匀后，放入 95℃水浴 15 min（盖紧并使用封口膜缠绕管口），自然冷却至室温，充分混匀，取 200 μL 至微量玻璃比色皿或 96 孔板中，测定 620 nm 处吸光度，分别记为 A 测定、A 标准、A 空白，计算 ΔA 测定=A 测定-A 空白、ΔA 标准=A 标准-A 空白。
注意：标准曲线和空白管只需做 1-2 次。实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验，如果 A 测定大于 1.0，样本上清液可用提取液（按照 0.35 mL Reagent I：1.35 mL 去离子水的比例，按需配制）进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数，如果 A 测定小于 A 空白可适当加大样本量。
注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
以标准溶液浓度为 x 轴，ΔA 标准为 y 轴，绘制标准曲线，得到标准方程，将 ΔA 测定带入方程得到 x (mg/mL)。
淀粉含量 (mg/g 干重)=x×V 样÷(W×V 样÷V 样总)÷1.11×N=x×1.53÷W×N
V 样：加入反应体系中样本体积，0.05 mL；V 样总：加入 Extraction Buffer 体积，1.7 mL；W：样本质量，g；1.11：是此法测得葡萄糖含量换算为淀粉含量的常数，即 111 μg 葡萄糖用蒽酮试剂显色相当于 100 μg 淀粉用蒽酮试剂显示的颜色；N：样本稀释倍数。
A: 加入 5.25 mL 蒸馏水，将粉末成分溶解。注意慢慢滴加浓硫酸，边滴加边慢慢混匀，一般需要20min 溶解充分。最后会呈现黄绿色。失效状态：墨绿色、深棕色或黑色。这表明在配制过程中蒽酮因高温已被碳化或严重氧化，必须废弃，重新配制。
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
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