糖原含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™

Name: 糖原含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™
Brand: Abbkine
SKU: KTB1340
Price: 278 CNY
Availability: InStock

CheKine™ Micro Glycogen Assay Kit

产品货号

KTB1340

产品特点：

简单、快速、灵敏的比色法，无需昂贵仪器即可在常规酶标仪上完成检测

专为动物组织、细菌及细胞样品优化，样本用量少，适合微量样本研究

提供详细的样品制备流程与结果计算方法，实验方案清晰，新手亦可快速上手

检测范围 0.003125–0.25 mg/mL，灵敏度低至 0.003125 mg/mL，覆盖生理与病理状态下的糖原波动

试剂盒组分齐全，包含 Extraction Buffer、Chromogen 与 Standard，开盒即可开展实验

选择规格

96 T/96 S

¥278

现货（当天发货）

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活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

亚科因生物研发的CheKine™ 糖原含量检测试剂盒（微量法）（CheKine™ Micro Glycogen Assay Kit, KTB1340）是一款基于比色法的微量检测工具，可快速、灵敏地定量动物组织、细菌及细胞样品中的糖原含量，为细胞代谢研究提供可靠数据。

背景与原理

糖原是由葡萄糖单元聚合而成的高分子多糖，是生物体最重要的能量储备形式之一，主要储存在肝脏（肝糖原）和骨骼肌（肌糖原）中。肝糖原可直接分解为葡萄糖以维持血糖稳态；肌糖原则先分解为乳酸，经血液运输至肝脏后通过糖异生途径再生成葡萄糖。本试剂盒利用酸性条件下糖原被水解为葡萄糖，再经特定酶促反应生成有色产物，在特定波长下测定吸光度，吸光度值与糖原浓度成正比，从而实现对微量样本中糖原的准确定量。

应用领域

本试剂盒广泛适用于细胞代谢研究，可用于：

肝细胞、肌细胞等原代或细胞系中糖原储备的动态监测
药物或营养干预对糖原合成与分解影响的机制研究
细菌糖原积累与能量代谢相关表型分析
动物组织（肝、肌肉等）在代谢疾病模型中的糖原水平评估

产品参数

中文名称	糖原含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™
英文名称	CheKine™ Micro Glycogen Assay Kit
产品货号	KTB1340
检测类型	糖代谢
检测方法	比色法
试剂盒组分	• Extraction Buffer • Chromogen • Standard
检测范围	0.003125-0.25 mg/mL
灵敏度	0.003125 mg/mL
分子	Glycogen
检测指标	Glycogen
注意事项	• 不同批次号、不同厂家之间的组分不可混用，否则可能导致结果异常。 • 混合或复溶组分时，避免产生气泡。 • 勤换吸头，避免各组分之间的交叉污染。 • 实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 • 实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在标准曲线测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测，结果乘以稀释倍数。 • Extraction Buffer具有腐蚀性，Chromogen具有一定的毒性，请操作时做好防护措施。
保存建议	该试剂盒的有效期为12个月，4℃保存；试剂盒各组分的储存条件，请参考说明书。
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

注意：正式检测前，建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

自备耗材

酶标仪或可见分光光度计（能测 620 nm处的吸光度）
低温离心机、水浴锅
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头、EP管
去离子水，浓硫酸

试剂准备

试剂盒组分

组分	规格	储存条件
Extraction Buffer	120 mL	4℃
Chromogen Powder	×1 vial	4℃，避光保存
Standard	1 mL	4℃

Extraction Buffer：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。

Chromogen：先加 7.2 mL去离子水溶解粉末，然后缓慢加入 28.8 mL浓硫酸，充分溶解混匀后使用。4℃避光保存，有效期为一周。

注意：Extraction Buffer具有腐蚀性，Chromogen具有一定的毒性，操作时请做好防护措施。

Standard：1 mg/mL；4℃保存。

标准曲线设置

按下表所示用去离子水将 1 mg/mL标准品稀释为 0.25、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0.003125 mg/mL的标准溶液。

注意：每次实验都要做一次标准品检测，制作标曲；稀释后的标准品溶液不稳定，必须在 4小时内使用。

序号	标准品体积	去离子水体积（µL）	浓度（mg/mL）
Std.1	100 µL	300	0.25
Std.2	160 µL of Std.1	240	0.1
Std.3	200 µL of Std.2	200	0.05
Std.4	200 µL of Std.3	200	0.025
Std.5	200 µL of Std.4	200	0.0125
Std.6	200 µL of Std.5	200	0.00625
Std.7	200 µL of Std.6	200	0.003125

样本制备

注意：推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存 1个月。

1. 组织：称取 0.1 g样本，置于 10 mL试管中，加入 0.75 mL Extraction Buffer，置于沸水浴中煮沸 20 min（塞紧试管塞，防止水分蒸发），每 5 min振摇试管 1次，充分混匀。待组织全部溶解后，取出试管冷却后去离子水定容到 5 mL，混匀，8,000 g，25°C离心 10 min，取上清液待测。

2. 细胞或细菌：收集 500万细菌或细胞到 EP管内，离心后弃上清，加入 0.75 mL Extraction Buffer超声波破碎细菌或细胞（功率 200 W，超声 3 s，间隔 10 s，重复 30次）；转移至 10 mL试管中，置于沸水浴中煮沸 20 min（塞紧试管塞，防止水分蒸发），每 5 min振摇试管 1次，充分混匀。取出试管冷却后去离子水定容到 5 mL，混匀，8,000 g，25°C 离心 10 min，取上清液待测。

注意：如需测定蛋白浓度，推荐使用 Abbkine货号：KTD3001的蛋白质定量试剂盒（BCA法）进行样本蛋白质浓度测定。

实验步骤

1. 酶标仪或可见分光光度计预热 30 min以上，调节波长到 620 nm，可见分光光度计用去离子水调零。

2. 样本测定：在 EP管中依次加入下列试剂：

试剂	空白管（μL）	标准管（μL）	测定管（μL）
样本	0	0	60
标准液	0	60	0
去离子水	60	0	0
Chromogen	240	240	240

3. 混匀，置于 95°C 水浴 10 min（盖紧，防止水分蒸发），冷却，取 200 µL转移至 96孔板或微量玻璃比色皿中，620 nm波长处测定吸光值，分别记为 A 空白，A 标准，A 测定，计算ΔA 测定=A 测定-A 空白，ΔA 标准=A 标准-A 空白。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测定小于 0.001可适当加大样本量。如果ΔA 测定大于 1.5，样本可用去离子水进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数，或减少提取用样本量。

结果计算

注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

1. 标准曲线的绘制：

以标准液浓度为 y轴，ΔA 标准为 x轴，绘制标准曲线（浓度为 y轴便于计算结果）。将ΔA 测定代入 x计算出 y (mg/mL)。

2. 按照样本质量计算：

糖原(mg/g)=5.55×y÷W×n

糖原(mg/g)=1.11×(y×V 样)÷(W×V 样÷V 样总)×n=5.55×y÷W×n

3. 按照样本蛋白浓度计算：

糖原(mg/mg prot)=1.11×y÷Cpr×n

糖原(mg/mg prot)=1.11×(y×V 样)÷(V 样×Cpr)×n=1.11×y÷Cpr×n

4. 按照细菌或细胞数量计算：

糖原(mg/104)=5.55×y÷细菌或细胞数量×n

糖原(mg/104)=1.11×(y×V 样)÷(细菌或细胞数量×V 样÷V 样总)×n=5.55×y÷细菌或细胞数量×n

1.11：是此法测得葡萄糖含量换算为糖原含量的常数，即 100 μg葡萄糖用蒽酮试剂显色相当于 111 μg糖原用蒽酮试剂所显之色；

V 样：加入反应体系中待测样本体积，0.06 mL；

W：样本质量，g；

V 样总：样本总体积，5 mL；

n：稀释倍数；

Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；

细菌或细胞数量：以 104为单位，万个。

常见问题

Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多？

A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。

Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证？

A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。