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总糖含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™
CheKine™ Micro Total Carbohydrate Assay Kit
产品特点:
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活动截止时间:2024年1月31日
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CheKine™ 总糖含量检测试剂盒(微量法)是一款基于DNS显色-比色法的细胞代谢分析工具,可在微量体系内对动物组织、植物组织及血清(血浆)等生物样本中的总糖含量进行快速、灵敏的定量检测。
总糖主要指具有还原性的葡萄糖、果糖、乳糖,以及在测定条件下可水解为还原性单糖的蔗糖、麦芽糖及部分水解的淀粉。糖类既是动植物细胞的重要结构组分,也是细胞能量代谢与物质储存的核心原料。本试剂盒利用3,5-二硝基水杨酸(DNS)与还原糖在碱性-高温条件下发生显色反应,生成棕红色化合物,在540 nm处具有特征吸收峰;吸光度与总糖浓度成正比,从而实现对0.1–2 mg/mL范围内总糖的准确定量。
本试剂盒适用于细胞代谢研究场景,可用于监测细胞内外总糖水平变化,评估糖代谢状态,支持糖酵解、能量代谢及营养胁迫等相关基础研究。
| 中文名称 | 总糖含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Total Carbohydrate Assay Kit |
| 产品货号 | KTB1350 |
| 检测类型 | 糖代谢 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | • Hydrochloric Acid • Sodium Hydroxide • DNS Reagent • Standard |
| 检测范围 | 0.1-2 mg/mL |
| 灵敏度 | 0.1 mg/mL |
| 分子 | Total Carbohydrate |
| 检测指标 | Total Carbohydrate |
| 注意事项 | • 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用;否则,可能导致结果异常。 • 混合或复溶组分时,避免产生气泡。 • 勤换吸头,避免各组分之间的交叉污染。 • 实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。 • 实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在标准曲线测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测,结果乘以稀释倍数。 • Hydrochloric Acid和Sodium Hydroxide具有腐蚀性,DNS Reagent具有一定的毒性,请操作时做好防护措施。 • 此试剂盒对于纤维素的分解程度无法达到 100%。 |
| 保存建议 | 该试剂盒的有效期为12个月,4℃保存;试剂盒各组分的储存条件,请参考说明书。 |
| 运输条件 | 冰袋运输(蓝冰) |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。 |
注意:正式检测前,建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。
试剂盒组分
| 试剂名称 | 规格 | 储存条件 |
|---|---|---|
| Hydrochloric Acid | 48 T: 60 mL 96 T: 120 mL | 4℃ |
| Sodium Hydroxide | 48 T: 60 mL 96 T: 120 mL | 4℃ |
| DNS Reagent | 48 T: 2.4 mL 96 T: 4.2 mL | 4℃,避光保存 |
| Standard Powder | 48 T: ×1 vial 96 T: ×1 vial | 4℃ |
Hydrochloric Acid:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
Sodium Hydroxide:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
DNS Reagent:即用型;使用前,平衡到室温;4℃避光保存。
注意:Hydrochloric Acid、Sodium Hydroxide和 DNS Reagent有一定的刺激性,建议在使用过程中做好个人防护。
Standard:临用前加入 1 mL去离子水溶解,配制 10 mg/mL标准品;4℃保存。
标准曲线设置:用去离子水将 10 mg/mL标准品稀释为 2,1.6,1,0.8,0.4,0.2,0.1 mg/mL。
注意:每次实验都要做一次标准品检测,制作标曲;稀释后的标准品溶液不稳定,必须在 4小时内使用。
如需测定蛋白浓度,推荐使用 Abbkine货号:KTD3001的蛋白质定量试剂盒(BCA法)进行样本蛋白质浓度测定。
| 试剂 | 空白管(µL) | 标准管(µL) | 测定管(µL) |
|---|---|---|---|
| Sample | 0 | 0 | 30 |
| Different Concentration Std. | 0 | 30 | 0 |
| 去离子水 | 30 | 0 | 0 |
| DNS Reagent | 30 | 30 | 30 |
混匀,沸水浴 10 min(盖紧,防止水分散失),取出冷却至室温
| 试剂 | 空白管(µL) | 标准管(µL) | 测定管(µL) |
|---|---|---|---|
| 去离子水 | 180 | 180 | 180 |
混匀,取 200 μL至 96孔板或微量玻璃比色皿中,在 540 nm处测定各孔的吸光度,分别记为 A 空白,A 标准和 A 测定,计算ΔA 测定=A 测定-A 空白,ΔA 标准=A 标准-A 空白
注意:空白管和标准管只需做 1-2次。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测定小于 0.02可适当加大样本量。如果ΔA 测定大于 2 mg/mL的ΔA 标准,样本可用去离子水进一步稀释,计算结果乘以稀释倍数,或减少提取用样本量。
| 序号 | 10 mg/mL标准品体积(µL) | 去离子水体积(µL) | 浓度(mg/mL) |
|---|---|---|---|
| Std.1 | 40 | 160 | 2 |
| Std.2 | 32 | 168 | 1.6 |
| Std.3 | 20 | 180 | 1 |
| Std.4 | 16 | 184 | 0.8 |
| Std.5 | 8 | 192 | 0.4 |
| Std.6 | 4 | 196 | 0.2 |
| Std.7 | 2 | 198 | 0.1 |
注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
(1) 按样本质量计算
(2) 按样本蛋白浓度计算
(3) 按血清(浆)体积计算
V 样:加入样本体积,0.03 mL;V 样总:组织样本总体积,10 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;V 液:液体样本体积,0.1 mL;V 样总:液体样本总体积,1 mL;n:稀释倍数。
A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
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