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活动截止时间：2024年1月31日
CheKine™ N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（NAG）活性检测试剂盒（微量法）是一款基于比色法的微量检测工具，可在 96 孔板内快速测定动植物组织、细菌、培养细胞及血清（浆）等样本中 N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（NAG）的活性，为细胞代谢研究提供可靠数据。
N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（EC 3.2.1.52，NAG）是一种广泛存在于溶酶体内的水解酶，其活性变化与肾小管间质性肾炎、尿路感染、糖尿病肾病、高血压肾病、肾移植排异反应及肾病综合征等病理进程密切相关。CheKine™ 试剂盒利用 NAG 特异性催化底物 N-β-乙酰氨基葡萄糖苷，生成对硝基苯酚（pNP）。pNP 在 400 nm 处具有特征吸收峰，其吸光度变化与 NAG 活性成正比，通过 400 nm 吸光度的实时监测即可精确定量样本中的 NAG 活性。
本试剂盒适用于细胞代谢研究，可用于：
| 中文名称 | N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro N-acetyl-β-D-glucosidase (NAG) Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB1326 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 样本类型 | 动植物组织、细菌和细胞、血清（浆）或其他液体 |
| 试剂盒组分 | •Extraction Buffer •Reagent I •Reagent Ⅱ •Reagent Ⅲ •Standard |
| 检测范围 | •测定动植物组织、细菌和细胞、血清（浆）或其他液体样本内的N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（NAG）活性。 • 提供了详细的样品制备和结果计算方法。 |
| 分子 | N-acetyl-β-D-glucosidase (NAG) |
| 检测指标 | N-acetyl-β-D-glucosidase (NAG) |
| 注意事项 | •推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存数周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | -20℃，避光保存 6 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
注意：正式检测前，建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。
Extraction Buffer：即用型；使用前，平衡到室温。4℃保存。
Reagent I：临用前配制；48 T加入 1.5 mL去离子水，96 T加入 3 mL去离子水，充分溶解，用不完的试剂-20℃避光保存 1个月。
Reagent II：即用型；使用前，平衡到室温。4℃保存。
Reagent III：即用型；使用前，平衡到室温。4℃保存。
Standard：即用型；5 μmol/mL对硝基苯酚溶液，临用前用蒸馏水将标准品稀释 8倍得 0.625 μmol/mL的标准溶液。4℃避光保存。
注意：每次实验，请使用新配制的标准品；配制好的标准品需要在 4 h之内使用。Standard有毒且有刺激性气味，建议在通风橱进行实验。
注意：建议使用新鲜样本。如果不立即使用，可将样品在-80℃下保存一个月。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在 4 h内完成样品解冻。
注意：如需测定蛋白浓度，推荐使用 Abbkine货号：KTD3001的蛋白质定量试剂盒（BCA法）进行样本蛋白质浓度测定。
| 试剂 | 空白孔（μL） | 标准孔（μL） | 测定孔（μL） | 对照孔（μL） |
|---|---|---|---|---|
| ReagentⅠ | 0 | 0 | 25 | 0 |
| Reagent II | 35 | 35 | 35 | 35 |
| Standard | 0 | 10 | 0 | 0 |
| 去离子水 | 35 | 25 | 0 | 25 |
| 样本 | 0 | 0 | 10 | 10 |
迅速混匀，37℃反应 30 min
| 试剂 | 空白孔（μL） | 标准孔（μL） | 测定孔（μL） | 对照孔（μL） |
|---|---|---|---|---|
| Reagent III | 130 | 130 | 130 | 130 |
3. 充分混匀，记录 400 nm处吸光值，空白孔记为 A 空白，标准孔记为 A 标准，测定孔记为 A 测定，对照孔记为 A 对照。计算ΔA 测定=A 测定-A 对照，ΔA 标准=A 标准-A 空白。
注意：空白管和标准管只需做 1-2次。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测定小于 0.02可适当加大样本量。如果ΔA 测定大于 1.6，样本可用去离子水进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数，或减少提取用样本量。
注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
酶活单位定义：每毫克蛋白在反应体系中每分钟生成 1 nmol对硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
酶活单位定义：每克样本在反应体系中每分钟生成 1 nmol对硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
酶活单位定义：每 104个细菌或细胞在反应体系中每分钟生成 1 nmol对硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
酶活单位定义：每毫升液体在反应体系中每分钟催化生成 1 nmol对硝基苯酚为一个酶活力单位。
C 标准：标准溶液的浓度，0.625 μmol/mL；V 样总：提取液体积，1 mL；V 样：加入的样本体积，0.01 mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；T：反应时间，30 min；n：细菌或细胞数量，以万计；W：样本质量，g；1,000：换算系数，1 μmol=1,000 nmol。
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
请等待最新文献信息更新。
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