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苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
CheKine™ Micro Phenylalanine Ammonia Lyase (PAL) Activity Assay Kit
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活动截止时间:2024年1月31日
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CheKine™ 苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性检测试剂盒(微量法)(CheKine™ Micro Phenylalanine Ammonia Lyase (PAL) Activity Assay Kit, Cat. KTB1160)是一款基于比色法的微量检测工具,可在96孔板内快速、定量测定细胞裂解液、植物组织匀浆等生物样本中苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性,为细胞代谢与苯丙烷类次生代谢研究提供便捷手段。
PAL(EC 4.3.1.5)是植物及少数微生物中苯丙烷类代谢的关键限速酶,动物体内尚未发现。该酶催化苯丙氨酸脱氨生成反式肉桂酸,进而驱动木质素、黄酮、异黄酮植保素等重要次生物质的合成,与植物的正常发育、抗病反应及逆境胁迫响应密切相关。本试剂盒通过检测PAL催化底物苯丙氨酸生成肉桂酸后所引起的290 nm吸光度变化,间接反映PAL活性,适用于细胞代谢研究中对PAL活性的快速评估。
本试剂盒主要用于细胞代谢研究,适用于植物细胞、微生物及悬浮细胞系等样本,帮助研究者探索苯丙烷类次生代谢通路、植物抗逆机制及细胞代谢调控网络。
| 中文名称 | 苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Phenylalanine Ammonia Lyase (PAL) Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB1160 |
| 检测类型 | 氨基酸代谢 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | • Extraction Buffer • Assay Buffer • Substrate • HCl |
| 分子 | PAL |
| 检测指标 | PAL |
| 注意事项 | • 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用。 • 勤换吸头,避免各组分之间的交叉污染。 • 混合或复溶组分时,避免产生气泡。 • 实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 收到货后,请避光保存于4℃。请参阅说明书中各个组件的存储条件,自发货之日起,按照推荐的保存条件,有效期为6个月。 |
| 运输条件 | 冰袋运输(蓝冰) |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。 |
Extraction Buffer:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
Assay Buffer:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
Working Substrate:临用前配制,加入去离子水充分溶解(48 T 的试剂盒需要 2.4 mL 去离子水;96 T 试剂盒需要 4.8 mL 去离子水),未用完的已溶解的 Substrate 可 4℃保存一周。
HCl:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
按照组织质量(g):称取约 0.1 g 组织,加入 1 mL Extraction Buffer,进行冰浴匀浆。10,000 g,4℃离心 10 min,取上清,置冰上待测。
| 试剂 | 测定孔(μL) | 空白孔(μL) |
|---|---|---|
| 样本 | 5 | 0 |
| Assay Buffer | 145 | 150 |
| Working Substrate | 40 | 40 |
混匀,30℃反应 30 min
| 试剂 | 测定孔(μL) | 空白孔(μL) |
|---|---|---|
| HCl | 10 | 10 |
3. 混匀,静置 10 min 后,290 nm 处记录测定孔吸光值 A1和空白孔吸光值 A2,ΔA=A1-A2。
注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
单位的定义:每 g 组织在反应体系中每 min 使 290 nm 下吸光值变化 0.05 定义为一个酶活性单位。
单位的定义:每 mg 组织蛋白在反应体系中每 min 使 290 nm 下吸光值变化 0.05 定义为一个酶活性单位。
单位的定义:每 g 组织在反应体系中每 min 使 290 nm 下吸光值变化 0.1 定义为一个酶活性单位。
单位的定义:每 mg 组织蛋白在反应体系中每 min 使 290 nm 下吸光值变化 0.1 定义为一个酶活性单位。
V 反总:反应体系总体积,200 µL;V 样:加入样本体积,5 µL;V 样总:加入提取液体积,1 mL;W:样品质量,g;T:反应时间,30 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL。
A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
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