葡萄糖脱氢酶(GCDH)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™

Name: 葡萄糖脱氢酶(GCDH)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
Brand: Abbkine
SKU: KTB1026
Price: 869 CNY
Availability: InStock

CheKine™ Micro Glucose Dehydrogenase (GCDH) Activity Assay Kit

产品货号

KTB1026

产品特点：

已验证适用于高等动物组织、血清（浆）及其他液体样本，样本类型覆盖全面

微量法设计，操作步骤精简，节省样本与试剂

基于NADH 340 nm 吸光度变化，结果直观、重复性好

组分齐全：包含 Extraction Buffer、Reagent I、Reagent Ⅱ，开盒即可实验

-20 ℃避光保存，冰袋运输，确保组分稳定性

选择规格

48 T/48 S

¥869

现货（次日发货）

96 T/96 S

¥1439

现货（次日发货）

🎉 限时优惠

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活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

亚科因生物研发的CheKine™ 葡萄糖脱氢酶（GCDH）活性检测试剂盒（微量法）是一款基于比色法的微量酶活测定工具，可快速、便捷地检测高等动物组织、血清（浆）或其他液体样本中葡萄糖脱氢酶（GCDH）的催化活性，为细胞代谢研究提供可靠数据支持。

葡萄糖脱氢酶（GCDH，EC 1.1.1.47）广泛存在于微生物及高等动物肝脏中，可催化D-葡萄糖 + NAD(P)⁺ → D-葡萄糖酸 + NAD(P)H的氧化还原反应。在低聚果糖工业中，GCDH 被用于去除葡萄糖副产物，提高低聚果糖纯度，同时生成的葡萄糖酸可进一步制备葡萄糖酸钙，兼具营养与补钙功能。本试剂盒通过监测340 nm 处 NADH 的生成速率，直接反映 GCDH 的催化活性，为酶学表征、工艺优化及代谢研究提供定量依据。

应用领域

本试剂盒专为细胞代谢研究设计，适用于：

肝细胞、肿瘤细胞等细胞模型中 GCDH 活性测定
血清、血浆等体液样本的葡萄糖代谢通路分析
低聚果糖生产工艺中 GCDH 的酶活监控与工艺优化
葡萄糖酸钙制备过程中的酶催化效率评估

产品参数

中文名称	葡萄糖脱氢酶(GCDH)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
英文名称	CheKine™ Micro Glucose Dehydrogenase (GCDH) Activity Assay Kit
产品货号	KTB1026
检测方法	比色法
样本类型	高等动物组织、血清（浆）或其他液体
试剂盒组分	•Extraction Buffer •Reagent I •Reagent Ⅱ
分子	GCDH
检测指标	GCDH
注意事项	•推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存数周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。
保存建议	-20℃，避光保存 6 个月
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

注意：正式检测前，建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

自备耗材

酶标仪或紫外分光光度计（能测 340 nm处的吸光度）
96孔 UV板或微量石英比色皿、可调节式移液枪及枪头
恒温水浴锅、制冰机、离心机
去离子水
匀浆器（如果是组织样本）

试剂准备

Extraction Buffer：即用型；使用前，平衡到室温。4℃保存。

ReagentⅠ：即用型；使用前，平衡到室温。4℃保存。

Working ReagentⅡ：临用前配制；48 T加入 11.4 mL ReagentⅠ，96 T加入 22.8 mL ReagentⅠ，充分溶解待用。用不完的试剂 4℃避光可保存一周。

样本制备

注意：推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存 1个月。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在 4 h内完成样品解冻。

组织：称取约 0.1 g样本，加入 1 mL Extraction Buffer，冰浴匀浆，8,000 g，4℃离心 10 min，取上清液，置冰上待测。
血清（浆）等液体样本：直接测定。若溶液有浑浊则离心后取上清进行测定。

如需测定蛋白浓度，推荐使用 Abbkine货号：KTD3001的蛋白质定量试剂盒（BCA法）进行样本蛋白质浓度测定。

实验步骤

酶标仪或紫外分光光度计预热 30 min，调节波长到 340 nm。紫外分光光度计用去离子水调零。
将配制好的Working ReagentⅡ置于 37℃预热 5 min。
操作表（下述操作在 96孔 UV板或微量石英比色皿中进行）：

试剂	测定孔（μL）
样本	10
Working ReagentⅡ	190

充分混匀，于 340 nm处测定 30 s的吸光值 A1与 5 min 30 s的吸光值 A2，计算ΔA=A2-A1。

注意：实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA小于 0.01可适当加大样本量，如果ΔA大于 1.5，样本可用 Extraction Buffer进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数，或减少提取用样本量。

结果计算

注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

A. 使用 96孔 UV板测定的计算公式如下

（1）按样本蛋白浓度计算：

酶活定义：每mg组织蛋白每分钟生成 1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。

GCDH (U/mg prot)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(V 样×Cpr)÷T=1,286×ΔA÷Cpr

（2）按样本质量计算:

酶活定义：每 g样品每分钟生成 1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。

GCDH (U/g 鲜重)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×109]÷(V 样×W÷V 样总)÷T=1,286×ΔA÷W

（3）按液体体积计算:

酶活定义：每mL样本每分钟生成 1 nmol NADH定义为一个酶活力单位。

GCDH (U/mL)=[ΔA×V 反总÷(ε×d)×10⁹]÷V 样÷T=1,286×ΔA

ε：NADH微摩尔消光系数，6.22×10³ L/mol/cm；d：96孔 UV板光径，0.5 cm；V 反总：反应体系总体积，2×10^-4 L；V 样：反应体系中样本体积，0.01 mL；V 样总：加入 Extraction Buffer体积，1 mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g；T：反应时间，5 min。

B. 使用微量石英比色皿测定的计算公式

将上述计算公式中光径 d: 0.5 cm调整为 d: 1 cm进行计算即可。

注意事项

样本提取上清液置于冰上待测，且样本提取完成后建议当天提取当天内测完。

常见问题

Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多？

A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。

Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证？

A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。

Q: 该产品线检测可使用分光光度计替代酶标仪吗？

A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。

Q: 该类试剂盒使用量应如何计算？

A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。

Q: 该系列试剂盒可以检测蓝藻等微生物样本吗？

A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。

文献引用

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