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细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(红色荧光)

Cell Cycle and Apoptosis Detection Kit (Red Fluorescence)

产品货号
KTA2020

产品特点:

  • 一次加样,同步完成细胞周期细胞凋亡双指标检测
  • 即用型染色试剂,无需额外配制,减少操作误差
  • 红色荧光通道(535/615 nm)兼容绝大多数流式细胞仪,避免与常用绿色/蓝色染料串扰
  • 试剂盒包含 RNase A,有效去除 RNA 干扰,确保 DNA 定量准确
  • 冰袋运输,到货后 4 °C 保存,至少可稳定 12 个月
  • 选择规格

    50 T
    ¥298
    现货(当天发货)
    100 T
    ¥579
    现货(当天发货)
    🎉 限时优惠

    买2送1活动进行中!购买任意2个规格产品,免费赠送100μL装一支。

    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    亚科因生物推出的细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(红色荧光)(Cell Cycle and Apoptosis Detection Kit, Red Fluorescence)是一款基于核酸染料Propidium Iodide (PI)的流式细胞术试剂盒,可在单管中同步完成细胞周期分布与凋亡水平的快速评估,适用于贴壁或悬浮培养细胞的常规分析。

    PI 是一种可嵌入双链 DNA 的红色荧光染料,其荧光强度与 DNA 含量呈正相关。细胞经固定、透化及 RNase A 处理后,PI 与 DNA 结合并在 Ex/Em = 535/615 nm 通道下产生信号。在流式图上,G0/G1 期细胞表现为荧光强度 1 的单峰;完成 DNA 复制的 G2/M 期细胞荧光强度为 2;S 期细胞介于 1–2 之间。晚期凋亡或坏死细胞因 DNA 片段化导致染色质丢失,荧光强度低于 1,形成sub-G1 峰,即经典的凋亡峰。通过比较各期细胞比例及 sub-G1 区域占比,即可同时获得细胞周期状态与凋亡水平信息。

    应用领域

    本试剂盒广泛应用于细胞生物学研究药物筛选肿瘤学毒理学等领域,适合监测化疗药物、辐射、基因编辑或信号通路调控对细胞增殖与凋亡的影响。

    细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(红色荧光)

    产品参数

    中文名称 细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(红色荧光)
    英文名称 Cell Cycle and Apoptosis Detection Kit (Red Fluorescence)
    产品货号 KTA2020
    样本类型 细胞
    试剂盒组分 • 核酸染料(50×)
    • 实验缓冲液 (10×)
    • RNase A (100×)
    注意事项 核染料的最佳浓度和孵育时间会基于具体应用而变化。染色条件可能需要根据特定的细胞类型进行调整。
    保存建议 自发货之日起,在推荐温度下至少稳定12个月。
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    自备耗材

    • 可调节式移液枪及枪头
    • 离心机
    • 流式细胞仪
    • 去离子水、PBS、70%乙醇

    试剂准备

    PI (50×): 平衡至室温,分装保存于-20℃,避光并避免反复冻融;

    1×Assay Buffer: 通过用去离子水稀释 10×Assay Buffer来制备 1×Assay Buffer。使用前在冰上预冷 1×Assay Buffer;

    Staining Solution: 将 100 µL RNase A 溶液和 200 µL PI (50×)加入 10 mL 1×Assay Buffer中,充分混合并避光,4℃下可保存一周。

    实验步骤

    注意:PI的最佳浓度和孵育时间取决于具体应用。染色条件可能需要根据特定的细胞类型进行修改。
    1. 用所需方法处理细胞;
    2. 对于非贴壁细胞,通过离心(4℃,600 g,5 min)收集 1-2×106个细胞。对于贴壁细胞,首先使用胰蛋白酶消化细胞,然后离心;
    3. 用预冷的 PBS洗涤细胞沉淀两次;
    4. 将细胞 600 g离心 5 min,除去上清,然后将细胞管转移至冰上;
    5. 用预冷的 70%乙醇缓慢重悬细胞,将细胞在-20℃下放置 2 h或更长时间(建议过夜固定 12-24 h);进行染色和分析之前,这些细胞可以在-20℃下保存数周;
    6. 注意:将细胞固定在单个细胞悬液中非常重要。在固定过程中,细胞可能会聚集。缓慢滴加初始体积的 70%乙醇,同时轻轻涡旋有助于防止细胞聚集;
    7. 4℃,1,000 g离心 5 min;
    8. 除去乙醇,并将细胞重悬于 1 mL冰冷的 PBS中;
    9. 4℃,500 g离心细胞 10 min,然后除去 PBS。重复步骤 7和 8两次以彻底除去乙醇;
    10. 将细胞重悬于 0.5 mL Staining Solution中,并在黑暗中于 37℃孵育 30 min;
    11. 用 PBS洗涤细胞两次,并用预冷的 PBS重悬。使用合适的 PE通道(Ex/Em=535/615 nm),通过流式细胞仪在 24 h内分析细胞。

    常见问题

    Q: 染免疫荧光共定位的切片,想对细胞核进行复染,是否可以用该试剂盒进行检测?

    A: 可以。

    Q: 该试剂盒里面的Nuclear Dye组分是对细胞进行活染还是固定后染色?

    A: 根据该试剂盒的实验步骤,是用70%乙醇对细胞进行固定,然后再进行细胞核染色。

    Q: 该试剂盒是否适用于死亡细胞的定量检测?

    A: 可以。

    Q: 该细胞周期试剂盒是否可以用荧光显微镜进行拍照?

    A: 可以用荧光显微镜拍照,但荧光显微镜无法对荧光强度进行准确定量。建议用流式细胞仪分析,可以得到不同亮度细胞数目。

    Q: 该试剂盒可以用于流式检测吗?

    A: 可以。

    文献引用

    Dihydrotanshinone I targets ESR1 to induce DNA double-strand breaks and proliferation inhibition in hepatocellular carcinoma.

    杂志名称: Phytomedicine | 作者: Nie, Yunmeng, et al.

    IF: 7 | 发表时间: 2024

    Phenotype remodelling of HNSCC cells in the muscle invasion environment.

    杂志名称: Journal of Translational Medicine | 作者: Zeng, Guozhong, et al.

    IF: 6 | 发表时间: 2024

    Aaptamine, Isolated from the Bunaken National Park's Sponge, Aaptos sp., Promotes Cell Cycle Arrest and Induces Necrotic Cell Death of Colorectal Cancers.

    杂志名称: Acta Chimica Slovenica | 作者: Fajarwati, Annisa Elcentia, et al.

    IF: 1 | 发表时间: 2024

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