如何快速提取蛋白？

越来越多的证据表明最常用的RIPA缓冲液可能导致蛋白质的随机损失，产生很多难以解释的疑难数据。Abbkine为用户提供动物和植物的蛋白提取方案: ExKine™ Pro 动物细胞/组织总蛋白提取试剂盒（柱式法）&ExKine™ Pro植物组织总蛋白提取试剂盒（柱式法）！可满足动植物细胞、动植物组织样本的全谱蛋白提取。柱式法提取蛋白不同于传统的溶液法，使用离心管柱提取技术结合优化的裂解缓冲液可以更快速、更有效地提取总蛋白，无需液氮研磨，使结果更加准确。该法不仅可以避免溶液法提取中的蛋白丢失问题，而且操作简单快速，能够快速、温和地提取不同类型的蛋白质。

ExKine™ Pro 动物细胞/组织总蛋白提取试剂盒（柱式法）的优势

1. 操作简单、快速，1-7 min之内即可完成；
2. 无蛋白丢失，蛋白得率可高达3-20 mg/mL；
3. 无需超声破碎，煮沸，反复冻融；
4. 可选择提取天然或者变性蛋白质。

ExKine™ Pro植物组织总蛋白提取试剂盒（柱式法）的优势

1、方便快捷：一“柱”到底，全程8分钟。

2、多种用途：适用样本齐全-植物组织叶片、种子、软茎、根。

3、蛋白得率高：从50-200 mg植物组织提总蛋白，得率可达2-8 mg/mL。

4、操作简单安全：无需液氮研磨，优化的裂解缓冲液更加高效提蛋白。

5、兼容性好：所得蛋白可用于SDS-PAGE和WB等下游实验。

结果展示

蛋白得率高 用不同的国际品牌和国内知名品牌的动物提取蛋白试剂盒产品对小鼠的肝脏组织进行蛋白提取实验，包括变性裂解液RIPA处理和非变性裂解的方式，结果如下：

Fig. 1 ExKine™ Pro 动物细胞/组织总蛋白提取试剂盒（柱式法）提取蛋白结果中，采用变性裂解的方式提取获得蛋白浓度高达20.06 mg/mL，非变性裂解的方式提取获得的蛋白浓度为20.99 mg/mL，在众多产品中，名列前茅。

无蛋白丢失

对不同品牌提取动物蛋白试剂盒产品提取获得的小鼠肝脏蛋白进行考马斯亮蓝染色，SDS-PAGE图如下：

Fig. 2 动物蛋白图谱的SDS-PAGA图（使用Abbkine KTP3007）。注：1-Marker;2-A公司的非变性裂解；3-Abbkine的非变性裂解；4-A公司的变性裂解；5-B公司的变性裂解；6-C公司的变性裂解；7-Abbkine的变性裂解；8-D公司的变性裂解。

对ExKine™ Pro植物组织总蛋白提取试剂盒（柱式法）提取获得的不同植物蛋白进行考马斯亮蓝染色，SDS-PAGE图如下：

Fig.3 植物蛋白图谱的SDS-PAGA图（使用Abbkine KTP3008）。1-大豆，2-玉米，3-菠菜，4-拟南芥。

提取核蛋白和膜蛋白的验证 分别以Histone H3抗体和ATP酶孵育小鼠肝脏细胞和293细胞中的蛋白，并将之与D公司的试剂盒提取的蛋白进行比较，结果如下：

Fig.4 用不同公司产品提取的蛋白进行验证。注：1-加入D公司试剂盒所提取的5 μL蛋白提取物；2-加入D公司试剂盒所提取的2.5 μL蛋白提取物；3-加入Abbkine试剂盒所提取的5 μL蛋白提取物；4-加入Abbkine试剂盒所提取的2.5 μL蛋白提取物。

结果表明Abbkine试剂盒可以提取核蛋白，同时提取膜蛋白效果尤为显著，在细胞和组织中提取，均可以获得背景清晰的蛋白条带。

Fig. 5 从不同植物(拟南芥、大豆)中提取总蛋白进行验证。左边泳道魏拟南芥，右边泳道为大豆。结果表明在不同植物样本中，ExKine™ Pro植物组织总蛋白提取试剂盒（柱式法）均可取的较好效果。

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