胞浆蛋白提取试剂盒-ExKine™

Name: 胞浆蛋白提取试剂盒-ExKine™
Brand: Abbkine
SKU: KTP3003
Price: 598 CNY
Availability: InStock

ExKine™ Cytoplasmic Protein Extraction Kit

产品货号

KTP3003

产品特点：

多用途：适用于新鲜哺乳动物细胞或组织，细胞器交叉污染极低。

方便快捷：非变性提取流程≤2小时，蛋白活性高。

兼容性好：所得蛋白可直接兼容Western Blot、蛋白分析及酶活力测定等下游应用。

选择规格

50 T

¥598

现货（次日发货）

200 T

¥1598

现货（次日发货）

🎉 限时优惠

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活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

ExKine™ 胞浆蛋白提取试剂盒 (ExKine™ Cytoplasmic Protein Extraction Kit, KTP3003) 是一套专为哺乳动物细胞或组织设计的快速、非变性胞浆蛋白分离系统，可在2小时内获得高纯度、具有活性的胞浆蛋白，为下游细胞器功能研究、蛋白互作及信号通路分析提供可靠起始材料。

胞浆蛋白是细胞代谢、信号转导与蛋白互作网络的核心参与者。传统裂解方法常因细胞核或线粒体破裂导致交叉污染，影响实验准确性。本试剂盒通过温和的细胞浆蛋白溶液A (CES A) 与增强剂CES B 协同作用，在低温条件下选择性裂解细胞膜，保留细胞器完整；同时加入500× DTT 与100× 蛋白酶抑制剂，防止蛋白氧化与降解。提取的胞浆蛋白可直接用于Western Blot、免疫共沉淀 (IP)、酶活测定等实验，为细胞器提取与染色研究提供高保真样本。

应用领域：细胞器提取与染色、细胞质蛋白功能研究、信号转导通路分析、蛋白-蛋白相互作用检测。

产品参数

中文名称	胞浆蛋白提取试剂盒-ExKine™
英文名称	ExKine™ Cytoplasmic Protein Extraction Kit
产品货号	KTP3003
试剂盒组分	• 细胞浆蛋白溶液A (CES A) • 细胞浆蛋白溶液B (CES B) • DTT (500X) • 蛋白酶抑制剂 (100X)
注意事项	所有实验步骤请在2-8°C下执行。使用预冷的缓冲液和设备，并确保所有溶液都是解冻和均匀的。
保存建议	-20℃保存 12 个月
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

Cytoplasmic Solution B (CESB)：即用型；使用前，置于冰上；4℃保存。

DTT (500×)：即用型；使用前，置于冰上；–20℃保存。用不完的试剂分装保存，避免反复冻融。

Protease Inhibitor (100×)：即用型；使用前，置于冰上；–20℃保存。用不完的试剂分装保存，避免反复冻融。

实验步骤

注意：所有的实验步骤需在 2-8℃进行。使用预冷的缓冲液和设备。确保所有的溶液是解冻和均匀的。

I 细胞培养物的制备

对于贴壁细胞，用细胞刮刀收获 10⁶ 个细胞，然后 500 g 离心 5 min。对于悬浮细胞，500 g 离心 5 min。
用预冷的 PBS 重悬细胞沉淀，500 g 离心 2-3 min，弃上清。
注意：使用移液器小心吸取上清，使细胞沉淀尽可能干燥。
向细胞沉淀中加入 200 µL 预冷的 Working CESA 后，继续步骤 III。

II 组织制备

将 30-60 mg 组织切成小块，放入离心管中。
用预冷的 PBS 清洗组织，500 g 离心 5 min，弃上清。
注意：使用移液器小心吸取上清，使细胞组织尽可能干燥。
用 200 µL 预冷的 Working CESA 重悬组织。
使用匀浆器或组织研磨机匀浆组织，直至超过 90％的细胞被破坏，细胞核在显微镜下可见，继续步骤 III。

III 胞浆蛋白提取

用涡旋仪（最高设置）剧烈涡旋样本管 15 s，使细胞完全悬浮。离心管在冰上孵育 15 min，使细胞膨胀。
800 g，4℃离心 5 min，立即将上清转移到干净的离心管。
加入 10 µL 冰冷的 CESB 到离心管中，置于冰上，每 10 min 涡旋 15 s，持续 30 min。避免泡沫形成。
16,000 g，4℃离心 15 min。
分装上清液（胞浆蛋白）到预冷的离心管，取出一小份用于蛋白定量检测。将其它装有胞浆蛋白的离心管保存在 -80℃。避免反复冻融。

注意事项

问题	可能的原因	解决办法
胞浆蛋白浓度低	裂解或提取缓冲液的体积和细胞数量不匹配	进行细胞计数，并使用合适体积的缓冲液
细胞未裂解	-	充分涡旋
组织使用 PBS 匀浆	-	用 Working CESA 匀浆组织
蛋白分离不完全	细胞裂解不充分	增加涡旋时间，以充分分散细胞沉淀
-	-	增加 CESB 用量