人促甲状腺激素 ELISA定量试剂盒-EliKine™

Name: 人促甲状腺激素 ELISA定量试剂盒-EliKine™
Brand: Abbkine
SKU: KTE6905
Price: 1598 CNY
Availability: InStock

EliKine™ Human TSH ELISA Kit

产品货号

KTE6905

产品特点：

采用经典夹心法，提供0.3–12 mIU/L的线性检测范围，灵敏度低至0.1 mIU/L，满足临床及科研对低浓度TSH的精确定量需求。

经严格交叉反应验证，对LH、FSH、HCG等糖蛋白激素无显著交叉反应，确保结果高特异性。

试剂盒组分完整，包含预包被板、梯度标准品、检测抗体、HRP底物及终止液，实验流程标准化，2.5小时内即可完成检测。

兼容血清、血浆（EDTA/肝素/柠檬酸钠抗凝）及细胞培养上清等样本类型，适配常规实验室高通量需求。

选择规格

48 T

¥1598

期货（4天内发货）

96 T

¥2558

期货（4天内发货）

🎉 限时优惠

买2送1活动进行中！购买任意2个规格产品，免费赠送100μL装一支。

活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

EliKine™ 人促甲状腺激素 ELISA定量试剂盒（EliKine™ Human TSH ELISA Kit, 货号 KTE6905）是一款基于双抗体夹心法的固相酶联免疫吸附检测系统，专为定量测定人血清、血浆及其他生物液体中促甲状腺激素（TSH）浓度而设计。该试剂盒通过预包被高亲和力抗人TSH单克隆抗体的96孔微孔板，实现对TSH分子的特异性捕获，配合HRP标记检测抗体及TMB显色体系，可在常规酶标仪450 nm波长下完成精准读数。

促甲状腺激素（TSH）由腺垂体前叶嗜碱性细胞合成并分泌，是调控甲状腺功能的核心糖蛋白激素，分子量约28 kDa，由α链（与LH、FSH、HCG共用）及独特的β链构成。TSH通过激活甲状腺滤泡上皮细胞TSH受体，级联刺激碘摄取、甲状腺球蛋白碘化及T3/T4合成与释放，其血清水平受下丘脑-垂体-甲状腺轴负反馈精密调节。临床上，TSH检测是原发性甲减、甲亢、亚临床甲状腺疾病及新生儿先天性甲减筛查的首选指标。

应用领域

本试剂盒适用于内分泌疾病机制研究、甲状腺功能障碍临床诊断辅助、药物干预疗效评估及流行病学调查中大规模人群TSH水平筛查，亦可用于细胞模型中TSH信号通路调控的体外分析。

产品参数

中文名称	人促甲状腺激素 ELISA定量试剂盒-EliKine™
英文名称	EliKine™ Human TSH ELISA Kit
产品货号	KTE6905
反应性	人
检测类型	ELISA
检测方法	夹心法
样本类型	血清#血浆#其它生物液体
试剂盒组分	• 人TSH 抗体预包被微孔板 • 人TSH 标准品 • 人TSH检测抗体 • HRP底物A • HRP底物B • 反应终止液 • 洗涤缓冲液 • 封板膜.
检测范围	0.3 mIU/L-12 mIU/L
灵敏度	0.1 mIU/L
基因ID	1081
蛋白质ID	P01215
蛋白序列链接	http://www.uniprot.org/uniprot/P01215
检测指标	TSH
注意事项	• 试剂盒的试剂不能与其它批号的试剂或超出有效期的试剂混合使用。 • 试剂应按瓶上标签说明储存，使用前室温平衡30 分钟。 • 实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。 • 实验中未用的板条立即放回包装中，密闭封口，4℃保存。 • 充分混匀对反应结果尤为重要，推荐使用低速频率振荡器或者每10分钟手动摇匀。 • 对于样品和标准品，建议做双孔或者三孔检测（复孔）。.
保存建议	请将未开封使用的试剂盒保存于2-8℃；启用后的试剂盒，请参考说明书保存各个组分。
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

自备耗材

酶标仪（能测 450 nm 处的吸光度）
多通道移液器或自动洗板机
恒温箱、低温离心机
可调节式移液枪及枪头
去离子水

酶标仪（能测 450 nm 处的吸光度）

多通道移液器或自动洗板机

恒温箱、低温离心机

可调节式移液枪及枪头

去离子水

试剂准备

注意：提前 20 min 从冰箱中取出试剂盒，平衡至室温。如果浓缩试剂有结晶析出，轻轻加热直至完全溶解。

1×Wash Buffer:用去离子水 1：20 稀释 Wash Buffer(20×)得到 1×Wash Buffer，4℃保存。

样本制备

1. 血清

使用血清分离管，让样品在室温下凝结 30 min，然后 1,000 g 离心 15 min。取上层血清立即测定或分装-20℃保存，避免反复冻融。

2. 血浆

使用 EDTA、肝素或柠檬酸盐作为抗凝剂收集血浆。在收集后 30 min 内 1,000 g 离心 15 min。立即测定或分装-20℃保存，避免反复冻融。

注意：不要使用严重溶血或脂血的标本。样品应分装-20℃保存，避免人 TSH 失活。如果样品要在 24 h 内使用，则可以将其储存在 2 至 8℃。避免反复冻融。测定前，应将冷冻样品缓慢升至室温并轻轻混合。

实验步骤

从板框上取下多余的板条，将它们放回装有干燥剂包的铝箔袋中，然后重新密封。
每孔加入 100 μL Human TSH Standard 或样品。建议所有标准品和样品做复孔。设置一个不加任何溶液空白孔。
每孔加入 50 μL HRP Conjugated Human TSH Detect Antibody（空白孔不加）。混匀，给酶标板覆膜，37℃孵育 2 h。
除去每孔中的液体并洗涤，重复该过程总共洗涤三次。使用多通道移液器或自动清洗机每孔加入 250 μL 1×Wash Buffer 进行洗涤，然后静置 10 s。完全去除液体对于获得良好性能至关重要。最后一次洗涤后，倒置酶标板并用干净的纸巾吸干以除去任何剩余的 1×Wash buffer。
每孔加入 50 μL HRP Substrate A 和 50 μL HRP Substrate B，混匀，给酶标板覆膜，37℃避光孵育 15min，远离气流和其他温度波动。
每孔加入 50 μL Stop Solution，Stop Solution 应按照与 HRP Substrate 相同的顺序加到板中。孔中的颜色应从蓝色变为黄色。如果孔中的颜色为绿色或颜色变化不均匀，请轻轻敲击板以确保彻底混合。
30 min 内测定每孔 450 nm 处的吸光值（OD）。

从板框上取下多余的板条，将它们放回装有干燥剂包的铝箔袋中，然后重新密封。

每孔加入 100 μL Human TSH Standard 或样品。建议所有标准品和样品做复孔。设置一个不加任何溶液空白孔。

每孔加入 50 μL HRP Conjugated Human TSH Detect Antibody（空白孔不加）。混匀，给酶标板覆膜，37℃孵育 2 h。

除去每孔中的液体并洗涤，重复该过程总共洗涤三次。使用多通道移液器或自动清洗机每孔加入 250 μL 1×Wash Buffer 进行洗涤，然后静置 10 s。完全去除液体对于获得良好性能至关重要。最后一次洗涤后，倒置酶标板并用干净的纸巾吸干以除去任何剩余的 1×Wash buffer。

每孔加入 50 μL HRP Substrate A 和 50 μL HRP Substrate B，混匀，给酶标板覆膜，37℃避光孵育 15min，远离气流和其他温度波动。

每孔加入 50 μL Stop Solution，Stop Solution 应按照与 HRP Substrate 相同的顺序加到板中。孔中的颜色应从蓝色变为黄色。如果孔中的颜色为绿色或颜色变化不均匀，请轻轻敲击板以确保彻底混合。

30 min 内测定每孔 450 nm 处的吸光值（OD）。

结果计算

计算每个标准品和样品的复孔平均 OD 值并减去 0 浓度标准品（Std1）平均 OD 值。
标准曲线的绘制：以标准溶液浓度为 x 轴，各标准品的平均 OD 值为 y 轴，绘制标准曲线。可以使用计算机软件来创建标准曲线。

计算每个标准品和样品的复孔平均 OD 值并减去 0 浓度标准品（Std1）平均 OD 值。

标准曲线的绘制：以标准溶液浓度为 x 轴，各标准品的平均 OD 值为 y 轴，绘制标准曲线。可以使用计算机软件来创建标准曲线。

常见问题

Q: 普通大分子蛋白ELISA检测的原理是什么？

A: 双抗体夹心法是检测大分子抗原最常用的方法。双抗夹心法ELISA是将特异性抗体结合到固相载体上形成固相抗体，然后和待检样本中的相应抗原结合形成免疫复合物，洗涤后再加酶标记抗体，与免疫复合物中抗原结合形成酶标抗体— 抗原—固相抗体复合物，加底物显色，判断抗原含量；

Q: 试剂盒检测一个样品孔，一般用多少样本量？

A: 稀释好的液体样本100 μL，细胞样本1-2×106个cells，组织样本1 g左右。

Q: 为什么我们的ELISA试剂盒的最大吸收波长是450nm？

A: 因为TMB显色染料经过硫酸终止之后在450nm处有最大吸收峰，所以用酶标仪检测450nm处的OD值。

Q: 开封之后，未用完的ELISA酶标板的保存方法和保存时间？

A: 开封的酶标板应密封后在-20度保存，能保存一个月。

Q: ELISA实验制作标曲，X轴和Y轴弄反了，是否对结果有影响？

A: 无影响，只是计算的时候需注意，样本的OD值应代入计算式的X值中。

Q: 样本前处理：血加在抗凝管里后,离心出来的是血清还是血浆？

A: 血浆。

Q: 该系列试剂盒能否满足客户间断性采样的要求？

A: 可以满足，连续取的样本如果1周内检测，需保存于4℃；如1个月内检测，按一次使用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融；如6个月内检测，分装保存于-80℃，避免反复冻融。

Q: ELISA试验的标准曲线和测定的重复性差，这是由什么原因造成的？

A: 1. 加样本及试剂量不准，孔间不一致----重复测定时保持与上次操作条件一致； 2. 加样过快，孔间发生污染----加样不能过快； 3. 加样本及试剂时，加在孔壁上部非包被区----加样时枪头不要贴壁； 4. 不同批号试剂盒中组分混用----不同批号试剂盒中组分不可混用； 5. 温育时间、洗板、显色时间不一致----操作时间保持一致； 6. 试剂/样品没有混匀----充分混匀样品和试剂。

Q: 该类试剂盒的指标如何查找？

A: 建议在Abbkine官网搜索“KET”，客户可以了解到相关指标。如有疑问，请联系support@abbkine.com进行详细咨询。

Q: 该类试剂盒的标准品稀释液中偶见沉淀，应如何处理？

A: 为了避免基质效应，ELISA 试剂盒针对不同的样本都会配备不同的稀释液。一些稀释液，特别是血清稀释液的配方中，会含有一些动物蛋白成分（比如 BSA）和溶解度较低的盐。这些成分在低温或是稀释液微量蒸发的情况下，会出现结晶或浑浊的现象。在试剂盒开发的过程中，我们研发人员开展的大量验证实验表明，稀释液的沉淀不会影响试剂的使用性能。

文献引用

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