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土壤荧光素二乙酸酯水解酶(S-FDA)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™

CheKine™ Micro Soil-Fluorescein Diacetate (S-FDA) Hydrolase Activity Assay Kit

产品货号
KTB4049

产品特点:

  • 验证样本类型齐全:专为土壤样本设计,适配多种土壤类型(农田、林地、湿地等)。
  • 微量体系,操作简便:仅需常规比色板即可完成高通量检测,实验流程≤60 min。
  • 组分完整:包含 Reagent I、Reagent Ⅱ 及标准品,开盒即可实验,无需额外配制。
  • 结果稳定:荧光素产物在反应体系中稳定,490 nm 信号不易衰减,重复性好。
  • 选择规格

    48 T/48 S
    ¥526
    现货(次日发货)
    96 T/96 S
    ¥939
    现货(次日发货)
    🎉 限时优惠

    买2送1活动进行中!购买任意2个规格产品,免费赠送100μL装一支。

    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    CheKine™ 土壤荧光素二乙酸酯水解酶(S-FDA)活性检测试剂盒(微量法)是一款基于比色法原理设计的微量检测工具,可在 490 nm 处通过荧光素生成量快速、定量地评估土壤样本中 S-FDA 水解酶活性,为土壤微生物活性与质量变化提供可靠数据。

    背景原理

    荧光素二乙酸酯(FDA)是一种无色、非荧光的酯类底物,能被土壤中多种水解酶(酯酶、脂肪酶等)催化裂解,释放出具有强烈荧光的荧光素。荧光素在 490 nm 处具有稳定且显著的吸收峰,其生成量与酶活性成正比。FDA 水解反应已被广泛证实可灵敏反映土壤微生物活性、有机质转化速率及生态系统健康状况,是土壤质量评价的重要生物学指标之一。CheKine™ 试剂盒通过微量体系优化,仅需少量土壤悬液即可完成检测,显著降低样本消耗并提高通量。

    应用领域

    本试剂盒适用于土壤微生物活性监测土壤质量评估生态系统有机质转化研究农业可持续管理等场景,可为科研院校、环境监测机构及农业技术推广部门提供精准的土壤生物学数据支持。

    土壤荧光素二乙酸酯水解酶(S-FDA)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™

    产品参数

    中文名称 土壤荧光素二乙酸酯水解酶(S-FDA)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
    英文名称 CheKine™ Micro Soil-Fluorescein Diacetate (S-FDA) Hydrolase Activity Assay Kit
    产品货号 KTB4049
    检测类型 水土检测
    检测方法 比色法
    样本类型 土壤样本
    试剂盒组分 • Reagent I
    •Reagent Ⅱ
    •Standard
    分子 土壤荧光素二乙酸酯水解酶(S-FDA)
    检测指标 土壤荧光素二乙酸酯水解酶(S-FDA)
    注意事项 •推荐使用新鲜样本,如果不立即进行实验,样本可在-80℃保存数周。测定时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在4 h内完成样品解冻。
    •实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。
    保存建议 4℃,避光保存 6 个月
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    注意:正式检测前,建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

    自备耗材

    • 酶标仪或可见光分光光度计(能测 490 nm处的吸光度)
    • 96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头、1.5 mL离心管
    • 震荡仪、离心机、30-50目筛
    • 去离子水、无水乙醇、丙酮

    试剂准备

    Reagent I:即用型;使用前,平衡到室温。4℃保存。

    Working Reagent II:临用前配制;每瓶加入 2.5 mL丙酮,充分溶解。用不完的试剂-20℃避光分装保存 1周,避免反复冻融。

    Standard:临用前配制;每瓶加入 3 mL无水乙醇,充分溶解,即 10 μmol/mL荧光素标准品;用不完的试剂-20℃避光分装保存 2周,避免反复冻融。

    0.1 μmol/mL荧光素 Standard:10 µL 10 μmol/mL荧光素标准品用 990 µL无水乙醇稀释;使用 0.1 μmol/mL荧光素标准品,进行后续检测。

    注意:每次实验都要做一次标准品检测;稀释后的标准品溶液不稳定,必须在 4小时内使用。

    注意:Reagent II 和 Standard有一定的刺激性,建议在使用过程中做好个人防护。

    样本制备

    注意:推荐使用新鲜土壤样本。

    新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干,过 30-50目筛。

    实验步骤

    1. 酶标仪或可见光分光光度计预热 30 min以上,调节波长到 490 nm,可见光分光光度计用去离子水调零。
    2. 操作表(下述操作在 1.5 mL离心管中操作):
    试剂测定管对照管标准管空白管
    样本(g)0.050.0500
    Standard(μL)00400
    去离子水(μL)00040
    ReagentⅠ(μL)200240200200
    Reagent II(μL)40000

    混匀,30℃震荡 1 h。

    丙酮(μL) 160 160 160 160

    3. 混匀,10,000 g,室温离心 5 min,取 200 μL至 96孔板或微量玻璃比色皿中,记录 490 nm处吸光值。空白孔记为 A 空白,标准孔记为 A 标准,对照孔记为 A 对照,测定孔记为 A 测定。计算ΔA 测定=A 测定-A 对照,ΔA 标准=A 标准-A 空白。

    注意:空白孔和标准孔只需做 1-2次,每个测定孔均需设置一个对照孔。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测定小于 0.01可适当加大样本量。如果ΔA 测定大于 1.2,减少样本量。

    结果计算

    注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

    S-FDA水解酶活性的计算:

    酶活单位定义:每克土壤每天产生 1 μmol荧光素的量定义为一个酶活力单位。

    S-FDA水解酶(U/g 土样)=C 标准×ΔA 测定÷ΔA 标准×V 反总÷W÷T=0.96×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W
    C 标准:Standard浓度,0.1 μmol/mL;V 反总:酶促反应体积,0.4 mL;T:反应时间,1 h=1/24 d;W:样本质量,g

    常见问题

    Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多?

    A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。

    Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证?

    A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该产品线检测可使用分光光度计替代酶标仪吗?

    A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。

    Q: 该类试剂盒使用量应如何计算?

    A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该系列试剂盒可以检测蓝藻等微生物样本吗?

    A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    文献引用

    请等待最新文献信息更新。

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