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活动截止时间：2024年1月31日
CheKine™ 土壤α-葡萄糖苷酶（S-α-GC）活性检测试剂盒（微量法）是一款专为土壤样本设计的微量酶活测定工具，可在常规实验室条件下快速评估土壤中α-葡萄糖苷酶（S-α-GC）的催化活力，为研究土壤碳循环、微生物代谢活性及土壤健康提供量化依据。
土壤α-葡萄糖苷酶（S-α-GC）是纤维素分解酶系的关键成员，可水解芳基或烃基与糖基之间的糖苷键，释放葡萄糖，从而参与土壤微生物对多糖的分解与能量获取。CheKine™ 土壤α-葡萄糖苷酶（S-α-GC）活性检测试剂盒（微量法）利用对-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷（pNPG）为底物：S-α-GC 催化底物裂解生成对-硝基苯酚（pNP），pNP 在 400 nm 处具有特征吸收峰，其吸光度变化与酶活性成正比。通过微量反应体系，可在 96 孔板中完成高通量检测，操作简便，结果稳定。
广泛应用于土壤学、环境科学及农业生态研究，可用于：
| 中文名称 | 土壤α-葡萄糖苷酶(S-α-GC)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Soil α-glucosidase (S-α-GC) Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB4019 |
| 检测类型 | 水土检测 |
| 样本类型 | 土壤样本 |
| 试剂盒组分 | • Reagent I •Reagent Ⅱ •Reagent Ⅲ •Standard |
| 分子 | 土壤α-葡萄糖苷酶（S-α-GC） |
| 检测指标 | 土壤α-葡萄糖苷酶（S-α-GC） |
| 注意事项 | •推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存数周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | -20℃，避光保存 6 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
注意：正式检测前，建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。
Reagent I：临用前配制；加入 10 mL去离子水，充分溶解备用；用不完的试剂 20℃分装避光保存一个月，禁止反复冻融。
Reagent II：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
Reagent III：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
Standard：5 mM对硝基苯酚标准液，即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
注意：Standard有毒，建议在通风橱进行实验。
使用 5 mM对硝基苯酚标准液，按照下表所示，进一步稀释成标准品：
| 序号 | Standard体积 | 去离子水体积（µL） | 浓度（μM） |
|---|---|---|---|
| Std.1 | 20 µL 5 mM Standard | 980 | 100 |
| Std.2 | 500 µL of Std.1 (100 μM) | 500 | 50 |
| Std.3 | 500 µL of Std.2 (50 μM) | 500 | 25 |
| Std.4 | 500 µL of Std.3 (25 μM) | 500 | 12.5 |
| Std.5 | 500 µL of Std.4 (12.5 μM) | 500 | 6.25 |
| Std.6 | 500 µL of Std.5 (6.25 μM) | 500 | 3.125 |
| Std.7 | 500 µL of Std.6 (3.125 μM) | 500 | 1.563 |
| Blank | 0 | 500 | 0（空白管） |
注意：每次实验都要做一次标准品检测，制作标曲；稀释后的标准品溶液不稳定，必须在 4小时内使用。
注意：推荐使用新鲜样本
新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干，过 30-50目筛。
| 试剂 | 测定管（μL） | 对照管（μL） | 标准管（μL） |
|---|---|---|---|
| 风干土样（g） | 0.02 | 0.02 | 0 |
| 甲苯 | 10 | 10 | 0 |
| 室温振荡混匀 | 15 min | 90℃振荡混匀 | 15 min |
| ReagentⅠ | 130 | 0 | 0 |
| 去离子水 | 0 | 130 | 0 |
| ReagentⅡ | 160 | 160 | 0 |
混匀，37℃振荡反应 1 h后，90℃水浴 5 min（盖紧，防止水分散失），流水冷却，10,000 g，25℃离心 10 min，取上清液（在 1.5 mL EP管中加入下列试剂）
| 试剂 | 测定管（μL） | 对照管（μL） | 标准管（μL） |
|---|---|---|---|
| 上清液 | 84 | 84 | 0 |
| Standard | 0 | 0 | 84 |
| Reagent III | 156 | 156 | 156 |
充分混匀，10,000 g，25℃离心 5 min后，取 200 μL转移至 96孔板或微量玻璃比色皿中，于 400 nm处测定吸光值，分别记为 A 测定、A 对照、A 标准和 A 空白，计算ΔA 测定=A 测定-A 对照、ΔA 标准=A 标准-A 空白。
注意：标准曲线只需测定 1次，每个测定孔都需设置一个对照孔。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验，如果ΔA 测定小于 0.005，可适当增大样本量，同步修改计算公式；如果ΔA 测定大于 0.3，样本上清液可用去离子水进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数。
注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
以标准溶液浓度为 x轴，ΔA 标准为 y轴，绘制标准曲线，得到标准方程，将ΔA 测定带入方程得到 x (μM)。
单位的定义：每天每 g土样中产生 1 μmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-α-GC (U/g 土样)=x×V 反总÷W÷T=0.0072×x÷W
T：反应时间，1 h=1/24 d；V 反总：反应体系总体积：3×10-4 L；W：样本质量，0.02 g
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
请等待最新文献信息更新。
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