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活动截止时间：2024年1月31日
亚科因生物研发的CheKine™ 甜菜碱含量检测试剂盒（微量法） (CheKine™ Micro Betaine Content Detection Kit) 是一种基于雷氏盐沉淀-丙酮溶解显色的比色法试剂盒，可在 525 nm 处快速、微量地测定动植物组织等生物样本中的甜菜碱含量。
甜菜碱（Betaine）是一种广泛存在于动植物及微生物体内的季铵型水溶性生物碱，是胆碱氧化后的主要代谢产物。它既是重要的甲基供体，参与蛋白质和脂肪代谢，又具有抗氧化、降血脂、免疫调节等多重生理活性，在医药、食品、饲料添加剂及化工领域均有广泛应用。
CheKine™ 甜菜碱含量检测试剂盒（微量法）利用甜菜碱在强酸条件下与雷氏盐（Reinecke salt）形成沉淀，沉淀经丙酮溶解后生成稳定的红色络合物，该络合物在 525 nm 处具有特征吸收峰。通过测定 525 nm 的吸光度变化，即可定量计算样本中的甜菜碱含量。
本试剂盒主要用于细胞代谢研究，可广泛应用于：
| 中文名称 | 甜菜碱含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Betaine Content Detection Kit |
| 产品货号 | KTB2350 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | •Extraction Buffer •Reagent I •Standard |
| 分子 | 甜菜碱 |
| 检测指标 | 甜菜碱 |
| 注意事项 | •推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存数周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 4℃，避光保存 6 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
Extraction Buffer：即用型；使用前，平衡到室温。4℃保存。
Working Reagent I：临用前配制；每瓶加 15 mL去离子水，用浓盐酸调 pH为 1，搅拌 30 min溶解，过滤后用去离子水定容至 20 mL。现用现配。
Reagent II：99%乙醚，取无水乙醚 59.4 mL，加入去离子水 0.6 mL，混匀。（自备）
Reagent III：70%丙酮，取丙酮 42 mL，加入去离子水 18 mL，混匀。（自备）
Standard：临用前配制；加入 1 mL去离子水将标准品充分溶解得 10 mg/mL的甜菜碱溶液。4℃避光保存 1个月。
使用 10 mg/mL的甜菜碱标准品，按照下表所示，进一步稀释成标准品：
| 序号 | Standard体积（μL） | 去离子水体积（μL） | 浓度（mg/mL） |
|---|---|---|---|
| Std.1 | 45 μL | 455 | 0.9 |
| Std.2 | 40 μL | 460 | 0.8 |
| Std.3 | 35 μL | 465 | 0.7 |
| Std.4 | 30 μL | 470 | 0.6 |
| Std.5 | 25 μL | 475 | 0.5 |
| Std.6 | 20 μL | 480 | 0.4 |
| Std.7 | 15 μL | 485 | 0.3 |
| Std.8 | 10 μL | 490 | 0.2 |
组织：取烘干后过 40目筛的样品约 0.02 g，加 0.8 mL去离子水，置于 60℃提取 30 min，期间不断震荡。再加入 200 µL Extraction Buffer，混匀后 10,000 g，25℃，离心 10 min，取上清液待测。
1. 酶标仪或可见光分光光度计预热 30 min以上，调节波长到 525 nm，可见光分光光度计用去离子水调零。
2. 操作表（下述操作在 1.5 mL离心管中操作）：
| 试剂 | 空白孔（μL） | 标准孔（μL） | 测定孔（μL） |
|---|---|---|---|
| 样本 | 0 | 0 | 300 |
| Standard | 0 | 300 | 0 |
| 去离子水 | 300 | 0 | 0 |
| Working ReagentⅠ | 300 | 300 | 300 |
混匀，4℃反应 2 h，14,000 g，25℃，离心 10 min，弃上清
| 试剂 | 空白孔（μL） | 标准孔（μL） | 测定孔（μL） |
|---|---|---|---|
| Reagent II | 500 | 500 | 500 |
混匀，14,000 g，25℃，离心 10 min，弃上清。置于通风橱使残余乙醚自然挥发干净
| 试剂 | 空白孔（μL） | 标准孔（μL） | 测定孔（μL） |
|---|---|---|---|
| Reagent III | 300 | 300 | 300 |
3. 震荡使沉淀充分溶解，取 200 µL于 96孔板或微量玻璃比色皿，记录 525 nm处吸光值，空白孔记为 A 空白，标准孔记为 A 标准，测定孔记为 A 测定。计算ΔA 测定=A 测定-A 空白，ΔA 标准=A 标准-A 空白。
1. 标准曲线的绘制
以标准溶液浓度为 x轴，ΔA 标准为 y轴，绘制标准曲线，得到标准方程，将ΔA 测定带入方程得到 x (mg/mL)。
2. 甜菜碱含量的计算
按样本干重计算：
甜菜碱(mg/g 干重)=x×V 标准÷(V 样÷V 样总×W)=x÷W
V 标准：标准品体积，0.3 mL；V 样：反应中样本体积，0.3 mL；V 样总：加入 Extraction Buffer体积，1 mL；W：样本质量，g。
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
请等待最新文献信息更新。
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