买2送1活动进行中！购买任意2个规格产品，免费赠送100μL装一支。
活动截止时间：2024年1月31日
CheKine™ 尿素氮含量检测试剂盒（微量法）是一款基于二乙酰一肟显色反应的比色法试剂盒，可在微量体系内对动植物组织、细胞、血清（浆）或其他液体样本中的尿素氮进行快速、稳定的定量检测。
背景延伸：尿素是蛋白质与核酸等含氮化合物在肝脏代谢后的终末产物，经血液循环至肾脏后随尿液排出。血液或培养液中的尿素氮（BUN）水平常被用作肾功能、氮代谢效率及细胞代谢状态的重要指标。本试剂盒利用尿素在强酸及高铁离子存在下与二乙酰一肟、硫胺脲共热，生成红色二嗪化合物，其 520–540 nm 处的吸光度与尿素氮浓度成正比，从而实现定量。
应用领域：细胞代谢研究、药物肾毒性评价、植物逆境生理、发酵过程监控、基础生物化学教学实验等。
| 中文名称 | 尿素氮含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Urea Nitrogen Content Detection Kit |
| 产品货号 | KTB1511 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 样本类型 | 动植物组织、细胞、血清（浆）或其他液体 |
| 试剂盒组分 | •Reagent I •Reagent Ⅱ •Standard |
| 分子 | 尿素氮 |
| 检测指标 | 尿素氮 |
| 注意事项 | •推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存数周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 4℃，避光保存 6 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
Reagent I：即用型；使用前，平衡到室温。4℃避光保存。
Reagent II：即用型；使用前，平衡到室温。4℃避光保存。
Standard：1 mg/mL尿素氮标准溶液，4℃保存。
1 mg/mL尿素氮标准溶液，按照下表所示，进一步稀释成标准品：
| 试剂盒组分 | 规格（96 T） | 储存条件 |
|---|---|---|
| Reagent I | 7 mL | 4℃，避光保存 |
| Reagent II | 70 mL | 4℃，避光保存 |
| Standard | 1 mL | 4℃ |
组织：称取约 0.1 g样本，加入 1 mL去离子水，冰浴匀浆，10,000 g，4℃离心 10 min，取上清液置于冰上待测。
细胞：收集 500万细胞到离心管内，用冷 PBS清洗细胞，离心后弃上清，加入 1 mL去离子水，冰浴超声波破碎细胞 3 min（功率 300 W，超声 3 s，间隔 7 s，总时间 3 min），然后 10,000 g，4℃离心 10 min，取上清液置于冰上待测。
血清（浆）等液体样本：直接测定。若溶液有浑浊则离心后取上清进行测定。
酶标仪或可见分光光度计预热 30 min，调节波长到 540 nm。可见分光光度计用去离子水调零。
操作表（下述操作在 1.5 mL EP管中进行）：
| 试剂 | 空白管（μL） | 测定管（μL） | 标准管（μL） |
|---|---|---|---|
| 样本上清 | 0 | 20 | 0 |
| Standard | 0 | 0 | 20 |
| 去离子水 | 20 | 0 | 0 |
| Reagent I | 50 | 50 | 50 |
| Reagent II | 500 | 500 | 500 |
混匀，沸水浴 10 min，冷却后，吸取 200 μL转移至 96孔板中，于 540 nm下测定吸光值，分别记为 A 空白、A 测定和 A 标准，计算ΔA 测定=A 测定-A 空白、ΔA 标准=A 标准-A 空白。
标准品稀释表：
| 序号 | Standard体积 | 去离子水体积（µL） | 浓度（μg/mL） |
|---|---|---|---|
| Std.1 | 50 µL 1 mg/mL Standard | 350 | 125 |
| Std.2 | 200 µL of Std.1 (125 μg/mL) | 200 | 62.5 |
| Std.3 | 200 µL of Std.2 (62.5 μg/mL) | 200 | 31.25 |
| Std.4 | 200 µL of Std.3 (31.25 μg/mL) | 200 | 15.63 |
| Std.5 | 200 µL of Std.4 (15.63 μg/mL) | 200 | 7.81 |
| Std.6 | 200 µL of Std.5 (7.81 μg/mL) | 200 | 3.9 |
| Std.7 | 200 µL of Std.6 (3.9 μg/mL) | 200 | 1.95 |
| Blank | 0 | 200 | 0 |
标准曲线的绘制：以标准溶液浓度为 x轴，ΔA 标准为 y轴，绘制标准曲线，得到标准方程，将ΔA 测定带入方程得到 x (μg/mL)。
尿素氮含量的计算：
按样本蛋白浓度计算：
尿素氮含量 (μg/mg prot)=x×V 样总÷Cpr=x÷Cpr
按样本鲜重计算：
尿素氮含量 (μg/g 鲜重)=x×V 样总÷W=x÷W
按细胞数量计算：
尿素氮含量 (μg/104 cell)=x×V 样总÷N=x÷N
按样本体积计算：
尿素氮含量 (μg/mL)=x
V 样总：加入去离子水体积，1 mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；N：细胞数量，万。
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
请等待最新文献信息更新。
货号：KTB1270
亚科因生物研发的CheKine™ 丙酮酸脱氢酶（PDH）活性检测试剂盒（微量法）是一款基于比色法的微量检测工具，可快速、便捷地...
货号：KTB1250
CheKine™ 线粒体异柠檬酸脱氢酶（ICDHm）活性检测试剂盒（微量法）是一款专为细胞代谢研究设计的微量比色法试剂盒，可在三...
货号：KTB1240
亚科因生物研发的 CheKine™ α-酮戊二酸脱氢酶（α-KGDH）活性检测试剂盒（微量法）是一款专为细胞代谢研究设计的比色法试...
货号：KTB1230
CheKine™ 琥珀酸脱氢酶（SDH）活性检测试剂盒（微量法）是一款专为微量样本设计的比色法试剂盒，可快速测定细胞、动物/植物...
货号：KTB1023
亚科因生物研发的CheKine™ 柠檬酸合酶（CS）活性检测试剂盒（微量法）是一款基于比色法的微量酶活检测工具，可快速、灵敏地...
我们的技术团队为您提供全方位的产品支持服务
根据您的研究目标，提供个性化的实验设计方案
经验丰富的技术专家协助您解决实验中遇到的问题
7x24小时在线技术支持，随时为您答疑解惑
提供免费样品试用，让您先试后买更放心
