赖氨酸(LYS)含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™

Name: 赖氨酸(LYS)含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™
Brand: Abbkine
SKU: KTB1470
Price: 958 CNY
Availability: InStock

CheKine™ Micro Lysine (LYS) Assay Kit

产品货号

KTB1470

产品特点：

微量法设计，仅需 10–20 µL 样本即可完成检测，节约珍贵细胞或组织材料。

提供全套组分（Extraction Buffer、Assay Buffer、Substrate、Substrate Cofactor 及标准品），并附详细样品制备与标准曲线绘制指南。

兼容血清、细胞上清、动植物组织匀浆及细菌裂解液等多种样本类型，满足多场景实验需求。

显色反应稳定，30 min 内即可完成读数，适配常规酶标仪。

选择规格

96 T/96 S

¥958

现货（次日发货）

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活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

亚科因生物研发的CheKine™ 赖氨酸（LYS）含量检测试剂盒（微量法） (CheKine™ Micro Lysine (LYS) Assay Kit) 是一种基于比色法的微量检测工具，可在 96 孔板中快速、准确地定量血清（浆）、动植物组织、细胞、细胞上清及细菌等生物样本中的游离赖氨酸含量。

赖氨酸是人体必需氨基酸之一，属于碱性氨基酸，在蛋白质合成、胶原蛋白交联、能量代谢及免疫调节中扮演关键角色。由于谷物加工过程中赖氨酸易被破坏，其常被称为“第一限制性氨基酸”。本试剂盒利用赖氨酸在特定酶促反应中生成显色产物的原理，通过 570 nm 处吸光度的变化实现定量，检测范围 0.125–8 μmol/mL，灵敏度可达 0.03125 μmol/mL，为细胞氨基酸代谢研究提供可靠数据。

应用领域

本试剂盒适用于细胞代谢研究、氨基酸营养评估、发酵过程监控及药物对赖氨酸代谢通路影响分析等方向，特别适合体外培养的哺乳动物细胞、原代细胞及微生物模型中赖氨酸水平的动态监测。

产品参数

中文名称	赖氨酸(LYS)含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™
英文名称	CheKine™ Micro Lysine (LYS) Assay Kit
产品货号	KTB1470
检测类型	氨基酸代谢
检测方法	比色法
试剂盒组分	• Extraction Buffer • Assay Buffer • Substrate • Substrate Cofactor • Standard
检测范围	0.125-8 μmol/mL
灵敏度	0.03125 μmol/mL
分子	LYS
检测指标	LYS
注意事项	• 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用。 • 混合或复溶组分时，避免产生气泡。 • 勤换吸头，避免各组分之间的交叉污染。 • 实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。
保存建议	收到货后，请避光保存于4℃。请参阅说明书中各个组件的存储条件，自发货之日起，按照推荐的保存条件，有效期为12个月。
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

注意：正式检测前，建议选择 2-3 个预期差异较大的样本进行预实验。

自备耗材

酶标仪或可见分光光度计（能测 570 nm 处的吸光度）
96 孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
离心机、水浴锅
去离子水、95%乙醇、60%乙醇
匀浆器（如果是组织样本）

试剂盒组分

组分	规格	储存条件
Extraction Buffer	120 mL	4℃
Assay Buffer	2 mL	4℃
Substrate Powder×1 vial	-	4℃，避光保存
Substrate Cofactor Powder×1 vial	-	4℃，避光保存
Standard Powder×1 vial	-	4℃，避光保存

试剂准备

Extraction Buffer：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
Assay Buffer：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
Working Substrate：临用前配制，96 T 加入 2 mL 95%乙醇充分溶解，未用完的Working Substrate 可 4℃避光保存 1 周。
Working Substrate Cofactor：临用前配制，将 Assay Buffer 全部加入到 Substrate Cofactor 中充分溶解，建议 37℃水浴 5 min 促进溶解。未用完的Working Substrate Cofactor 4℃保存 1 周。

注意：Chromogen 和 Substrate 有一定的刺激性，建议在使用过程中做好个人防护。

工作液：按Working Substrate：Working Substrate Cofactor=1:1 的比例配制。

Standard：临用前配制，加 1.71 mL 去离子水，充分溶解得到 40 μmol/mL 标准品，未用完的 Standard 可 4℃避光保存 1 周。若需长期保存，请分装后-20℃避光保存，避免反复冻融。

标准曲线设置

按下表所示用去离子水将 40 μmol/mL 标准品稀释为 8、4、2、1、0.5、0.25、0.125 μmol/mL 的标准溶液。

序号	标准品体积	去离子水体积（µL）	标准品浓度
Std.1	40 µL of 40 μmol/mL	160	8 μmol/mL
Std.2	100 µL of Std.1 (8 μmol/mL）	100	4 μmol/mL
Std.3	100 µL of Std.2 (4 μmol/mL)	100	2 μmol/mL
Std.4	100 µL of Std.3 (2 μmol/mL)	100	1 μmol/mL
Std.5	100 µL of Std.4 (1 μmol/mL)	100	0.5 μmol/mL
Std.6	100 µL of Std.5 (0.5 μmol/mL)	100	0.25 μmol/mL
Std.7	100 µL of Std.6 (0.25 μmol/mL)	100	0.125 μmol/mL

注意：每次实验都要做一次标准品检测，制作标曲；稀释后的标准品溶液不稳定，必须在 4 小时内使用。

样本制备

注意：推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存 1 个月。

动物组织：称取约 0.1 g 样本，加入 1 mL Extraction Buffer，室温下充分匀浆，转移到 1.5 mL EP 管中，盖紧后（防止水分散失）置于 80℃水浴提取 20 min；冷却后，10,000 g，室温离心 10 min，取上清液，待测。
植物组织：称取约 0.1 g 样本，加入 1 mL Extraction Buffer 捣碎，室温超声波破碎 5 min（功率 20%或 200 W，超声 3 s，间隔 7 s，重复 30 次），转移到 1.5 mL EP 管中，盖紧后（防止水分散失）置于 80℃水浴提取 20 min；冷却后，10,000 g，室温离心 10 min，取上清液，待测。
细胞或细菌：收集 500 万细胞或细菌到离心管内，用冷 PBS 清洗细胞，离心后弃上清，加入 1 mL Extraction Buffer，室温超声波破碎 5 min（功率 20%或 200 W，超声 3 s，间隔 7 s，重复 30 次），转移到 1.5 mL EP 管中，盖紧后（防止水分散失）置于 80℃水浴提取 20 min；冷却后，10,000 g，室温离心 10 min，取上清液，待测。
细胞上清或血清（浆）：在 1.5 mL EP 管中，吸取 0.5 mL 液体加入 0.5 mL Extraction Buffer，盖紧后（防止水分散失）置于 80℃水浴提取 20 min；冷却后，10,000 g，室温离心 10 min，取上清液，待测。

注意：推荐用 Abbkine 货号：KTD3001 的蛋白质定量试剂盒（BCA 法）进行样本蛋白质浓度测定。

实验步骤

酶标仪或可见分光光度计预热 30 min 以上，调节波长到 570 nm，可见分光光度计用去离子水调零。
样本测定（在 EP 管中依次加入下列试剂）：

试剂	空白管（μL）	标准管（μL）	测定管（μL）
去离子水	10	0	0
不同浓度 Std.	0	10	0
样本	0	0	10
工作液	20	20	20

3. 混匀后盖紧瓶盖（防止水分散失），置于沸水浴中保温 5 min，自来水冷却 10 s 后加入 170 μL 60%乙醇反复颠倒 EP 管数次，5,000 g 室温离心 5 min，每管取出 150 μL 加入 96 孔板或微量玻璃比色皿，于 570 nm 测定吸光值，计算 ΔA 测=A 测定-A 空白、ΔA 标=A 标准-A 空白（空白管只需做 1 管）。显色后务必在 30 min 内测完。

注意：空白管和标准管只需做 1-2 次。实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测小于 0.002 可适当加大样本量。如果 ΔA 测大于 1.8，样本可用去离子水进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数。

结果计算

注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

标准曲线的绘制
以标准液浓度为 y 轴，ΔA 标为 x 轴绘制标准曲线。将 ΔA 测带入标准曲线公式计算出 y（μmol/mL）。
样本赖氨酸含量计算
1. 按样本质量计算
  赖氨酸含量(μmol/g 质量)=y÷(W÷V 提取)×n=y÷W×n
2. 按蛋白浓度计算
  赖氨酸含量(μmol/mg prot)=y÷Cpr×n
3. 按细菌或细胞数量计算
  赖氨酸含量(μmol/104)=y÷(细菌或细胞数量÷V 提取)×n=y÷500×n=0.002×y×n
4. 按液体体积计算
  赖氨酸含量(μmol/mL)=y×2×n
W：样本质量，g；V 提取，加入 Extraction Buffer 体积，1 mL；n：样本进一步稀释的稀释倍数；Cpr：上清液蛋白质浓度，mg/mL；500：细菌或细胞总数，500 万个；2：提取液体时的稀释倍数，（0.5 mL+0.5 mL）/0.5 mL=2。

常见问题

Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多？

A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。

Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证？

A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。

Q: 该产品线检测可使用分光光度计替代酶标仪吗？

A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。

Q: 该类试剂盒使用量应如何计算？

A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。

Q: 该系列试剂盒可以检测蓝藻等微生物样本吗？

A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。

文献引用

circ0066187 promotes pulmonary fibrogenesis through targeting STAT3-mediated metabolism signal pathway.

杂志名称: Cellular and Molecular Life Sciences | 作者: Liu, Bo, et al.

IF: 6.200 | 发表时间: 2025

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