IP专题| Abbkine通用型免疫（共）沉淀（IP/Co-IP）工具箱
一.IP/Co-IP实验原理
当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质相互作用被保留了下来，假如细胞内存在XZ蛋白复合物，用X (诱饵蛋白) 的抗体免疫沉淀X，那么与X在体内结合的蛋白质Z (靶蛋白) 也被沉淀下来。因此在细胞裂解液中加入X 的抗体沉淀蛋白 X，随后利用蛋白印迹 (western blot，WB) 检测沉淀中是否存在蛋白Z，如果存在，则说明细胞内存在XZ蛋白复合物，即蛋白XZ 存在相互作用。
免疫沉淀（Immunoprecipitation, IP）是利用固定在磁珠或琼脂糖等固相支持物上的特异性抗体对抗原进行小型亲和纯化的方法。作为许多蛋白学相关研究的重要环节，IP可用于检测蛋白质的存在、相对丰度、蛋白表达的上下调、蛋白质稳定性及相互作用等。
图1. IP/Co-IP示意图
二、Abbkine通用型免疫（共）沉淀（IP/Co-IP）工具箱省心优势特点
①高效：高效的抗体结合能力和较低的蛋白非特异吸附率，节省抗体用量；
②便捷、通用：综合 IP/Co-IP和WB实验所需的所有必要缓冲液，可同时满足样本IP/Co-IP或WB需求；
③可靠、稳定：包含即用型IP negative control，可排除IgG本身和目的蛋白或其它特定生物分子的非特异性结合，确保IP抗体的特异性；
④去重链：包含独特的IPkine™ 二抗，完美消除重链干扰。
三、Abbkine多种通用型免疫（共）沉淀（IP/Co-IP）工具箱的区别
①产品组分差异：
| 组分 | KTD104-CN/EN | KTI1010-CN/EN | KTI1020-CN/EN |
| 通用型免疫(共)沉淀(IP/Co-IP)工具箱(磁珠） | 通用型免疫(共)沉淀(IP/Co-IP)工具箱(磁珠/抗小鼠） | 通用型免疫(共)沉淀(IP/Co-IP)工具箱(磁珠/抗兔） | |
| • Non-Denaturing Lysis Buffer | 25 mL | 25 mL | 25 mL |
| • Denaturing Lysis Buffer | 25 mL | × | × |
| • 20×Wash Buffer | 20 mL | 20 mL | 20 mL |
| • Protein A/G Magnetic Beads | 0.45 mL | 0.5 mL | 0.5 mL |
| • Elution Buffer | 2 mL | 2 mL | 2 mL |
| • Neutralization Buffer | 0.2 mL | 0.2 mL | 0.2 mL |
| • 100×Proteinase Inhibitor Cocktail | 0.2 mL | 0.2 mL | 0.2 mL |
| • Mouse IgG (1 mg/mL) | 30 μL | 30 μL | × |
| • Rabbit IgG (1 mg/mL) | 30 μL | × | 30 μL |
| • IPKine™ HRP, Goat Anti-Mouse IgG LCS | 30 μL | 30 μL | × |
| • IPKine™ HRP, Mouse Anti-Rabbit IgG LCS | 30 μL | × | 30 μL |
新款指定种属的通用型工具箱优势（20T）：
- 给足磁珠量，增加至5 mL (约25T的实验用量)， 免去实验中磁珠损耗不够用的尴尬情况
- 提供一种同种属阴性IgG(Mouse IgG/Rabbit IgG)，IP二抗提供一种（抗鼠/抗兔），更精准的细分实验场景，提升性价比；
- 省去变性裂解液，简化试剂盒组分，提升利用度。
②琼脂糖珠与磁珠的区别
| 性能 | 琼脂糖树脂 | 磁珠 |
| 结合能力 | 多孔（海绵状）的，其具有较大的表面积-体积比，对抗体的结合能力较高。 | 外表面光滑无孔，磁珠的理论结合能力要比琼脂糖低。 |
| 得率 | 固定在海绵状琼脂糖上的抗体并不总能够与样品中的目标蛋白（通常为大蛋白复合物）结合，并且抗体可能会在洗涤步骤（离心）中流失。 | 结合在磁珠表面的抗体均能与抗原结合，并且抗体很少会在温和的洗涤步骤（磁体）中丢失，得率相同或更高。 |
| 可重复性和纯度 | 难以在不破坏和靠近一些沉淀树脂的前提下完全移除缓冲液，琼脂糖通常需要较长的孵育时间（使溶液向内部空间的扩散）和预纯化步骤（控制非目标蛋白的非特异性结合）。 | 所有磁珠固定在管壁，所以无需碰触磁珠沉淀即可移除缓冲液，外表面作用，尺寸更均一，一般不需要预纯化步骤。磁珠的可重复性和纯度通常高于琼脂糖。 |
| 简单快速、自动化 | IP需要较长的孵育时间、预纯化步骤和多次离心，所以其需要大量手动操作，总时间为1-1.5小时。 | 一次磁珠免疫沉淀使用只需大约30分钟即可完成，多个步骤可自动操作。 |
Abbkine通用型免疫（共）沉淀（IP/Co-IP）工具箱为您的IP实验提供多种选择，使您实验更加便捷省心，免除您的后顾之忧！
产品推荐：
| 货号 | 名称 | 规格 | 价格 |
| KTD104-CN | 通用型免疫（共）沉淀（IP/Co-IP）工具箱（磁珠） | 20 T | ￥998 |
| KTD105-CN | 通用型免疫（共）沉淀（IP/Co-IP）工具箱（琼脂糖） | 20 T | ￥998 |
| KTI1010-CN | 通用型免疫（共）沉淀（IP/Co-IP）工具箱（磁珠/抗小鼠） | 20 T | ￥598 |
| KTI1020-CN | 通用型免疫（共）沉淀（IP/Co-IP）工具箱（磁珠/抗兔） | 20 T | ￥598 |
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赋能细胞研究与治疗 Enabling cell research and therapy
亚科因生物技术有限公司（Abbkine Biotechnology Co., Ltd）成立于2017年，总部位于中国武汉。公司致力于细胞科研检测及细胞治疗领域关键试剂的研发、生产和销售，成为全球细胞制药领域创新的关键推动者。公司主营业务包括细胞培养、扩增及储存试剂，细胞代谢、检测及分选试剂盒，细胞治疗用原料及细胞因子等产品及定制化服务。围绕生物试剂研发，亚科因生物已建立了稳定完善的两大关键技术平台：生化试剂配方和重组蛋白表达进化平台，为细胞科研检测及细胞治疗核心试剂的高通量、高效率研发生产提供保障。
