细胞冻存液那些事

细胞冻存是细胞培养技术中细胞进行保种并长期保存的常用方法，其中细胞冻存液，作为细胞冻存时必须使用的一种溶液，不仅仅是说只是用来进行细胞的保存，在细胞的购买、寄赠、交换和运送过程中也起着关键作用，因此选择一款好的细胞冻存液就尤为重要。

现有冻存方法存在的问题：

1、DMSO虽然对冻存细胞具有保护作用，但对细胞存在一定的毒性，用量受到限制，降低或者不使用DMSO，寻找其它替代物是最好的选择。因此，联合其它成分，形成新的配方，降低DMSO的含量就成了目前最佳的选择。

2、血清，即使是纯化得到的白蛋白，由于其动物来源的特性，会极大增加带来病毒等感染物质的可能。而且，血清来源受限，价格昂贵，所以其使用也必然会受到越来越多的限制。且血清的加入，将对培养基不同批次的差异造成影响。

基于以上困境，要如何选一款合适的冻存液？

细胞冻存液的选择须遵循几个原则：

①细胞在冻存和溶解过程中的损伤减低到最小，细胞存活率高；

②冻存细胞复温后，其的细胞生物学特性无明显影响；

③细胞复温后，低温保护剂容易去除，成分清楚，对细胞、人体无毒副作用；

④冻存保护剂可快速起效，减少操作步骤。

（1）DMSO含量：渗透性保护剂分子量小可渗透到细胞内，如甘油、DMSO、乙二醇等，其在细胞冷冻存完全凝固之前，渗入细胞内，降低细胞内外溶液中的电解质浓度，阻止细胞内水分外渗，避免细胞过分脱水皱缩，避免细胞内外环境冰晶的生成。DMSO是一类渗透性细胞冻存保护试剂的代表，这类试剂包括：甘油、DMSO、乙烯醇和乙酰胺等。从上述几种物质渗透进出细胞的速度及细胞冻存效果看，DMSO效果更好，所以常规的细胞冻存液大都含有DMSO。传统的细胞冻存液是使用培养基、血清和DMSO按照一定的比例混合，其中DMSO的含量是10%。Abbkine联合其它成分，形成新的配方，降低DMSO的含量，保护细胞的同时，降低其毒性。

（2）是否含血清

细胞冻存液含血清是从细胞生长环境角度考虑对细胞进行保护，但含血清（属动物源成分）势必需要考虑细胞污染、批间稳定性等因素。Abbkine开发了不含血清的细胞冻存液，不含血清及动物来源性蛋白，减少病毒、霉菌和支原体等的污染。含血清的细胞冻存液一般采用程序降温（4℃→-20℃→-80℃→液氮），原因是血清中含有大量蛋白、细胞因子，血清含量较大的冻存细胞冻存液在温度快速降低时，会造成有较多蛋白沉淀。

SuperKine™ 快速细胞冻存液（无血清/无蛋白）是一种操作简便，非程序化降温的冻存液。其配方成分明确，无血清、无蛋白，可排除血清或蛋白潜在的病毒或支原体等污染风险，使用更安全。经过了34种常用细胞的验证，细胞复苏存活率高。

产品优势

• 省时省力——直接冻存在-80度冰箱，无程序性降温
• 安全性高——无血清，无蛋白。避免病毒和支原体等污染
• 品质高——存活率高，无批次差异
• 应用广泛——经过34种常用细胞验证，适用于绝大部分细胞

结果展示

图1 将SuperKine™ 快速细胞冻存液（无血清/无蛋白）与A、B、C三个知名品牌同款产品对几种常用的动物细胞进行冻存后复苏，比较细胞活力。结果显示，Abbkine的快速细胞冻存液（无血清/无蛋白）冻存细胞复苏后，其细胞存活率大于或等于其它品牌。

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赋能细胞研究与治疗 Enabling cell research and therapy

亚科因生物技术有限公司（Abbkine Biotechnology Co., Ltd）成立于2017年，总部位于中国武汉。公司致力于细胞科研检测及细胞治疗领域关键试剂的研发、生产和销售，成为全球细胞制药领域创新的关键推动者。公司主营业务包括细胞培养、扩增及储存试剂，细胞代谢、检测及分选试剂盒，细胞治疗用原料及细胞因子等产品及定制化服务。围绕生物试剂研发，亚科因生物已建立了稳定完善的两大关键技术平台：生化试剂配方和重组蛋白表达进化平台，为细胞科研检测及细胞治疗核心试剂的高通量、高效率研发生产提供保障。