彗星实验如何做?
彗星实验又称单细胞凝胶电泳实验,是由Ostling等研究者于1984年首次提出的一种通过检测DNA链损伤来判别遗传毒性的技术。
彗星实验(Comet assay)是一种在单细胞水平上检测DNA损伤的技术。当各种内源性和外源性 DNA 损伤因子诱发细胞 DNA 链断裂时,其超螺旋结构受到破坏,在细胞裂解液作用下,细胞膜、核膜等膜结构受到破坏,细胞内的蛋白质、RNA 以及其他成分均扩散到电解液中,而核DNA由于分子量太大不能进入凝胶而留在原位。电泳过程中,如果DNA没有损伤,则将停留在原位,染色后呈圆形的荧光团,无拖尾出现。如果DNA受损,断裂的碎片进入到凝胶中,在电场的作用下,DNA碎片离开原位向阳极迁移,形成拖尾。
该法检测低浓度遗传毒物具有高灵敏性,研究的细胞不需处于有丝分裂期。同时,这种技术只需要少量细胞。
实验步骤
- 制备单细胞悬浮液,在 37℃ 条件下,悬浮液与低熔点琼脂糖(LM琼脂糖)混合;
- 将琼脂糖、细胞混合物涂布在预处理的载玻片上;
- 4℃条件下用裂解液处理30-60min或过夜,裂解液由去垢剂及高盐溶液组成,可去除多余的细胞膜及组蛋白;
- 将载玻片浸入电泳溶液中;
- 进行凝胶电泳,随后,中和载玻片,待LM琼脂糖完全干燥后,用荧光染料染色,并于荧光显微镜下观察DNA损伤程度。
产品优势
- 试剂齐全可靠:提供特色涂层多孔彗星玻片,增加凝胶与载玻片粘附力,有效降低脱胶风险

- 操作简便:无需用不同熔点琼脂糖繁琐铺胶,可快速、灵敏的检测细胞 DNA 损伤;
实验效果展示
Fig.用Abbkine 彗星试剂盒检测Jurkat细胞的DNA 损伤,并和A品牌进行比较。Abbkine 彗星试剂盒检测不仅步骤更简便,省时高效,且荧光较亮,样本不易脱落,可形成稳定鲜亮的结果。

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赋能细胞研究与治疗 Enabling cell research and therapy
亚科因生物技术有限公司(Abbkine Biotechnology Co., Ltd)成立于2017年,总部位于中国武汉。公司致力于细胞科研检测及细胞治疗领域关键试剂的研发、制造和销售,成为全球细胞制药领域创新的关键推动者。公司主营业务包括细胞培养、扩增及储存试剂,细胞代谢、检测及分选试剂盒,细胞治疗用原料及细胞因子等产品及定制化服务。围绕生物试剂研发,亚科因生物已建立了稳定完善的两大关键技术平台:生化试剂配方和重组蛋白表达进化平台,为细胞科研检测及细胞治疗核心试剂的高通量、高效率研发生产提供保障。
