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活动截止时间：2024年1月31日
EliKine™ 人前列腺特异性抗原（PSA）ELISA定量试剂盒是一款基于竞争法原理的固相酶联免疫检测工具，专为血清、血浆及细胞培养上清中人PSA含量的定量分析而设计。通过预包被抗体的96孔微孔板与HRP标记检测抗体协同作用，可在常规实验室条件下实现对PSA的高灵敏度比色测定。
背景知识扩展：前列腺特异性抗原（Prostate Specific Antigen, PSA）是由前列腺上皮细胞分泌的丝氨酸蛋白酶，分子量约34 kDa，正常情况下以高浓度存在于前列腺液与精液中，血清含量极低。当前列腺组织结构被破坏（如前列腺癌、良性增生或炎症）时，PSA大量进入血液循环，使其血清水平显著升高。因此，血清PSA测定已成为前列腺癌早期筛查、疗效监测及预后评估的核心无创指标。本试剂盒采用竞争法模式：样本中的PSA与微孔板固相抗原竞争结合HRP标记抗PSA抗体，TMB显色后于450 nm读取吸光度，PSA浓度与信号强度呈负相关，从而实现0.078–5 ng/mL范围内的精准定量。
前列腺癌早期筛查与辅助诊断、术后/药物治疗疗效动态监测、前列腺疾病机制研究、细胞模型中PSA分泌功能评估、以及临床前药物开发中的生物标志物验证。
| 中文名称 | 人前列腺特异性抗原(PSA)ELISA定量试剂盒-EliKine™ |
| 英文名称 | EliKine™ Human Prostate Specific Antigen (PSA) ELISA Kit |
| 产品货号 | KTE6039 |
| 反应性 | 人 |
| 检测类型 | ELISA |
| 检测方法 | 竞争法 |
| 样本类型 | 血清#血浆#细胞培养上清 |
| 试剂盒组分 | • Human PSA Microplate • Human PSA Standard (lyophilized) • Sample Diluent (5x) • Assay Buffer (5x) • HRP-conjugated Human PSA Detect Antibody (100×) • HRP Substrate（TMB） • Stop Solution • Wash Buffer (20x ) • Plate Covers |
| 检测范围 | 0.078 ng/mL- 5 ng/mL |
| 灵敏度 | 0.078 ng/mL |
| 检测指标 | PSA |
| 注意事项 | • 1. 如果 Sample Diluent (5×)和 Assay Buffer (5×)出现颜色变黄，少量沉淀等现象，是因为试剂中含有血清导致，离心去掉沉淀即可，不影响正常使用。 • 2. 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用；否则，可能导致结果异常。 • 3. 勤换吸头，避免各组分之间的交叉污染。 • 4. 为确保准确的结果，在孵育步骤中必须正确粘附板贴。 • 5. Stop Solution 有一定的腐蚀性，操作时请做好防护措施。 |
| 保存建议 | 请将未开封使用的试剂盒避光保存于2-8℃，保质期24个月；启用后的试剂盒，请参考说明书保存各个组分。 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
1× Sample Diluent：使用前，平衡到室温；用去离子水按 1:5 的比例稀释 5× Sample Diluent 得到 1× Sample Diluent，轻轻混合以避免起泡。 4℃ 保存，此溶液可稳定保存 30 天。 1× Sample Diluent 用于稀释标准品，血清和血浆样品。
1× Sample Diluent：1× Assay Buffer：使用前，平衡到室温；用去离子水按 1:5 的比例稀释 5× Assay Buffer 得到 1× Assay Buffer，轻轻混合以避免起泡。 4℃ 保存，此溶液可稳定保存 30 天。 1× Assay Buffer 用于稀释 HRP-conjugated Human PSA Detect Antibody (100×)。
1× Assay Buffer：Human PSA Standard： 加入 1 mL 1× Sample Diluent 复溶 Human PSA Standard 得到 5 ng/mL 标准品。在进行稀释之前，将标准品至少放置 15 min 并轻轻晃动。
Human PSA Standard：1× HRP-conjugated Human PSA Detect Antibody： 稀释前充分混合。根据标准品和样品所需要的量，在干净的塑料管中用 1× Assay Buffer 对 HRP-conjugated Human PSA Detect Antibody（100×）进行 1:100 稀释。 1× HRP-conjugated Human PSA Detect Antibody 应在稀释后 30 min 内使用。
1× HRP-conjugated Human PSA Detect Antibody：HRP Substrate TMB：即用型；使用前，平衡到室温； 4℃ 避光保存。
HRP Substrate TMB：Stop Solution：即用型；使用前，平衡到室温； 4℃ 保存。
Stop Solution：1× Wash Buffer： 使用前，平衡到室温；用去离子水进行 1:20 稀释得到 1× Wash Buffer。 轻轻混合以避免起泡，室温保存，此溶液可稳定保存 30 天。
1× Wash Buffer：按下表所示，用 1× Sample Diluent 将 5 ng/mL 标准品稀释为 5、2.5、1.25、0.625、0.313、0.156、0.078 和 0 ng/mL 的 Human PSA 标准品。
| 序号 | 标准品体积 | 1× Sample Diluent 体积 (μL) | 标准品浓度（ng/mL） |
|---|---|---|---|
| Std.1 | 1,000 µL of 5 ng/mL | 0 | 5 |
| Std.2 | 500 µL of Std.1 (5 ng/mL) | 500 | 2.5 |
| Std.3 | 500 µL of Std.2 (2.5 ng/mL) | 500 | 1.25 |
| Std.4 | 500 µL of Std.3 (1.25 ng/mL) | 500 | 0.625 |
| Std.5 | 500 µL of Std.4 (0.62 ng/mL) | 500 | 0.313 |
| Std.6 | 500 µL of Std.5 (0.313 ng/mL) | 500 | 0.156 |
| Std.7 | 500 µL of Std.6 (0.156 ng/mL) | 500 | 0.078 |
| Std.8 | 0 | 500 | 0 |
| 序号 | 标准品体积 | 1× Sample Diluent 体积 (μL) | 标准品浓度（ng/mL） |
|---|---|---|---|
| Std.1 | 1,000 µL of 5 ng/mL | 0 | 5 |
| Std.2 | 500 µL of Std.1 (5 ng/mL) | 500 | 2.5 |
| Std.3 | 500 µL of Std.2 (2.5 ng/mL) | 500 | 1.25 |
| Std.4 | 500 µL of Std.3 (1.25 ng/mL) | 500 | 0.625 |
| Std.5 | 500 µL of Std.4 (0.62 ng/mL) | 500 | 0.313 |
| Std.6 | 500 µL of Std.5 (0.313 ng/mL) | 500 | 0.156 |
| Std.7 | 500 µL of Std.6 (0.156 ng/mL) | 500 | 0.078 |
| Std.8 | 0 | 500 | 0 |
注意：每次实验都需要新配制标准品。
注意：1. 细胞培养上清：离心除去颗粒，立即测定或分装 -20℃ 保存，避免反复冻融。
1. 细胞培养上清：2. 血清：使用血清分离管，让样品在室温下凝结 30 min，然后 1,000 g 离心 15 min。取上层血清立即测定或分装 -20℃ 保存，避免反复冻融。
2. 血清：3. 血浆：使用 EDTA、肝素或柠檬酸盐作为抗凝剂收集血浆。在收集后 30 min 内 1,000 g 离心 15 min。立即测定或分装 -20℃ 保存，避免反复冻融。
3. 血浆：注意：不要使用严重溶血或脂血的标本。如果样品要在 24 h 内使用，则可以将其储存在 2-8℃，避免反复冻融。测定前，应将冷冻样品缓慢升至室温并轻轻混合。
注意：1. 计算每个标准品和样品的复孔平均 OD 值，并减去零浓度（Std.8）平均 OD 值。
1.2. 标准曲线的绘制：以标准品浓度为 x 轴，各标准品的平均吸光度为 y 轴，绘制标准曲线。可以使用作图软件来创建标准曲线。
2.注意：如果样品被稀释，从标准曲线读取的浓度必须乘以稀释系数。
注意：A: 双抗体夹心法是检测大分子抗原最常用的方法。双抗夹心法ELISA是将特异性抗体结合到固相载体上形成固相抗体，然后和待检样本中的相应抗原结合形成免疫复合物，洗涤后再加酶标记抗体，与免疫复合物中抗原结合形成酶标抗体— 抗原—固相抗体复合物，加底物显色，判断抗原含量；
A: 稀释好的液体样本100 μL，细胞样本1-2×106个cells，组织样本1 g左右。
A: 因为TMB显色染料经过硫酸终止之后在450nm处有最大吸收峰，所以用酶标仪检测450nm处的OD值。
A: 开封的酶标板应密封后在-20度保存，能保存一个月。
A: 无影响，只是计算的时候需注意，样本的OD值应代入计算式的X值中。
A: 血浆。
A: 可以满足，连续取的样本如果1周内检测，需保存于4℃；如1个月内检测，按一次使用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融；如6个月内检测，分装保存于-80℃，避免反复冻融。
A: 1. 加样本及试剂量不准，孔间不一致----重复测定时保持与上次操作条件一致； 2. 加样过快，孔间发生污染----加样不能过快； 3. 加样本及试剂时，加在孔壁上部非包被区----加样时枪头不要贴壁； 4. 不同批号试剂盒中组分混用----不同批号试剂盒中组分不可混用； 5. 温育时间、洗板、显色时间不一致----操作时间保持一致； 6. 试剂/样品没有混匀----充分混匀样品和试剂。
A: 建议在Abbkine官网搜索“KET”，客户可以了解到相关指标。如有疑问，请联系support@abbkine.com进行详细咨询。
A: 为了避免基质效应，ELISA 试剂盒针对不同的样本都会配备不同的稀释液。一些稀释液，特别是血清稀释液的配方中，会含有一些动物蛋白成分（比如 BSA）和溶解度较低的盐。这些成分在低温或是稀释液微量蒸发的情况下，会出现结晶或浑浊的现象。在试剂盒开发的过程中，我们研发人员开展的大量验证实验表明，稀释液的沉淀不会影响试剂的使用性能。
请等待最新文献信息更新。
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