人癌胚抗原(CEA)ELISA定量试剂盒-EliKine™

Name: 人癌胚抗原(CEA)ELISA定量试剂盒-EliKine™
Brand: Abbkine
SKU: KTE6038
Price: 1598 CNY
Availability: InStock

EliKine™ Human Carcinoembryonic Antigen (CEA) ELISA Kit

产品货号

KTE6038

产品特点：

高灵敏度检测：最低检出限达0.313 ng/mL，可识别低浓度CEA变化

竞争法设计：通过HRP标记抗体与样本竞争结合，确保特异性识别，避免类似物交叉反应

宽线性范围：标准曲线覆盖0.625-40 ng/mL，适配不同浓度样本需求

即用型组分：包含预包被微孔板、冻干标准品及浓缩缓冲液，简化实验流程

选择规格

48 T

¥1598

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96 T

¥2558

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活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

EliKine™ 人癌胚抗原（CEA）ELISA定量试剂盒（EliKine™ Human Carcinoembryonic Antigen (CEA) ELISA Kit）是一款基于竞争法原理设计的ELISA检测工具，可对人血清、血浆及细胞培养上清中的CEA含量进行快速、精准的定量分析。

癌胚抗原（Carcinoembryonic Antigen, CEA）是一种由大肠癌组织分泌的糖蛋白，广泛存在于内胚层来源的消化系统肿瘤中，同时在正常胚胎消化管组织及健康成人血清中也可检测到微量表达。作为广谱性肿瘤标志物，CEA水平升高与大肠癌、乳腺癌、肺癌等多种恶性肿瘤的进展、疗效评估及预后监测密切相关。尽管其早期诊断灵敏度有限，但动态监测CEA浓度变化可为临床提供重要的疾病进展参考。

应用领域

适用于肿瘤生物学研究、临床肿瘤标志物监测、抗癌药物疗效评估及细胞分泌功能分析等场景，特别推荐用于人源样本（血清/血浆/细胞上清）的CEA定量检测。

产品参数

中文名称	人癌胚抗原(CEA)ELISA定量试剂盒-EliKine™
英文名称	EliKine™ Human Carcinoembryonic Antigen (CEA) ELISA Kit
产品货号	KTE6038
反应性	人
检测类型	ELISA
检测方法	竞争法
样本类型	血清#血浆#细胞培养上清
试剂盒组分	• Human CEA Microplate • Human CEA Standard (lyophilized) • Sample Diluent (5×) • Assay Buffer (5×) • HRP-conjugated Human CEA Detect Antibody (100×) • HRP Substrate（TMB） • Stop Solution • Wash Buffer (20x ) • Plate Covers
检测范围	0.625 ng/mL-40 ng/mL
灵敏度	0.313 ng/mL
检测指标	CEA
注意事项	• 1. 如果 Sample Diluent (5×)和 Assay Buffer (5×)出现颜色变黄，少量沉淀等现象，是因为试剂中含有血清导致，离心去掉沉淀即可，不影响正常使用。 • 2. 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用；否则，可能导致结果异常。 • 3. 勤换吸头，避免各组分之间的交叉污染。 • 4. 为确保准确的结果，在孵育步骤中必须正确粘附板贴。 • 5. Stop Solution 有一定的腐蚀性，操作时请做好防护措施。
保存建议	请将未开封使用的试剂盒避光保存于2-8℃，保质期24个月；启用后的试剂盒，请参考说明书保存各个组分。
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

自备耗材

酶标仪（能测 450 nm 处的吸光度）
多通道移液器或自动洗板机
恒温箱、低温离心机
可调节式移液枪及枪头
去离子水

酶标仪（能测 450 nm 处的吸光度）

多通道移液器或自动洗板机

恒温箱、低温离心机

可调节式移液枪及枪头

去离子水

试剂准备

1× Sample Diluent：使用前，平衡到室温；用去离子水按 1:5 的比例稀释 Sample Diluent (5×) 得到 1× Sample Diluent，轻轻混合以避免起泡。4℃保存，此溶液可稳定保存 30 天。1× Sample Diluent 用于稀释标准品，血清和血浆样品。

1× Sample Diluent：

1× Assay Buffer：使用前，平衡到室温；用去离子水按 1:5 的比例稀释 Assay Buffer (5×) 得到 1× Assay buffer，轻轻混合以避免起泡。4℃保存，此溶液可稳定保存 30 天。1× Assay buffer 用于稀释 HRP-conjugated Human CEA Detect Antibody (100×)。

1× Assay Buffer：

Human CEA Standard：加入 1 mL 1× Sample Diluent 复溶得到 40 ng/mL 标准品。在进行稀释之前，将标准品至少放置 15 min 并轻轻晃动。

Human CEA Standard：

1× HRP-conjugated Human CEA Detect Antibody：稀释前充分混合。根据标准品和样品所需要的量，在干净的塑料管中用 1× Assay buffer 对 HRP-conjugated Human CEA Detect Antibody (100×) 进行 1:100 稀释。1× HRP-conjugated Human CEA Detect Antibody 应在稀释后 30 min 内使用。

1× HRP-conjugated Human CEA Detect Antibody：

HRP Substrate TMB（）：即用型；使用前，平衡到室温；4℃避光保存。

HRP Substrate TMB（）：

Stop Solution：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。

Stop Solution：

1× Wash Buffer：使用前平衡到室温；用去离子水进行 1:20 稀释得到 1× Wash buffer。轻轻混合以避免起泡，室温保存，此溶液可稳定保存 30 天。

1× Wash Buffer：

标准曲线设置

按下表所示，用 1× Sample Diluent 将 Human CEA 标准品稀释为 40 ng/mL、20 ng/mL、10 ng/mL、5 ng/mL、2.5 ng/mL、1.25 ng/mL、0.625 ng/mL 和 0 ng/mL 的标准品。

序号	标准品体积	1× Sample Diluent (体积 μL)	标准品浓度（ng/mL）
Std.1	1,000 µL of 4 ng/mL	0	40
Std.2	500 µL of Std.1 (4 ng/mL)	500	20
Std.3	500 µL of Std.2 (2 ng/mL)	500	10
Std.4	500 µL of Std.3 (10 ng/mL)	500	5
Std.5	500 µL of Std.4 (5 ng/mL)	500	2.5
Std.6	500 µL of Std.5 (2.5 ng/mL)	500	1.25
Std.7	500 µL of Std.6 (1.25 ng/mL)	500	0.625
Std.8	0	500	0

序号标准品体积1× Sample Diluent (体积 μL)标准品浓度（ng/mL）序号标准品体积1× Sample Diluent (体积 μL)标准品浓度（ng/mL）序号标准品体积1× Sample Diluent (体积 μL)标准品浓度（ng/mL）Std.11,000 µL of 4 ng/mL040Std.2500 µL of Std.1 (4 ng/mL)50020Std.3500 µL of Std.2 (2 ng/mL)50010Std.4500 µL of Std.3 (10 ng/mL)5005Std.5500 µL of Std.4 (5 ng/mL)5002.5Std.6500 µL of Std.5 (2.5 ng/mL)5001.25Std.7500 µL of Std.6 (1.25 ng/mL)5000.625Std.805000Std.11,000 µL of 4 ng/mL040Std.11,000 µL of 4 ng/mL040Std.2500 µL of Std.1 (4 ng/mL)50020Std.2500 µL of Std.1 (4 ng/mL)50020Std.3500 µL of Std.2 (2 ng/mL)50010Std.3500 µL of Std.2 (2 ng/mL)50010Std.4500 µL of Std.3 (10 ng/mL)5005Std.4500 µL of Std.3 (10 ng/mL)5005Std.5500 µL of Std.4 (5 ng/mL)5002.5Std.5500 µL of Std.4 (5 ng/mL)5002.5Std.6500 µL of Std.5 (2.5 ng/mL)5001.25Std.6500 µL of Std.5 (2.5 ng/mL)5001.25Std.7500 µL of Std.6 (1.25 ng/mL)5000.625Std.7500 µL of Std.6 (1.25 ng/mL)5000.625Std.805000Std.805000

注意：每次实验都需要新配制标准品。

样本制备

1. 细胞培养上清：离心除去颗粒，立即测定或分装-20℃保存，避免反复冻融。

2. 血清：使用血清分离管，让样品在室温下凝结 30 min，然后 1,000 g 离心 15 min。取上层血清立即测定或分装-20℃保存，避免反复冻融。

3. 血浆：使用 EDTA、肝素或柠檬酸盐作为抗凝剂收集血浆。在收集后 30 min 内 1,000 g 离心 15 min。立即测定或分装-20℃保存，避免反复冻融。

注意：不要使用严重溶血或脂血的标本。如果样品要在 24 h 内使用，则可以将其储存在 2-8℃，避免反复冻融。测定前，应将冷冻样品缓慢升至室温并轻轻混合。

实验步骤

从板框上取下多余的板条，将它们放回装有干燥剂包的铝箔袋中，然后重新密封。
每孔加入 100 μL 稀释的标准品或样品。建议所有标准品和样品做复孔。给酶标板覆膜，在室温下孵育 2 h。
除去每孔中的液体并洗涤，重复该过程总共洗涤三次。使用多通道移液器或自动清洗机每孔加入 250 μL 1×Wash Buffer 进行洗涤，然后静置 1-2 min。在每个步骤中完全去除液体对于获得良好性能至关重要。最后一次洗涤后，倒置酶标板并用干净的纸巾吸干以除去任何剩余的 1× Wash Buffer。
每孔加入 100 μL 1× HRP-conjugated Human CEA Detect Antibody。给酶标板覆膜，在室温下孵育 1 h。
重复步骤 3 中的洗涤 3-5 次。
每孔加入 100 μL HRP Substrate TMB（）。给酶标板覆膜，并在室温下避光孵育 15 min。
每孔加入 50 μL Stop Solution，Stop Solution 应按照与 TMB 相同的顺序加到板中。孔中的颜色应从蓝色变为黄色。如果孔中的颜色为绿色或颜色变化不均匀，请轻轻敲击板以确保彻底混合。
在 30 min 内，测定每孔 450 nm 处的吸光值。

从板框上取下多余的板条，将它们放回装有干燥剂包的铝箔袋中，然后重新密封。

每孔加入 100 μL 稀释的标准品或样品。建议所有标准品和样品做复孔。给酶标板覆膜，在室温下孵育 2 h。

除去每孔中的液体并洗涤，重复该过程总共洗涤三次。使用多通道移液器或自动清洗机每孔加入 250 μL 1×Wash Buffer 进行洗涤，然后静置 1-2 min。在每个步骤中完全去除液体对于获得良好性能至关重要。最后一次洗涤后，倒置酶标板并用干净的纸巾吸干以除去任何剩余的 1× Wash Buffer。

每孔加入 100 μL 1× HRP-conjugated Human CEA Detect Antibody。给酶标板覆膜，在室温下孵育 1 h。

重复步骤 3 中的洗涤 3-5 次。

每孔加入 100 μL HRP Substrate TMB（）。给酶标板覆膜，并在室温下避光孵育 15 min。

每孔加入 50 μL Stop Solution，Stop Solution 应按照与 TMB 相同的顺序加到板中。孔中的颜色应从蓝色变为黄色。如果孔中的颜色为绿色或颜色变化不均匀，请轻轻敲击板以确保彻底混合。

在 30 min 内，测定每孔 450 nm 处的吸光值。

结果计算

计算每个标准品和样品的复孔平均 OD 值，并减去零浓度（Std.8）平均 OD 值。
标准曲线的绘制：以标准品浓度为 x 轴，各标准品的平均吸光度为 y 轴，绘制标准曲线。可以使用作图软件来创建标准曲线。

计算每个标准品和样品的复孔平均 OD 值，并减去零浓度（Std.8）平均 OD 值。

标准曲线的绘制：以标准品浓度为 x 轴，各标准品的平均吸光度为 y 轴，绘制标准曲线。可以使用作图软件来创建标准曲线。

注意：如果样品被稀释，从标准曲线读取的浓度必须乘以稀释系数。

常见问题

Q: 普通大分子蛋白ELISA检测的原理是什么？

A: 双抗体夹心法是检测大分子抗原最常用的方法。双抗夹心法ELISA是将特异性抗体结合到固相载体上形成固相抗体，然后和待检样本中的相应抗原结合形成免疫复合物，洗涤后再加酶标记抗体，与免疫复合物中抗原结合形成酶标抗体— 抗原—固相抗体复合物，加底物显色，判断抗原含量；

Q: 试剂盒检测一个样品孔，一般用多少样本量？

A: 稀释好的液体样本100 μL，细胞样本1-2×106个cells，组织样本1 g左右。

Q: 为什么我们的ELISA试剂盒的最大吸收波长是450nm？

A: 因为TMB显色染料经过硫酸终止之后在450nm处有最大吸收峰，所以用酶标仪检测450nm处的OD值。

Q: 开封之后，未用完的ELISA酶标板的保存方法和保存时间？

A: 开封的酶标板应密封后在-20度保存，能保存一个月。

Q: ELISA实验制作标曲，X轴和Y轴弄反了，是否对结果有影响？

A: 无影响，只是计算的时候需注意，样本的OD值应代入计算式的X值中。

Q: 样本前处理：血加在抗凝管里后,离心出来的是血清还是血浆？

A: 血浆。

Q: 该系列试剂盒能否满足客户间断性采样的要求？

A: 可以满足，连续取的样本如果1周内检测，需保存于4℃；如1个月内检测，按一次使用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融；如6个月内检测，分装保存于-80℃，避免反复冻融。

Q: ELISA试验的标准曲线和测定的重复性差，这是由什么原因造成的？

A: 1. 加样本及试剂量不准，孔间不一致----重复测定时保持与上次操作条件一致； 2. 加样过快，孔间发生污染----加样不能过快； 3. 加样本及试剂时，加在孔壁上部非包被区----加样时枪头不要贴壁； 4. 不同批号试剂盒中组分混用----不同批号试剂盒中组分不可混用； 5. 温育时间、洗板、显色时间不一致----操作时间保持一致； 6. 试剂/样品没有混匀----充分混匀样品和试剂。

Q: 该类试剂盒的指标如何查找？

A: 建议在Abbkine官网搜索“KET”，客户可以了解到相关指标。如有疑问，请联系support@abbkine.com进行详细咨询。

Q: 该类试剂盒的标准品稀释液中偶见沉淀，应如何处理？

A: 为了避免基质效应，ELISA 试剂盒针对不同的样本都会配备不同的稀释液。一些稀释液，特别是血清稀释液的配方中，会含有一些动物蛋白成分（比如 BSA）和溶解度较低的盐。这些成分在低温或是稀释液微量蒸发的情况下，会出现结晶或浑浊的现象。在试剂盒开发的过程中，我们研发人员开展的大量验证实验表明，稀释液的沉淀不会影响试剂的使用性能。

文献引用

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