×

游离甲状腺素(fT4)ELISA定量试剂盒-EliKine™

EliKine™ Free Thyroxine (fT4) ELISA Kit

产品货号
KTE0005

产品特点:

  • 竞争法设计,灵敏度低至4.0 pmol/L,可检测微量fT4变化
  • 跨物种兼容:人、小鼠、大鼠、山羊、绵羊、狗、兔子、牛、猴子、鸡、猪均适用
  • 预包被抗体微孔板+即用型标准品与试剂,缩短实验准备时间
  • 高特异性:对fT4类似物无明显交叉反应,背景干扰低
  • 完整组分:包含标准品、生物素-fT4、Avidin-HRP、双底物、终止液、洗涤液及封板膜,实验流程一站式
  • 选择规格

    48 T
    ¥1598
    期货(4天内发货)
    96 T
    ¥2558
    期货(4天内发货)
    🎉 限时优惠

    买2送1活动进行中!购买任意2个规格产品,免费赠送100μL装一支。

    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    EliKine™ 游离甲状腺素(fT4)ELISA定量试剂盒是一款基于竞争法原理的高灵敏度免疫检测工具,可在微孔板中快速、精准地定量人、小鼠、大鼠、山羊、绵羊、狗、兔子、牛、猴子、鸡、猪等多物种血清、血浆及其他生物液体中的游离甲状腺素(fT4)水平。

    背景知识

    甲状腺素(T4)是评估甲状腺功能最常用的筛选指标之一,但血清中99%以上的T4与甲状腺素结合球蛋白(TBG)等蛋白结合,仅有极少量以游离形式存在。fT4(游离甲状腺素)作为循环中具有生物活性的部分,不受TBG浓度变化影响,能更直接、真实地反映机体甲状腺功能状态。EliKine™ fT4 ELISA Kit通过将样品中的fT4与生物素标记的fT4竞争结合预包被抗体,再借助Avidin-HRP及显色体系放大信号,实现4–64 pmol/L范围内的准确定量。

    应用领域

    本试剂盒适用于内分泌研究、甲状腺功能评估、药物干预实验、动物模型代谢研究等场景,可处理血清、血浆及其他生物液体样本,为科研工作者提供可靠的fT4定量数据支持。

    游离甲状腺素(fT4)ELISA定量试剂盒-EliKine™

    产品参数

    中文名称 游离甲状腺素(fT4)ELISA定量试剂盒-EliKine™
    英文名称 EliKine™ Free Thyroxine (fT4) ELISA Kit
    产品货号 KTE0005
    反应性 人#小鼠#大鼠#山羊#绵羊#狗#兔子#牛#猴子#鸡#猪
    检测类型 ELISA
    检测方法 竞争法
    样本类型 血清#血浆#其它生物液体
    试剂盒组分 • fT4 抗体预包被微孔板
    • fT4 标准品
    • 生物素偶联的fT4
    • Avidin-HRP
    • HRP底物A
    • HRP底物B
    • 反应终止液
    • 洗涤缓冲液
    • 封板膜.
    检测范围 4 pmol/L-64 pmol/L
    灵敏度 4.0 pmol/L
    检测指标 fT4
    注意事项 • 试剂盒的试剂不能与其它批号的试剂或超出有效期的试剂混合使用。
    • 试剂应按瓶上标签说明储存,使用前室温平衡30 分钟。
    • 实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。
    • 实验中未用的板条立即放回包装中,密闭封口,4℃保存。
    • 充分混匀对反应结果尤为重要,推荐使用低速频率振荡器或者每10分钟手动摇匀。
    • 对于样品和标准品,建议做双孔或者三孔检测(复孔)。.
    保存建议 请将未开封使用的试剂盒保存于2-8℃;启用后的试剂盒,请参考说明书保存各个组分。
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    自备耗材

    • 酶标仪(能测 450 nm 处的吸光度)
    • 多通道移液器或自动洗板机
    • 恒温箱、低温离心机
    • 可调节式移液枪及枪头
    • 去离子水
  • 酶标仪(能测 450 nm 处的吸光度)
  • 多通道移液器或自动洗板机
  • 恒温箱、低温离心机
  • 可调节式移液枪及枪头
  • 去离子水
  • 试剂准备

    注意:提前 20 min 从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。如果浓缩试剂有结晶析出,轻轻加热直至完全溶解。

    注意:

    1× Wash Buffer: 用去离子水 1:20 稀释 × Wash Buffer (20×) 得到 1× Wash Buffer,4℃保存。

    样本制备

    1. 血清:使用血清分离管,让样品在室温下凝结 30 min,然后 1,000 g 离心 15 min。取上层血清立即测定或分装 -20℃保存,避免反复冻融。

    1. 血清:

    2. 血浆:使用 EDTA、肝素或柠檬酸盐作为抗凝剂收集血浆。在收集后 30 min 内 1,000 g 离心 15 min。立即测定或分装 -20℃保存,避免反复冻融。

    2. 血浆:

    注意:不要使用严重溶血或脂血的标本。如果样品要在 24 h 内使用,则可以将其储存在 2-8℃。避免反复冻融。测定前,应将冷冻样品缓慢升至室温并轻轻混合。

    注意:

    实验步骤

    1. 从板框上取下多余的板条,将它们放回装有干燥剂包的铝箔袋中,然后重新密封。
    1.
    2. 每孔加入 50 μL fT4 Standard 或样品。建议所有标准品和样品做复孔。设置一个不加任何溶液空白孔。
    2.
    3. 每孔加入 50 μL Biotin Conjugated fT4(空白孔不加)。混匀,给酶标板覆膜,37℃ 孵育 1 h。
    3.
    4. 除去每孔中的液体并洗涤,重复该过程总共洗涤三次。使用多通道移液器或自动清洗机每孔加入 250 μL 1×Wash Buffer 进行洗涤,然后静置 10 s。完全去除液体对于获得良好性能至关重要。最后一次洗涤后,倒置酶标板并用干净的纸巾吸干以除去任何剩余的 1× Wash Buffer。
    4.
    5. 每孔加入 50 μL Avidin-HRP(空白孔不加)。混匀,给酶标板覆膜,37℃ 孵育 30 min。
    5.
    6. 按照步骤 4 重复洗涤过程。
    6.
    7. 每孔加入 50 μL HRP Substrate A 和 50 μL HRP Substrate B,混匀,给酶标板覆膜,37℃ 避光孵育 15 min,远离气流和其他温度波动。
    7.
    8. 每孔加入 50 μL Stop Solution,Stop Solution 应按照与 HRP Substrate 相同的顺序加到板中。孔中的颜色应从蓝色变为黄色。如果孔中的颜色为绿色或颜色变化不均匀,请轻轻敲击板以确保彻底混合。
    8.
    9. 30 min 内测定每孔 450 nm 处的吸光值。
    9.

    结果计算

    1. 计算每个标准品和样品的复孔平均 OD 值。
    1.
    2. 标准曲线的绘制:以标准溶液浓度为 x 轴,各标准品的平均吸光度为 y 轴,绘制标准曲线。可以使用计算机软件来创建标准曲线。
    2.

    常见问题

    Q: 普通大分子蛋白ELISA检测的原理是什么?

    A: 双抗体夹心法是检测大分子抗原最常用的方法。双抗夹心法ELISA是将特异性抗体结合到固相载体上形成固相抗体,然后和待检样本中的相应抗原结合形成免疫复合物,洗涤后再加酶标记抗体,与免疫复合物中抗原结合形成酶标抗体— 抗原—固相抗体复合物,加底物显色,判断抗原含量;

    Q: 试剂盒检测一个样品孔,一般用多少样本量?

    A: 稀释好的液体样本100 μL,细胞样本1-2×106个cells,组织样本1 g左右。

    Q: 为什么我们的ELISA试剂盒的最大吸收波长是450nm?

    A: 因为TMB显色染料经过硫酸终止之后在450nm处有最大吸收峰,所以用酶标仪检测450nm处的OD值。

    Q: 开封之后,未用完的ELISA酶标板的保存方法和保存时间?

    A: 开封的酶标板应密封后在-20度保存,能保存一个月。

    Q: ELISA实验制作标曲,X轴和Y轴弄反了,是否对结果有影响?

    A: 无影响,只是计算的时候需注意,样本的OD值应代入计算式的X值中。

    Q: 样本前处理:血加在抗凝管里后,离心出来的是血清还是血浆?

    A: 血浆。

    Q: 该系列试剂盒能否满足客户间断性采样的要求?

    A: 可以满足,连续取的样本如果1周内检测,需保存于4℃;如1个月内检测,按一次使用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融;如6个月内检测,分装保存于-80℃,避免反复冻融。

    Q: ELISA试验的标准曲线和测定的重复性差,这是由什么原因造成的?

    A: 1. 加样本及试剂量不准,孔间不一致----重复测定时保持与上次操作条件一致; 2. 加样过快,孔间发生污染----加样不能过快; 3. 加样本及试剂时,加在孔壁上部非包被区----加样时枪头不要贴壁; 4. 不同批号试剂盒中组分混用----不同批号试剂盒中组分不可混用; 5. 温育时间、洗板、显色时间不一致----操作时间保持一致; 6. 试剂/样品没有混匀----充分混匀样品和试剂。

    Q: 该类试剂盒的指标如何查找?

    A: 建议在Abbkine官网搜索“KET”,客户可以了解到相关指标。如有疑问,请联系support@abbkine.com进行详细咨询。

    Q: 该类试剂盒的标准品稀释液中偶见沉淀,应如何处理?

    A: 为了避免基质效应,ELISA 试剂盒针对不同的样本都会配备不同的稀释液。一些稀释液,特别是血清稀释液的配方中,会含有一些动物蛋白成分(比如 BSA)和溶解度较低的盐。这些成分在低温或是稀释液微量蒸发的情况下,会出现结晶或浑浊的现象。在试剂盒开发的过程中,我们研发人员开展的大量验证实验表明,稀释液的沉淀不会影响试剂的使用性能。

    文献引用

    请等待最新文献信息更新。

    相关资讯

    专业技术支持

    我们的技术团队为您提供全方位的产品支持服务

    实验方案设计

    根据您的研究目标,提供个性化的实验设计方案

    问题排查

    经验丰富的技术专家协助您解决实验中遇到的问题

    在线技术咨询

    7x24小时在线技术支持,随时为您答疑解惑

    免费样品申请

    提供免费样品试用,让您先试后买更放心

    400电话
    在线咨询
    技术支持
    公众号
    公众号
    返回顶部