蛋白质定量试剂盒(BCA法)

Name: 蛋白质定量试剂盒(BCA法)
Brand: Abbkine
SKU: KTD3001
Price: 198 CNY
Availability: InStock

Protein Quantification Kit (BCA Assay)

产品货号

KTD3001

产品特点：

省时高效——操作步骤比传统 Lowry 法简化 4 倍，30 min 内完成显色。

灵敏精准——检测限低至 20 µg/mL，最低可测 0.4 µg 蛋白。

线性优异——20–2,000 µg/mL 范围内线性关系良好，R² 值高。

兼容性强——可耐受 5% SDS、5% Triton X-100、5% Tween-20/60/80 等常见去污剂。

稳定性好——不同蛋白分子间变异系数小，结果重现性高。

选择规格

500 T

¥198

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2500 T

¥598

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活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

亚科因生物研发的蛋白质定量试剂盒（BCA法）（Protein Quantification Kit, BCA Assay）是一种基于铜离子-BCA络合显色的比色法试剂盒，可在 20–2,000 µg/mL 的线性区间内，对细胞裂解液、组织匀浆、细胞器提取液等多种生物样本中的总蛋白浓度进行快速、稳定、高灵敏度的定量。

检测原理

蛋白质在碱性环境中将 Cu²⁺ 还原为 Cu⁺，生成的 Cu⁺ 与 BCA 形成稳定的紫色络合物，该络合物在 562 nm 处具有强吸收峰。吸光值与蛋白浓度成正比，通过标准曲线即可计算未知样本的蛋白含量。该方法灵敏度高、线性范围宽，且对大多数离子型/非离子型去污剂具有良好的耐受性。

应用领域

广泛适用于细胞器提取与染色、细胞分析、蛋白表达研究、药物筛选、生物制品质量控制等实验场景，尤其适合需要高灵敏度、宽线性范围及良好去污剂兼容性的蛋白定量需求。

产品参数

中文名称	蛋白质定量试剂盒(BCA法)
英文名称	Protein Quantification Kit (BCA Assay)
产品货号	KTD3001
检测方法	比色法
试剂盒组分	• BCA试剂A • BCA试剂B • BSA标准品 • PBS（5×）
检测范围	20-2,000 µg/mL
灵敏度	20 µg/mL
注意事项	• 1. 用酶标仪测定 562 nm 的吸光度，或在540-595 nm之间的其他波长的吸光度。 • 2. BCA 法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween20、60、80。但BCA法受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10 mM，无 EGTA，二硫苏糖醇(DTT)低于1 mM，β-巯基乙醇(β-Mercaptoethanol)低于0.01%。 • 3. 建议每次测定时都做标准曲线。因为BCA法测定时颜色会随着时间的延长不断加深，并且显色反应会因温度升高而加快。 • 4. 如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景，请使用蛋白质定量试剂盒（Bradford法）（货号：KTD3002）。
保存建议	常温保存，保质期12个月
运输条件	常温运输
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

样本制备

样本溶液：根据实验需求制备样本，用 1×PBS稀释样本至浓度在 20-2,000 µg/mL范围内。如果样品不足 20 µL，需加 1×PBS补足到 20 µL，待测样本加入量可按照经验值进行估计。

实验步骤

酶标仪预热 30 min以上，调节波长到 562 nm。
操作表（下述操作在 96孔板中进行）：

序号	2 mg/mL标准品体积（µL）	1×PBS体积（µL）	标准品浓度（µg/mL）
Std.1	0	20	0
Std.2	1	19	100
Std.3	2	18	200
Std.4	4	16	400
Std.5	8	12	800
Std.6	10	10	1,000
Std.7	15	5	1,500
Std.8	20	0	2,000

3. 制备 20 μL标准品后，加 20 μL样本到 96孔板，每孔再加入 200 μL BCA工作液，混匀，37℃孵育 20-30 min，在 562 nm波长下测量 OD 值。空白孔（0 µg/mL）记为 A 空，标准孔记为 A 标，样本孔记为 A 样。计算ΔA 标=A 标-A 空，ΔA 样=A 样-A 空。

注意：实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。BCA法测定蛋白浓度时，颜色会随着时间的延长不断加深，并且显色反应会因温度升高而加快。如果浓度较低，适合在较高温度孵育，或适当延长孵育时间。

结果计算

注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

标准曲线的绘制：以ΔA 标为 y轴，标准品浓度为 x轴，绘制标准曲线。
样本浓度的计算：将样本的ΔA 样带入方程得到 x值（µg/mL）。

注意：若样本进一步稀释，则需要再乘以进一步稀释的稀释倍数 n。

结果展示

典型标准曲线-以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。

BSA浓度（µg/mL）

注意事项

用酶标仪测定 562 nm的吸光度，或在 540-595 nm之间的其他波长的吸光度。
BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达 5%的 SDS，5%的 Triton X-100，5%的 Tween20、60、80。但 BCA法受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保 EDTA低于 10 mM，无 EGTA，二硫苏糖醇(DTT)低于 1 mM，β-巯基乙醇(β-Mercaptoethanol)低于 0.01%。
建议每次测定时都做标准曲线。因为 BCA法测定时颜色会随着时间的延长不断加深，并且显色反应会因温度升高而加快。
如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景，请使用蛋白质定量试剂盒（Bradford法）（货号：KTD3002）。
此试剂盒的蛋白浓度范围是 20-2,000 µg/mL。