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F-actin染色试剂盒(橙色荧光)-TraKine™

TraKine™ F-actin Staining Kit (Orange Fluorescence)

产品货号
KTC4009

产品特点:

  • 专利橙色荧光鬼笔环肽(Ex/Em = 593/614 nm),光稳定性优于传统FITC/Rhodamine标记物
  • 优化的两步染色流程,兼容甲醛固定、Triton X-100透化的细胞或组织切片
  • 200×高浓度储存液,可按需稀释,灵活适配不同细胞类型与通量需求
  • 试剂盒仅含2个组分,简化实验准备,降低批次差异
  • 选择规格

    50 T
    ¥516
    现货(当天发货)
    300 T
    ¥1616
    现货(次日发货)
    1000 T
    ¥4506
    现货(次日发货)
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    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    TraKine™ F-actin染色试剂盒(橙色荧光)(TraKine™ F-actin Staining Kit, Orange Fluorescence) 是一套基于专利橙色荧光鬼笔环肽的即用型标记系统,专为甲醛固定并透化处理的细胞、组织切片或无细胞体系中的F-actin骨架进行高特异性、高亮度成像而设计。

    背景知识
    鬼笔环肽(phalloidin)最初从剧毒伞形毒蕈 Amanita phalloides 中分离,是一种双环七肽毒素。其分子内部在半胱氨酸与色氨酸之间形成独特的硫醚桥,该结构赋予鬼笔环肽对F-肌动蛋白(F-actin)极高的亲和力与选择性。当环境pH升高时,硫醚键断裂,亲和力随之丧失。将鬼笔环肽与专利橙色荧光染料偶联后,即可在Ex/Em = 593/614 nm波段实现F-actin的稳定、明亮标记,广泛用于细胞骨架动态、细胞迁移、形态学及药物筛选研究。

    应用领域
    适用于细胞生物学、神经科学、肿瘤研究及药物开发等方向,可在激光共聚焦、宽场荧光或高内涵成像平台上对培养细胞、3D类器官、冰冻或石蜡切片中的F-actin网络进行定位、定量及形态学分析。

    F-actin染色试剂盒(橙色荧光)-TraKine™

    产品参数

    中文名称 F-actin染色试剂盒(橙色荧光)-TraKine™
    英文名称 TraKine™ F-actin Staining Kit (Orange Fluorescence)
    产品货号 KTC4009
    试剂盒组分 • 鬼笔环肽 (橙色荧光) (200×)
    • 实验缓冲液 (5×)
    注意事项 由于不同细胞类型的最佳染色条件可能不同,我们建议您根据实验确定自己最佳的浓度。
    保存建议 请参阅说明书中各个组分的存储条件。自发货之日起,在推荐温度下至少稳定6个月。
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    自备耗材

    • 荧光显微镜
    • 96孔板(细胞培养)
    • 移液器及吸头
    • 去离子水
    • 磷酸盐缓冲液(PBS)pH 7.4
    • 4%多聚甲醛(PBS配制)
    • 0.1% Triton X-100(PBS配制)

    试剂准备

    Phalloidin (Orange Fluorescence) (200×):使用前预热至室温。用不完的试剂分装保存,避免反复冻融。-20℃

    Assay Buffer (5×):使用前,用去离子水稀释成1×,然后加热至37℃。保存4℃。

    Staining Solution:向1 mL 1× Assay Buffer中加入5 µL Phalloidin (Orange Fluorescence) (200×),根据实验数量相应增加体积。

    试剂盒组分

    试剂盒组分 规格 储存条件
    Phalloidin (Orange Fluorescence) (200×) 25 µL (50T)
    150 µL (300T)
    500 µL (1000T)
    -20℃避光
    Assay Buffer (5×) 1 mL (50T)
    6 mL (300T)
    20 mL (1000T)
    4℃

    实验步骤

    注意:不同细胞最佳染色条件可能不同,建议通过预实验确定合适的Phalloidin (Orange Fluorescence)浓度。
    1. 在96孔培养皿里的盖玻片上直接接种细胞。实验前在37℃的5% CO2培养箱中孵育以上24h。
    2. 用PBS洗涤细胞2次。
    3. 用预冷4%多聚甲醛在冰上固定细胞15-30 min。
    4. PBS洗涤细胞3次。
    5. 室温下,细胞在0.1% Triton X-100的PBS中透膜10 min。
    6. PBS洗涤细胞3次。
    7. 每个细胞孔(96孔板)加入100 µL staining solution,室温下避光染色30 min。
    8. 用PBS洗涤细胞2次。
    9. 在荧光显微镜下观察细胞。橙色荧光染料标记的鬼笔环肽具有良好的光稳定性,可以在PBS中对样品成像。但为了获得最佳效果,观察时可以使用抗荧光淬灭剂。
    注意:橙色荧光染料标记的鬼笔环肽不具有细胞渗透性,因此未广泛用于活细胞标记。据报道,活细胞可通过胞饮作用或其它未知机制被标记上。通常标记活细胞需要更多的染料。可以将橙色荧光染料标记的鬼笔环肽注射到细胞中,以监测肌动蛋白的分布和细胞运动。
    注意:甲醇会损坏肌动蛋白。在固定过程中,避免含有任何甲醇成份。优选固定剂为无甲醇甲醛。

    常见问题

    暂无相关常见问题。如有疑问,请联系我们的技术支持团队。

    文献引用

    3D printing of lithium osteogenic bioactive composite scaffold for enhanced bone regeneration

    杂志名称: Composites Part B: Engineering | 作者: Wang, Wenzhao, et al.

    IF: 13 | 发表时间: 2023

    Hypoxia preconditioned DPSC-derived exosomes regulate angiogenesis via transferring LOXL2

    杂志名称: Experimental Cell Research | 作者: Q Ma, G Wang, N Li, X Wang, X Kang, Y Mao

    IF: 4 | 发表时间: 2023

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