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土壤酸性转化酶(S-AI)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
CheKine™ Micro Soil Acid Invertase (S-AI) Activity Assay Kit
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活动截止时间:2024年1月31日
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CheKine™ 土壤酸性转化酶(S-AI)活性检测试剂盒(微量法)(CheKine™ Micro Soil Acid Invertase (S-AI) Activity Assay Kit, Cat# KTB4027)是一款专为土壤样本设计的微量比色试剂盒,可在 96 孔板内快速测定土壤酸性转化酶活性,为研究土壤碳循环、微生物代谢活性及肥料效应提供可靠数据。
土壤酸性转化酶(S-AI)是土壤微生物在pH 4.5–5.0条件下催化蔗糖不可逆水解为果糖与葡萄糖的关键酶,其活性直接反映土壤微生物对有机碳的利用能力。CheKine™ 试剂盒基于3,5-二硝基水杨酸(DNS)显色法:S-AI 催化蔗糖生成的还原糖与 DNS 在沸水浴中反应,生成棕红色氨基化合物,于510 nm处产生特征吸收。在一定范围内,510 nm 吸光度的增加速率与 S-AI 活性成正比,从而实现对 0.06–0.4 mg/mL(23.04–153.6 U/g 土壤)范围内酶活性的定量。
本试剂盒适用于土壤微生物生态学、农业科学、环境科学及土壤碳循环研究,可用于评估不同施肥措施、土地利用方式或气候变化对土壤酸性转化酶活性的影响,为土壤健康诊断与可持续管理提供实验依据。
| 中文名称 | 土壤酸性转化酶(S-AI)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Soil Acid Invertase (S-AI) Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB4027 |
| 检测类型 | 水土检测 |
| 样本类型 | 土壤样本 |
| 试剂盒组分 | • Reagent I •Reagent Ⅱ •Reagent Ⅲ •Standard |
| 检测范围 | 0.06-0.4 mg/mL (23.04-153.6 U/g 土壤) |
| 灵敏度 | 0.06 mg/mL (23.04 U/g 土壤) |
| 分子 | 土壤酸性转化酶(S-AI) |
| 检测指标 | 土壤酸性转化酶(S-AI) |
| 注意事项 | •推荐使用新鲜样本,如果不立即进行实验,样本可在-80℃保存数周。测定时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 4℃,避光保存 6 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输(蓝冰) |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。 |
注意:正式检测前,建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。
ReagentⅠ:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
Reagent II:临用前配制;每瓶加入 25 mL ReagentⅠ,充分溶解。用不完的试剂 4℃保存 2周。
Reagent III:即用型;使用前,平衡到室温;4℃避光保存。
Standard:临用前配制;10 mg葡萄糖加入 1 mL去离子水,充分溶解得 10 mg/mL,用不完的试剂 4℃保存 2周。使用 10 mg/mL Standard,按照下表所示,进一步稀释标准品:
| 序号 | Standard体积(μL) | ReagentⅠ体积(μL) | 浓度(mg/mL) |
|---|---|---|---|
| Std.1 | 40 μL of 10 mg/mL Standard | 960 | 0.4 |
| Std.2 | 30 μL of 10 mg/mL Standard | 970 | 0.3 |
| Std.3 | 20 μL of 10 mg/mL Standard | 980 | 0.2 |
| Std.4 | 10 μL of 10 mg/mL Standard | 990 | 0.1 |
| Std.5 | 8 μL of 10 mg/mL Standard | 992 | 0.08 |
| Std.6 | 6 μL of 10 mg/mL Standard | 994 | 0.06 |
注意:每次实验,请使用新配制的标准品;配制好的标准品需要在 4 h之内使用。
注意:推荐使用新鲜土壤样本。
土壤样本:新鲜土样自然风干或 37度烘箱风干,过 30-50目筛。
| 试剂 | 测定孔 | 对照孔 | 标准孔 | 空白孔 |
|---|---|---|---|---|
| 风干土壤样本(g) | 0.05 | 0.05 | 0 | 0 |
| Standard (μL) | 0 | 0 | 400 | 0 |
| ReagentⅠ(μL) | 0 | 400 | 0 | 400 |
| Reagent II (μL) | 400 | 0 | 0 | 0 |
混匀,37℃孵育 30 min,置沸水浴中 10 min(盖紧,防止水分散失),流水冷却后充分混匀(以保证浓度不变),10,000 g,25℃离心 10 min,取上清液。
| 试剂 | 测定孔 | 对照孔 | 标准孔 | 空白孔 |
|---|---|---|---|---|
| 上清液 (μL) | 200 | 200 | 200 | 200 |
| Reagent III (μL) | 100 | 100 | 100 | 100 |
注意:空白管和标准管只需做 1-2次。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果加入 Reagent III,沸水浴 10 min后有混浊物出现,建议 10,000 g,25℃离心 5 min后,取上清测定吸光度。如果ΔA 测定大于 2,样本可用 ReagentⅠ进一步稀释,计算结果乘以稀释倍数,或减少提取用样本量。如果ΔA 测定小于 0.03,增加样本量。
注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
以ΔA 标准为 x轴,标准溶液浓度为 y轴,绘制标准曲线,得到标准方程,将ΔA 测定代入方程得到 y (mg/mL)。
单位的定义:37℃每 g土壤每天产生 1 mg还原糖定义为一个酶活力单位。
V 反应:反应体系的体积:0.4 mL;T:反应时间,1/48 d; W:样本质量。
A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
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