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土壤β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™

CheKine™ Micro Soil β-glucosidase (S-β-GC) Activity Assay Kit

产品货号
KTB4022

产品特点:

  • 验证的样本类型齐全,覆盖多种土壤基质
  • 微量法设计,节省样本与试剂用量,操作简便
  • 显色反应稳定,400 nm 处读取吸光度,结果直观
  • -20 ℃避光保存 6 个月,冰袋运输,方便实验室日常储备
  • 选择规格

    48 T/24 S
    ¥516
    现货(次日发货)
    96 T/48 S
    ¥969
    现货(次日发货)
    🎉 限时优惠

    买2送1活动进行中!购买任意2个规格产品,免费赠送100μL装一支。

    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    CheKine™ 土壤β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)活性检测试剂盒(微量法)(CheKine™ Micro Soil β-glucosidase (S-β-GC) Activity Assay Kit) 是一款基于微量比色法的试剂盒,可快速、便捷地测定土壤样本中β-葡萄糖苷酶活性,为研究土壤碳循环与微生物代谢提供可靠数据。

    土壤β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键,生成葡萄糖,是纤维素分解酶系中重要组成成分之一,在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。CheKine™ 土壤β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)活性检测试剂盒(微量法)提供了一种简单、方便、快速的 S-β-GC 活性检测方法,适用于土壤样本。其原理是 S-β-GC 能够催化对-硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在 400 nm 有特征光吸收。

    应用领域

    本试剂盒主要用于细胞代谢研究中的土壤微生物碳循环分析,适用于农业、生态、环境科学等领域的土壤样本检测,帮助科研人员评估土壤有机质分解活性与微生物功能多样性。

    土壤β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™

    产品参数

    中文名称 土壤β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
    英文名称 CheKine™ Micro Soil β-glucosidase (S-β-GC) Activity Assay Kit
    产品货号 KTB4022
    检测类型 水土检测
    样本类型 土壤样本
    试剂盒组分 • Reagent I
    •Reagent Ⅱ
    •Reagent Ⅲ
    •Standard
    分子 土壤β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)
    检测指标 土壤β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)
    注意事项 •推荐使用新鲜样本,如果不立即进行实验,样本可在-80℃保存数周。测定时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在4 h内完成样品解冻。
    •实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。
    保存建议 -20℃,避光保存 6 个月
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    注意:正式检测前,建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

    自备耗材

    • 酶标仪或可见分光光度计(能测 400 nm处的吸光度)
    • 96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
    • 烘箱、30-50目筛、离心机、恒温水浴锅、分析天平
    • 去离子水、甲苯

    试剂准备

    Reagent I:临用前配制;加入 10 mL去离子水,充分溶解备用;用不完的试剂 20℃分装避光保存一个月,禁止反复冻融。

    Reagent II:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。

    Reagent III:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。

    Standard:5 mM对硝基苯酚标准液,即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。

    注意:Standard有毒,建议在通风橱进行实验。

    标准品制备

    使用 5 mM对硝基苯酚标准液,按照下表所示,进一步稀释成标准品:

    序号Standard体积去离子水体积(µL)浓度(μM)
    Std.120 µL 5 mM Standard980100
    Std.2500 µL of Std.1 (100 μM)50050
    Std.3500 µL of Std.2 (50 μM)50025
    Std.4500 µL of Std.3 (25 μM)50012.5
    Std.5500 µL of Std.4 (12.5 μM)5006.25
    Std.6500 µL of Std.5 (6.25 μM)5003.125
    Std.7500 µL of Std.6 (3.125 μM)5001.563
    Blank05000(空白管)

    注意:每次实验都要做一次标准品检测,制作标曲;稀释后的标准品溶液不稳定,必须在 4小时内使用。

    样本制备

    注意:推荐使用新鲜样本

    新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干,过 30-50目筛。

    实验步骤

    1. 酶标仪或可见分光光度计预热 30 min,调节波长到 400 nm。可见分光光度计用去离子水调零。

    2. 操作表(下述操作在 1.5 mL EP管中进行):

    试剂测定管(μL)对照管(μL)标准管(μL)
    风干土样(g)0.020.020
    甲苯10100
    室温振荡混匀15 min90℃振荡混匀 15 min-
    ReagentⅠ13000
    去离子水01300
    ReagentⅡ1601600

    混匀,37℃振荡反应 1 h后,90℃水浴 5 min(盖紧,防止水分散失),流水冷却,10,000 g,25℃离心 10 min,取上清液(在 1.5 mL EP管中加入下列试剂)

    试剂测定管(μL)对照管(μL)标准管(μL)
    上清液84840
    Standard0084
    Reagent III156156156

    充分混匀,10,000 g,25℃离心 5 min后,取 200 μL转移至 96孔板或微量玻璃比色皿中,于 400 nm处测定吸光值,分别记为 A 测定、A 对照、A 标准和 A 空白,计算ΔA 测定=A 测定-A 对照、ΔA 标准=A 标准-A 空白。

    注意:标准曲线只需测定 1次,每个测定孔都需设置一个对照孔。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验,如果ΔA 测定小于 0.005,可适当增大样本量,同步修改计算公式;如果ΔA 测定大于 0.3,样本上清液可用去离子水进一步稀释,计算结果乘以稀释倍数。

    结果计算

    注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

    1. 标准曲线的绘制

    以标准溶液浓度为 x轴,ΔA 标准为 y轴,绘制标准曲线,得到标准方程,将ΔA 测定带入方程得到 x (μM)。

    2. S-β-GC 活性的计算:

    单位的定义:每天每 g土样中产生 1 μmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

    S-β-GC (U/g 土样)=x×V 反总÷W÷T=0.0072×x÷W

    T:反应时间,1 h=1/24 d;V 反总:反应体系总体积:3×10-4 L;W:样本质量,0.02 g

    常见问题

    Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多?

    A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。

    Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证?

    A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该产品线检测可使用分光光度计替代酶标仪吗?

    A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。

    Q: 该类试剂盒使用量应如何计算?

    A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该系列试剂盒可以检测蓝藻等微生物样本吗?

    A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    文献引用

    请等待最新文献信息更新。

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