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土壤脲酶(S-UE)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™

CheKine™ Micro Soil Urease (S-UE) Activity Assay Kit

产品货号
KTB4018

产品特点:

  • 验证的样本类型齐全,涵盖不同质地与 pH 的土壤
  • 微量法设计,节省试剂与样本,适合高通量实验
  • 操作步骤简洁,显色稳定,结果重复性好
  • 4 ℃避光保存 6 个月,冰袋运输,方便实验室日常管理
  • 选择规格

    48 T/24 S
    ¥359
    现货(次日发货)
    96 T/48 S
    ¥659
    现货(次日发货)
    🎉 限时优惠

    买2送1活动进行中!购买任意2个规格产品,免费赠送100μL装一支。

    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    CheKine™ 土壤脲酶(S-UE)活性检测试剂盒(微量法)是一款专为土壤样本设计的微量比色试剂盒,利用靛酚蓝显色反应,通过测定脲酶水解尿素释放的 NH₃-N 含量,快速评估土壤脲酶活性,为土壤氮素循环研究提供可靠数据。

    土壤脲酶(S-UE)能够催化尿素水解,生成氨和碳酸,其活性与土壤微生物数量、有机质含量、全氮及速效氮水平呈正相关,常被用作衡量土壤氮素供应能力的重要生物化学指标。CheKine™ 土壤脲酶(S-UE)活性检测试剂盒采用靛酚蓝比色法:在碱性条件下,脲酶水解尿素产生的 NH₃-N 与试剂反应生成蓝色靛酚蓝复合物,在 630 nm 处具有特征吸收峰;吸光度与 NH₃-N 浓度成正比,从而间接反映土壤脲酶活性。整个流程简单、快速,适用于多种土壤类型。

    应用领域

    本试剂盒广泛应用于土壤科学、农业生态、环境修复及微生物生态学研究,可用于评估施肥管理、土地利用变化及污染胁迫对土壤氮素转化效率的影响,为精准农业与可持续土壤管理提供数据支持。

    土壤脲酶(S-UE)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™

    产品参数

    中文名称 土壤脲酶(S-UE)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
    英文名称 CheKine™ Micro Soil Urease (S-UE) Activity Assay Kit
    产品货号 KTB4018
    检测类型 水土检测
    样本类型 土壤样本
    试剂盒组分 • Reagent I
    •Reagent Ⅱ
    •Reagent Ⅲ A
    •Reagent Ⅲ B
    •Reagent Ⅳ
    •NH4Cl Standard(1 mmol/mL)
    分子 土壤脲酶(S-UE)
    检测指标 土壤脲酶(S-UE)
    注意事项 •推荐使用新鲜样本,如果不立即进行实验,样本可在-80℃保存数周。测定时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在4 h内完成样品解冻。
    •实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。
    保存建议 4℃,避光保存 6 个月
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    注意:正式检测前,建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

    自备耗材

    • 酶标仪或可见分光光度计(能测 630 nm处的吸光度)
    • 96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
    • 烘箱、30-50目筛、离心机、恒温水浴锅、分析天平
    • 去离子水、甲苯

    试剂准备

    ReagentⅠ:对于 48 T,临用前加入 4.5 mL去离子水;对于 96 T,临用前加入 9 mL去离子水;充分溶解待用,用不完的试剂 4℃保存两周。

    ReagentⅡ:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。

    ReagentⅢ:临用前将 ReagentⅢA全部倒入 ReagentⅢB中混合,待用;用不完的试剂 4℃保存一周。

    ReagentⅣ:即用型;使用前,平衡到室温;4℃避光保存。

    注意:ReagentⅢA和 ReagentⅣ有毒且有刺激性气味,建议在通风橱进行实验。

    试剂盒组分

    试剂盒组分规格储存条件
    ReagentⅠ Powder×1 vial4℃
    ReagentⅡ14 mL / 28 mL4℃
    ReagentⅢA0.3 mL / 0.6 mL4℃,避光保存
    ReagentⅢB1.2 mL / 2.4 mL4℃,避光保存
    ReagentⅣ1.5 mL / 3 mL4℃,避光保存
    NH4Cl Standard(1 mmol/mL)1 mL4℃

    标准曲线设置

    用去离子水将 1 mmol/mL NH4Cl Standard 稀释成 1 μmol/mL。按下表所示,用去离子水将 1 μmol/mL NH4Cl Standard稀释至 0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125、0.01563 μmol/mL。

    序号不同浓度的标准品的体积(µL)去离子水的体积(µL)标准品浓度(μmol/mL)
    Std.1400 µL of Standard01
    Std.2200 µL of Std.1 (1 μmol/mL)2000.5
    Std.3200 µL of Std.2 (0.5 μmol/mL)2000.25
    Std.4200 µL of Std.3 (0.25 μmol/mL)2000.125
    Std.5200 µL of Std.4 (0.125 μmol/mL)2000.0625
    Std.6200 µL of Std.5 (0.0625 μmol/mL)2000.03125
    Std.7200 µL of Std.6 (0.03125 μmol/mL)2000.01563
    Blank02000(空白孔)
    注意:每次实验都要做一次标准品检测,制作标曲;稀释后的标准品溶液不稳定,必须在 4小时内使用。

    样本制备

    注意:推荐使用新鲜样本

    新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干,过 30-50目筛。

    实验步骤

    1. 酶标仪或可见分光光度计预热 30 min,调节波长到 630 nm。可见分光光度计用去离子水调零。

    2. 培养(下述操作在 1.5 mL离心管中操作):

    试剂测定管(μL)对照管(μL)
    风干土样(g)0.050.05
    甲苯2020
    振荡混匀,室温静置 15 min--
    ReagentⅠ900
    去离子水090
    ReagentⅡ190190
    混匀,放入 37℃水浴培养 24 h后,10,000 g,25℃离心 10 min,取上清液。--

    3. 将培养结束的上清液稀释 10倍(取 0.1 mL上清液,加入 0.9 mL去离子水)。

    4. 测氨量(下述操作在 96孔板或微量玻璃比色皿中操作):

    试剂测定孔(μL)对照孔(μL)标准孔(μL)
    稀释后的上清液80800
    Standard0080
    ReagentⅢ151515
    ReagentⅣ151515
    充分混匀,室温放置 20 min---
    去离子水909090
    混匀后,于 630 nm测定吸光值,记为 A 测定、A 对照、A 标准、A 空白,计算ΔA 测定=A 测定-A 对照、ΔA 标准=A 标准-A 空白。---
    注意:标准曲线只需测定 1次,每个测定孔都需设置一个对照孔。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测定小于 0.005可适当加大样本量。如果ΔA 测定大于 0.5,样本可用去离子水进一步稀释,计算结果乘以稀释倍数,或减少提取用样本量。

    结果计算

    注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

    1. 标准曲线的绘制

    以标准液浓度为 x轴,ΔA 标准为 y轴绘制标准曲线。将ΔA 测定代入标准曲线公式计算出 x(μmol/mL)。

    2. S-UE活力的计算

    单位的定义:每天每 g土样中产生 1 μmol NH3-N定义为一个酶活力单位。

    S-UE (U/g 土样)=x×10×V 反总÷W÷T=3×x÷W

    10:稀释倍数;T:反应时间,1 d; V 反总:反应体系总体积:0.3 mL;W:样本质量,0.05 g

    常见问题

    Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多?

    A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。

    Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证?

    A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该产品线检测可使用分光光度计替代酶标仪吗?

    A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。

    Q: 该类试剂盒使用量应如何计算?

    A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该系列试剂盒可以检测蓝藻等微生物样本吗?

    A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    文献引用

    请等待最新文献信息更新。

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