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土壤脲酶(S-UE)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™
CheKine™ Micro Soil Urease (S-UE) Activity Assay Kit
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活动截止时间:2024年1月31日
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CheKine™ 土壤脲酶(S-UE)活性检测试剂盒(微量法)是一款专为土壤样本设计的微量比色试剂盒,利用靛酚蓝显色反应,通过测定脲酶水解尿素释放的 NH₃-N 含量,快速评估土壤脲酶活性,为土壤氮素循环研究提供可靠数据。
土壤脲酶(S-UE)能够催化尿素水解,生成氨和碳酸,其活性与土壤微生物数量、有机质含量、全氮及速效氮水平呈正相关,常被用作衡量土壤氮素供应能力的重要生物化学指标。CheKine™ 土壤脲酶(S-UE)活性检测试剂盒采用靛酚蓝比色法:在碱性条件下,脲酶水解尿素产生的 NH₃-N 与试剂反应生成蓝色靛酚蓝复合物,在 630 nm 处具有特征吸收峰;吸光度与 NH₃-N 浓度成正比,从而间接反映土壤脲酶活性。整个流程简单、快速,适用于多种土壤类型。
本试剂盒广泛应用于土壤科学、农业生态、环境修复及微生物生态学研究,可用于评估施肥管理、土地利用变化及污染胁迫对土壤氮素转化效率的影响,为精准农业与可持续土壤管理提供数据支持。
| 中文名称 | 土壤脲酶(S-UE)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Soil Urease (S-UE) Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB4018 |
| 检测类型 | 水土检测 |
| 样本类型 | 土壤样本 |
| 试剂盒组分 | • Reagent I •Reagent Ⅱ •Reagent Ⅲ A •Reagent Ⅲ B •Reagent Ⅳ •NH4Cl Standard(1 mmol/mL) |
| 分子 | 土壤脲酶(S-UE) |
| 检测指标 | 土壤脲酶(S-UE) |
| 注意事项 | •推荐使用新鲜样本,如果不立即进行实验,样本可在-80℃保存数周。测定时,应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时,需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 4℃,避光保存 6 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输(蓝冰) |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。 |
ReagentⅠ:对于 48 T,临用前加入 4.5 mL去离子水;对于 96 T,临用前加入 9 mL去离子水;充分溶解待用,用不完的试剂 4℃保存两周。
ReagentⅡ:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
ReagentⅢ:临用前将 ReagentⅢA全部倒入 ReagentⅢB中混合,待用;用不完的试剂 4℃保存一周。
ReagentⅣ:即用型;使用前,平衡到室温;4℃避光保存。
| 试剂盒组分 | 规格 | 储存条件 |
|---|---|---|
| ReagentⅠ Powder | ×1 vial | 4℃ |
| ReagentⅡ | 14 mL / 28 mL | 4℃ |
| ReagentⅢA | 0.3 mL / 0.6 mL | 4℃,避光保存 |
| ReagentⅢB | 1.2 mL / 2.4 mL | 4℃,避光保存 |
| ReagentⅣ | 1.5 mL / 3 mL | 4℃,避光保存 |
| NH4Cl Standard(1 mmol/mL) | 1 mL | 4℃ |
用去离子水将 1 mmol/mL NH4Cl Standard 稀释成 1 μmol/mL。按下表所示,用去离子水将 1 μmol/mL NH4Cl Standard稀释至 0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125、0.01563 μmol/mL。
| 序号 | 不同浓度的标准品的体积(µL) | 去离子水的体积(µL) | 标准品浓度(μmol/mL) |
|---|---|---|---|
| Std.1 | 400 µL of Standard | 0 | 1 |
| Std.2 | 200 µL of Std.1 (1 μmol/mL) | 200 | 0.5 |
| Std.3 | 200 µL of Std.2 (0.5 μmol/mL) | 200 | 0.25 |
| Std.4 | 200 µL of Std.3 (0.25 μmol/mL) | 200 | 0.125 |
| Std.5 | 200 µL of Std.4 (0.125 μmol/mL) | 200 | 0.0625 |
| Std.6 | 200 µL of Std.5 (0.0625 μmol/mL) | 200 | 0.03125 |
| Std.7 | 200 µL of Std.6 (0.03125 μmol/mL) | 200 | 0.01563 |
| Blank | 0 | 200 | 0(空白孔) |
新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干,过 30-50目筛。
1. 酶标仪或可见分光光度计预热 30 min,调节波长到 630 nm。可见分光光度计用去离子水调零。
| 试剂 | 测定管(μL) | 对照管(μL) |
|---|---|---|
| 风干土样(g) | 0.05 | 0.05 |
| 甲苯 | 20 | 20 |
| 振荡混匀,室温静置 15 min | - | - |
| ReagentⅠ | 90 | 0 |
| 去离子水 | 0 | 90 |
| ReagentⅡ | 190 | 190 |
| 混匀,放入 37℃水浴培养 24 h后,10,000 g,25℃离心 10 min,取上清液。 | - | - |
3. 将培养结束的上清液稀释 10倍(取 0.1 mL上清液,加入 0.9 mL去离子水)。
| 试剂 | 测定孔(μL) | 对照孔(μL) | 标准孔(μL) |
|---|---|---|---|
| 稀释后的上清液 | 80 | 80 | 0 |
| Standard | 0 | 0 | 80 |
| ReagentⅢ | 15 | 15 | 15 |
| ReagentⅣ | 15 | 15 | 15 |
| 充分混匀,室温放置 20 min | - | - | - |
| 去离子水 | 90 | 90 | 90 |
| 混匀后,于 630 nm测定吸光值,记为 A 测定、A 对照、A 标准、A 空白,计算ΔA 测定=A 测定-A 对照、ΔA 标准=A 标准-A 空白。 | - | - | - |
1. 标准曲线的绘制
以标准液浓度为 x轴,ΔA 标准为 y轴绘制标准曲线。将ΔA 测定代入标准曲线公式计算出 x(μmol/mL)。
2. S-UE活力的计算
单位的定义:每天每 g土样中产生 1 μmol NH3-N定义为一个酶活力单位。
S-UE (U/g 土样)=x×10×V 反总÷W÷T=3×x÷W
10:稀释倍数;T:反应时间,1 d; V 反总:反应体系总体积:0.3 mL;W:样本质量,0.05 g
A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
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