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活动截止时间：2024年1月31日
CheKine™ 蔗糖磷酸合成酶（SPS）活性检测试剂盒（微量法）（CheKine™ Micro Sucrose Phosphate Synthase (SPS) Activity Assay Kit, KTB3130）是一款基于比色法的微量检测工具，专为快速、准确地测定植物组织中蔗糖磷酸合成酶（SPS）活性而设计。该试剂盒通过酶促反应与显色反应相结合，帮助研究人员在细胞代谢层面深入解析蔗糖合成途径的关键调控节点。
蔗糖不仅是植物光合作用的主要终产物，也是碳水化合物长距离运输与储存的核心形式。在蔗糖合成途径中，蔗糖磷酸合成酶（SPS, EC 2.4.1.14）以果糖-6-磷酸为底物，催化生成蔗糖磷酸，后者在蔗糖磷酸酶作用下进一步转化为蔗糖。因此，SPS 活性常被视作衡量植物碳同化效率与蔗糖积累能力的重要指标。
CheKine™ 蔗糖磷酸合成酶（SPS）活性检测试剂盒（微量法）利用 SPS 催化果糖-6-磷酸生成蔗糖磷酸，随后蔗糖磷酸与间苯二酚发生显色反应，在 480 nm 处产生特征吸收峰。吸光度变化与酶活性呈正相关，从而实现对 SPS 活性的定量分析。
本试剂盒主要应用于植物细胞代谢研究，适用于探索不同生理状态（如光合速率变化、逆境胁迫、发育阶段差异）下蔗糖合成途径的动态调控，亦可用于作物品质改良、碳分配机制解析及植物生理学教学实验等场景。
| 中文名称 | 蔗糖磷酸合成酶(SPS)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Sucrose Phosphate Synthase (SPS) Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB3130 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | •Extraction Buffer •Reagent I •Reagent Ⅱ •Reagent Ⅲ •Reagent Ⅳ •Standard |
| 分子 | FBA |
| 检测指标 | FBA |
| 注意事项 | •推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存数周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | -20℃，避光保存 6 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
1. 植物组织：称取约 0.1 g样本，加入 1 mL Extraction Buffer，冰浴匀浆，8,000 g，4℃离心 10 min，取上清液，置冰上待测。
注意：1. 如需测定蛋白浓度，推荐使用 Abbkine货号：KTD3002的蛋白质定量试剂盒（Bradford法）进行样本蛋白质浓度测定。
2. 该试剂盒提取的样本也可以适用于 KTB3140、KTB3150、KTB3110的测定。
1. 酶标仪或可见光分光光度计预热 30 min，调节波长到 480 nm。可见光分光光度计用去离子水调零。
2. 操作表（下述操作在 1.5 mL EP管中进行）：
| 试剂 | 测定管（μL） | 对照管（μL） | 空白管（μL） | 标准管（μL） |
|---|---|---|---|---|
| 样本 | 10 | 10 | 0 | 0 |
| 去离子水 | 0 | 45 | 55 | 45 |
| Standard | 0 | 0 | 0 | 10 |
| ReagentⅠ | 45 | 0 | 0 | 0 |
| 混匀后置于 25℃准确水浴 10 min | ||||
| Reagent II | 15 | 15 | 15 | 15 |
| 沸水浴中煮沸 10 min左右（盖紧，以防止水分散失），冷却 | ||||
| Reagent III | 210 | 210 | 210 | 210 |
| Reagent IV | 60 | 60 | 60 | 60 |
| 混匀，沸水浴 30 min，冷却后，取 200 μL至微量玻璃比色皿或 96孔板中，于 480 nm下测定各管吸光值，分别记为 A 测定、A 对照、A 空白、A 标准。计算ΔA 测定=A 测定-A 对照，ΔA 标准=A 标准-A 空白。 | ||||
注意：实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。标准管和空白管只需做 1-2次，每个测定管需要设置一个对照管。若 A 测定小于 0.05需适当增大样本量，若 A 测定大于 1.0，样本可用 Extraction Buffer进一步稀释，再进行实验，乘以最终的稀释倍数。
注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
活性单位定义：每mg组织蛋白每分钟催化产生 1 μg蔗糖定义为一个酶活力单位。
SPS (U/mg prot)=100×ΔA 测定÷ΔA 标准÷Cpr
SPS (U/mg prot)=(C 标准×ΔA 测定÷ΔA 标准×V 样)÷(Cpr×V 样)÷T
活性单位定义：每 g组织每分钟催化产生 1 μg蔗糖定义为一个酶活力单位。
SPS (U/g 鲜重)=100×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W
SPS (U/g 鲜重)=(C 标准×ΔA 测定÷ΔA 标准×V 样)÷(W÷V 样总×V 样)÷T
C 标准：标准品的浓度，1,000 μg/mL；V 样：加入反应体系中上清液体积，0.01 mL；T：反应时间，10 min；V 样总：加入 Extraction Buffer体积，1 mL；W：样本鲜重，g；Cpr：上清液蛋白质浓度，mg/mL。
1. 尽量在 30 min内完成测定。
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
请等待最新文献信息更新。
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