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脱氢抗坏血酸(DHA)含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™
CheKine™ Micro Dehydroascorbic Acid (DHA) Assay Kit
产品特点:
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活动截止时间:2024年1月31日
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CheKine™ 脱氢抗坏血酸(DHA)含量检测试剂盒(微量法)是一款专为植物细胞及组织样本设计的比色法试剂盒,可快速定量样品中脱氢抗坏血酸(DHA)的含量,进而评估细胞氧化还原状态。
背景知识
抗坏血酸(AsA)是植物细胞中关键的抗氧化分子,其含量及与脱氢抗坏血酸(DHA)的比值(AsA/DHA)直接反映细胞对氧化胁迫的响应能力。DHA作为AsA的可逆氧化型,在植物体内与AsA共同构成氧化还原对,充当电子受体,参与清除活性氧、维持细胞氧化还原平衡。通过测定DHA含量,可间接了解植物在干旱、盐胁迫、重金属等逆境下的抗氧化防御强度。
本试剂盒适用于植物生理学、逆境生物学及农业科学研究,可用于分析不同处理条件下(如盐胁迫、干旱、病原菌侵染)植物细胞或组织中DHA含量的动态变化,为评估植物抗氧化能力及抗逆机制提供可靠数据支持。
| 中文名称 | 脱氢抗坏血酸(DHA)含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Dehydroascorbic Acid (DHA) Assay Kit |
| 产品货号 | KTB3090 |
| 检测类型 | 氧化应激 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | • Extraction Buffer •ReagentⅠ • ReagentⅡ •Standard |
| 分子 | DHA |
| 检测指标 | DHA |
| 注意事项 | • 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用。 •实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 建议收到货后避光保存于-20°C,有效期为6个月。请参考说明书中各个组分的最佳保存条件进行储存。 |
| 运输条件 | 冰袋运输(蓝冰) |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。 |
Extraction Buffer:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
ReagentⅠ:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
ReagentⅡ:临用前配制,加入 5 mL去离子水充分溶解待用,分装后-20℃避光保存 1个月,禁止反复冻融。
Standard:临用前配制,加入 5.743 mL去离子水充分溶解,即为 1 μmol/mL DHA,分装后-20℃避光保存 1个月,禁止反复冻融。
1. 植物组织:称取约 0.1 g样本,加入 1 mL Extraction Buffer捣碎,冰浴超声波破碎 5 min(功率 20%或 200 W,超声 3 s,间隔 7 s,重复 30次),16,000 g,4℃离心 20 min,取上清液,置冰上待测。
1. 酶标仪或紫外分光光度计预热 30 min以上,调节波长至 265 nm,紫外分光光度计用去离子水调零。
2. ReagentⅠ置于 25℃孵育 30 min。
3. 96孔 UV 板或微量石英比色皿中,标准管加入 20 μL Standard,160 μL ReagentⅠ,20 μL ReagentⅡ,迅速混匀,用酶标仪在 265 nm下测定 10 s时的吸光值 A1和 2 min 10 s后的吸光值 A2,计算ΔAStandard=A2-A1。
4. 96孔 UV板或微量石英比色皿中,测定管加入 20 μL样本,160 μL ReagentⅠ,20 μL ReagentⅡ,迅速混匀,用酶标仪在 265 nm下测定 10 s时的吸光值 A3和 2 min 10 s后的吸光值 A4,计算ΔA 测=A4-A3。
1. 按蛋白浓度计算:
DHA(nmol/mg prot)=(CStandard×ΔA 测÷ΔAStandard)÷Cpr=1,000×ΔA 测÷ΔAStandard÷Cpr
2. 按样本质量计算:
DHA(nmol/g 鲜重)=(CStandard×ΔA 测÷ΔAStandard)×V 样总÷W=1,000×ΔA 测÷ΔAStandard÷W
CStandard:DHA 浓度,1 μmol/mL=1,000 nmol/mL;V 样总:加入 Extraction Buffer体积,1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量,g。
将上述计算公式中光径 d: 0.5 cm调整为 d: 1 cm进行计算即可。
A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
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