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活动截止时间：2024年1月31日
亚科因生物研发的CheKine™ 天冬酰胺合成酶（AS）活性检测试剂盒（微量法）（CheKine™ Micro Asparagine Synthetase (AS) Activity Assay Kit）是一款基于比色法的微量检测工具，可在细胞、组织、细菌及血清（浆）等样本中快速、准确地测定天冬酰胺合成酶的活性。
天冬酰胺合成酶（AS）是一类广泛存在于动植物、微生物及哺乳动物细胞中的氨基转移酶，负责催化谷氨酰胺的氨基向天冬氨酸转移，生成天冬酰胺。在植物遭受氨毒胁迫时，天冬酰胺的形成被视为一种解毒反应；在哺乳动物细胞中，AS 活性与氮代谢、细胞增殖及药物抗性密切相关。
本试剂盒采用微量比色法：AS 催化 L-天冬酰胺水解生成 L-天冬氨酸并释放游离氨，游离氨与奈氏试剂反应形成棕黄色络合物，在 450 nm 处产生特征吸收峰。通过测定氨生成速率，即可计算样本中 AS 的酶活性。
本试剂盒适用于细胞代谢研究，可用于：
• 植物氮代谢与抗逆机制探索
• 肿瘤细胞 AS 活性与药物敏感性关联分析
• 微生物发酵过程中氮源利用效率评估
• 血清（浆）样本中 AS 活性与代谢疾病的相关性研究
| 中文名称 | 天冬酰胺合成酶(AS)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Asparagine Synthetase (AS) Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB3046 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | •Reagent I •Reagent Ⅱ •Reagent Ⅲ •Reagent Ⅳ •Reagent Ⅴ •Reagent VI •Standard |
| 分子 | AS |
| 检测指标 | AS |
| 注意事项 | •推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存数周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 4℃，避光保存 6 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
注意：正式检测前，建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。
注意：建议使用新鲜样本。如果不立即使用，可将样品在-80℃下保存一个月。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在 4 h内完成样品解冻。
注意：如需测定蛋白浓度，推荐使用 Abbkine货号：KTD3001的蛋白质定量试剂盒（BCA法）进行样本蛋白质浓度测定。
| 试剂 | 空白孔（μL） | 测定孔（μL） |
|---|---|---|
| 样本 | 0 | 25 |
| 去离子水 | 25 | 0 |
| ReagentⅠ | 100 | 100 |
| Reagent II | 400 | 400 |
混匀，37℃孵育 1 h
| 试剂 | 空白孔（μL） | 测定孔（μL） |
|---|---|---|
| Reagent III | 525 | 525 |
混匀，8000 g，25℃离心 10 min；取上清液，在 96孔板或微量玻璃比色皿中进行以下操作：
| 试剂 | 空白孔（μL） | 测定孔（μL） |
|---|---|---|
| 上清液 | 130 | 130 |
| Reagent IV | 30 | 30 |
| Reagent V | 20 | 20 |
| Reagent VI | 20 | 20 |
3. 充分混匀，室温静置 15 min，记录 420 nm处吸光值，空白孔记为 A 空白，测定孔记为 A 测定。计算ΔA 测定=A 测定-A 空白。
注意：空白管只需做 1-2次。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测定小于 0.01可适当加大样本量。如果ΔA 测定大于 0.6，样本可用 ReagentⅠ进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数，或减少提取用样本量。
注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
标准条件下测定的回归方程为 y=1.9244x+0.0057，R2=0.9983；x为标准品浓度（μmol/mL），y为ΔA吸光值。
（1）按样本蛋白浓度计算：
酶活单位定义：每毫克蛋白每分钟催化天冬酰胺生成 1 nmol氨定义为一个酶活力单位。
AS(U/mg prot)=363.75×(ΔATest-0.0057)÷Cpr
AS(U/mg prot)=((ΔA 测定-0.0057)/1.9244)×V 反总÷(V 样×Cpr)÷T×1,000
（2）按样本鲜重计算：
酶活单位定义：每克样本每分钟催化天冬酰胺生成 1 nmol氨定义为一个酶活力单位。
AS(U/g 鲜重)=363.75×(ΔATest-0.0057)÷W
AS(U/g 鲜重)=((ΔA 测定-0.0057)/1.9244)×V 反总÷(W×V 样÷V 样总)÷T×1,000
（3）按照细菌或细胞数量计算
酶活单位定义：每 104个细菌或细胞每分钟催化天冬酰胺生成 1 nmol氨定义为一个酶活力单位。
AS(U/104)=363.75×(ΔATest-0.0057)÷n
AS(U/104)=((ΔA 测定-0.0057)/1.9244)×V 反总÷(n×V 样÷V 样总)÷T×1,000
（4）按样本体积计算：
酶活单位定义：每 mL液体每分钟催化天冬酰胺生成 1 nmol氨为一个酶活力单位。
AS(U/mL)=363.75×(ΔATest-0.0057)
AS(U/mL)=((ΔA 测定-0.0057)/1.9244)×V 反总÷V 样÷T×1,000
参数说明：
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
请等待最新文献信息更新。
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