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活动截止时间：2024年1月31日
CheKine™ 植物根系活力检测试剂盒（TTC 法）（微量法）是一款基于2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）显色反应的比色法试剂盒，专为测定植物组织样本中脱氢酶活性而设计，通过 485 nm 吸光度变化快速评估植物根系活力。
植物脱氢酶（PDHA）活性是衡量细胞代谢强弱的关键指标，直接反映根系对基质的降解能力。本试剂盒以 TTC 为电子受体，在细胞呼吸链中被还原生成红色三苯基甲替（TFF），其颜色深浅与脱氢酶活性成正比。于 485 nm 处测定吸光值即可定量根系活力，适用于微量样本的高通量检测。
主要用于细胞代谢研究，特别适合植物生理学、逆境胁迫、根系发育及营养吸收等实验中，对细胞类样本（如根尖、根段）的活力进行快速评估。
| 中文名称 | 植物根系活力检测试剂盒(TTC 法)(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Plant Root Vitality (TTC-Method) Assay Kit |
| 产品货号 | KTB3025 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | •ReagentⅠA •ReagentⅠB •Reagent Ⅱ •Reagent Ⅲ •Standard |
| 分子 | TPI |
| 检测指标 | TPI |
| 注意事项 | •推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存数周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 4℃，避光保存 5 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
ReagentⅠA：即用型；使用前，平衡到室温。4℃避光保存。
ReagentⅠB：即用型；使用前，平衡到室温。4℃保存。
Working Reagent I：临用前配制；取一支 ReagentⅠB加入一支 ReagentⅠA，再加入 60 mL去离子水，充分溶解待用；4℃避光保存 1周。
Reagent II：即用型；使用前，平衡到室温。4℃保存。
Reagent III：即用型；使用前，平衡到室温。4℃保存。
Reagent IV：乙酸乙酯。（自备）
10 mg/mL TTC Standard：临用前配制；加入 1 mL去离子水充分溶解，配制成 10 mg/mL TTC Standard；4℃避光保存 1周。
20 μg/mL Standard工作液：取 10 μL 10 mg/mL TTC Standard，加入 1,990 μL去离子水，充分混匀，制成 50 μg/mL TTC Standard。
取 1 mL 50 μg/mL TTC Standard加入到一支 Reagent III 内，充分震荡混匀 2 min。混匀后加入 1 mL Reagent IV，再次充分震荡混匀 2 min，室温静置分层 5 min，取上层溶液，即为 50 μg/mL TTC Standard工作液。吸取 200 μL 50 μg/mL TTC Standard工作液加入 300 μL Reagent IV 混匀即 20 μg/mL TTC Standard工作液。20 μg/mL TTC Standard 工作液现用现配。使用 20 μg/mL TTC Standard工作液进行后续实验检测。
植物根系组织：称取约 0.1 g新鲜样本（建议使用无色根系样本），用去离子水清洗 3-4次，轻轻擦干，不要过分挤压破坏根系细胞。
1. 酶标仪或可见光分光光度计预热 30 min以上，调节波长到 485 nm，可见光分光光度计用乙酸乙酯调零。
2. 标准溶液的测定：
取 200 μL 20μg/mL TTC Standard工作液和 200 μL Reagent IV 分别至 96孔石英板/玻璃板（非聚苯乙烯/聚丙烯材质）或微量玻璃比色皿中，测定 485 nm下的吸光值。标准孔记为 A 标准，Reagent IV 孔记为 A 空白，计算ΔA 标准=A 标准-A 空白。
3. 操作表（下述操作在 5 mL EP管中操作）：
| 试剂 | 测定孔 | 对照孔 |
|---|---|---|
| 样本 (g） | 0.1 | 0.1 |
| Working ReagentⅠ(mL） | 1 | 0 |
| Reagent II (mL） | 1 | 2 |
充分混匀，37℃，暗培养 4 h，取出后立即冰浴 5 min，去滤液，尽量用滤纸吸干样本，置于匀浆器或研钵中。
Reagent IV (mL） 1 1
4. 充分研磨，12,000 g，4℃，离心 5 min，取 200 μL上清至 96孔石英板/玻璃板（非聚苯乙烯/聚丙烯材质）或微量玻璃比色皿中，测定 485 nm下的吸光值。测定孔记为 A 测定，对照孔记为 A 对照，计算ΔA 测定=A 测定-A 对照。
注意：（1）空白管和标准管只需做 1-2次。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测定小于 0.01，可适当增大样本量，如果ΔA 测定大于 1，上清液可用 Reagent IV 进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数，或减少样本量。（2）反应完成后立即冰浴以终止反应，并将残留的反应液尽量去除干净。（3）Reagent IV 易挥发，有毒，与 Reagent IV 有关的反应，请穿实验服，戴口罩，戴乳胶手套，在通风橱中操作。（4）建议用新鲜无色根系样本检测植物根系活力。对于有色根系样本，可以在加 Reagent IV 之前，先用去离子水进行研磨，12,000 g，4℃，离心 5 min弃掉上清，沉淀加 Reagent IV 研磨，收集研磨液，按照实验步骤离心取上清检测。
注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
植物根系活力的计算：
按样本鲜重计算：
单位的定义：以 TTC的还原量来表示根系活力。
TTC还原强度[μg TTC/(g·h)]=ΔA 测定×C 标准÷ΔA 标准×V÷(W×T)=5×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W
C 标准：标准溶液浓度，20 μg/mL；W：根重，g；T：反应时间，4 h；V：Reagent IV 的体积即匀浆体积，1 mL。
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
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货号：KTD104
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