共价结合型果胶(CSP)含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™

Name: 共价结合型果胶(CSP)含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™
Brand: Abbkine
SKU: KTB3015
Price: 478 CNY
Availability: InStock

CheKine™ Micro Covalently-Soluble Pectin (CSP) Content Assay Kit

产品货号

KTB3015

产品特点：

样本类型经过充分验证，操作步骤精简，适合微量样本

碱液螯合提取，专一释放共价结合型果胶，减少其他果胶干扰

咔唑比色法灵敏度高，530 nm 检测波长常规酶标仪即可完成

选择规格

48 T/48 S

¥478

现货（次日发货）

96 T/96 S

¥898

现货（次日发货）

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活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

亚科因生物研发的CheKine™ 共价结合型果胶（CSP）含量检测试剂盒（微量法）是一款专为植物组织样本设计的微量比色试剂盒，通过碱液螯合提取与咔唑显色联用，可快速定量细胞壁中共价结合型果胶（CSP）的含量，为细胞代谢与细胞壁结构研究提供可靠数据。

果胶是植物细胞初生壁与中胶层的主要多糖成分，由半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖等构成，其交联方式（Ca²⁺桥、氢键、酯键等）决定细胞壁机械强度与食品质地。根据交联强度不同，果胶可分为水溶性果胶（WSP）、离子结合型果胶（ISP）和共价结合型果胶（CSP）。CSP 通过共价键牢固锚定于细胞壁，常规方法难以释放。本试剂盒利用含螯合剂的碱溶液选择性裂解共价键，释放 CSP 并水解为半乳糖醛酸；后者在浓硫酸中与咔唑发生缩合反应，生成紫红色产物，于 530 nm 处具有最大吸收峰，吸光度与 CSP 含量成正比。

应用领域

植物细胞壁代谢研究、果实成熟软化机理探索、植物逆境生理分析、食品原料果胶品质评价等细胞代谢相关实验。

产品参数

中文名称	共价结合型果胶(CSP)含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™
英文名称	CheKine™ Micro Covalently-Soluble Pectin (CSP) Content Assay Kit
产品货号	KTB3015
样本类型	植物组织
试剂盒组分	• Reagent I •Reagent Ⅱ •Reagent Ⅲ •Standard
分子	共价结合型果胶（CSP）
检测指标	共价结合型果胶（CSP）
注意事项	•推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存数周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。
保存建议	4℃，避光保存 6 个月
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

自备耗材

酶标仪或可见光分光光度计（能测 530 nm处的吸光度）
恒温水浴锅、分析天平、制冰机、低温离心机
96孔板或微量玻璃比色皿，可调节式移液枪及枪头
去离子水、80%乙醇、丙酮、浓硫酸
匀浆器

试剂准备

Reagent I：即用型；使用前，平衡到室温；4℃避光保存。

Reagent II：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。

Reagent III：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。

注意：Reagent I 和 Reagent III 有毒且有刺激性气味，建议在通风橱进行实验。

Standard：即用型；使用前，平衡到室温；4℃避光保存。

样本制备

注意：推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存一个月。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在 4 h内完成样品解冻。

1. 细胞壁的提取：取约 0.3 g样本，加入 1 mL 80%乙醇，室温快速匀浆，95℃水浴 20 min，冷却至室温，4,000 g，25℃离心 10 min，弃上清。沉淀加入 1.5 mL 80%乙醇和丙酮各洗一遍（涡旋振荡 2 min左右，4,000 g，25℃离心 10 min，弃上清即可），沉淀即为粗细胞壁，加入 1 mL Reagent I（去除淀粉）浸泡 15 h，4,000 g，25℃离心 10 min，弃上清，将沉淀干燥，称重得细胞壁物质（CWM）。

2. CSP的提取：称取烘干的 3 mg CWM ，加入1mL Reagent II，充分匀浆(若烘干物质质地坚硬，可先研碎后再加入 1 mL Reagent II 匀浆，或者用匀浆器匀浆)。8,000 g，4℃离心 10 min，取上清液待测。

注意：丙酮有刺激性气味，建议在通风橱使用。

实验步骤

1. 酶标仪或可见光分光光度计预热 30 min，调节波长到 530 nm。可见光分光光度计用去离子水调零。

2. Reagent III 和 Standard在 37℃预热 10 min以上。

3. 操作表（下述操作在 1.5 mL EP管中进行）：

试剂	测定管（μL）	对照管（μL）	空白管（μL）	标准管（μL）
样本	50	50	0	0
Standard	0	0	0	50
去离子水	0	50	50	0
Reagent III	50	0	50	50
混匀	-	-	-	-
浓硫酸	400	400	400	400

混匀，95℃水浴 5 min后，冷却至室温，取 200 μL至微量玻璃比色皿或 96孔板中，于 530 nm下测定各管吸光值，分别记为 A 测定、A 对照、A 空白、A 标准。计算ΔA 测定=A 测定-A 对照，ΔA 标准=A 标准-A 空白。

注意：（1）实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。标准管和空白管只需做 1-2次，每个测定管需要设置一个对照管。如果 A 测定小于 0.1，可适当增大样本量，如果 A 测定大于 2，需将待测样本用去离子水稀释（可稀释 10倍或 20倍）。（2）浓硫酸有较强腐蚀性，请做好防护谨慎操作。

结果计算

注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

CSP含量的计算:

CSP (mg/g 干重)=(C 标准×V1)×ΔA 测定÷ΔA 标准÷(W×V1÷V2)×F=0.05×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W×F

C 标准：标准管浓度，0.05 mg/mL；V1：加入样本体积，0.05 mL；V2：加入 Reagent II 体积，1 mL；W：样本干重，g；F：样本稀释倍数。

注意事项

1. 最低检测限为 50 μg/g干重。

常见问题

Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多？

A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。

Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证？

A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。