游离胆固醇(FC)检测试剂盒(微量法)-CheKine™

Name: 游离胆固醇(FC)检测试剂盒(微量法)-CheKine™
Brand: Abbkine
SKU: KTB2210
Price: 248 CNY
Availability: InStock

CheKine™ Micro Free Cholesterol (FC) Assay Kit

产品货号

KTB2210

产品特点：

微量体系：仅需1–10 µL细胞裂解液即可检测，节省珍贵样本。

快速简便：一步加样，室温反应30 min内完成，适配常规酶标仪。

高特异性：酶促级联反应避免酯化胆固醇干扰，精准定量游离形式。

稳定可靠：-20 °C避光保存6个月，批间差异小，数据重现性高。

选择规格

48 T/48 S

¥248

现货（次日发货）

96 T/96 S

¥378

现货（次日发货）

🎉 限时优惠

买2送1活动进行中！购买任意2个规格产品，免费赠送100μL装一支。

活动截止时间：2024年1月31日

产品概述

CheKine™ 游离胆固醇（FC）检测试剂盒（微量法）是一款基于经典比色法的微量检测工具，专为细胞及亚细胞水平游离胆固醇（FC）定量而设计。通过特异性显色反应，可在微孔板中快速测定培养细胞、细胞裂解液或亚细胞组分中的FC含量，为脂肪酸代谢研究提供可靠数据。

背景知识

游离胆固醇（FC）不仅是细胞膜磷脂双分子层的关键“流动性调节器”，更是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及维生素D等生理活性物质的“前体仓库”。细胞内FC水平的动态平衡直接反映脂代谢通路的活跃程度，因此FC浓度已成为评估细胞脂质代谢状态的核心指标。CheKine™ 游离胆固醇（FC）检测试剂盒（微量法）利用酶促-比色级联反应：FC在胆固醇氧化酶作用下生成H₂O₂，后者与显色探针反应生成有色产物，其510 nm吸光度与FC含量成正比，实现微量样本的高通量检测。

应用领域

适用于细胞代谢研究场景，包括肿瘤细胞脂代谢重编程、巨噬细胞泡沫化模型、肝细胞脂质沉积机制、药物对胆固醇合成/外排的调控评价等，亦可扩展至亚细胞器（线粒体、内质网）FC分布分析。

产品参数

中文名称	游离胆固醇(FC)检测试剂盒(微量法)-CheKine™
英文名称	CheKine™ Micro Free Cholesterol (FC) Assay Kit
产品货号	KTB2210
检测类型	脂肪酸代谢
检测方法	比色法
试剂盒组分	• ReagentⅠ • ReagentⅡ • ReagentⅢ • Standard
分子	FC
检测指标	FC
注意事项	• 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用。 • 试剂盒中有易挥发性物质，实验过程中需佩戴手套和口罩，试剂瓶盖打开后应该及时盖紧。 • 实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。
保存建议	收到货后，请避光保存于-20℃。请参阅说明书中各个组件的存储条件，自发货之日起，按照推荐的保存条件，有效期为6个月。
运输条件	冰袋运输（蓝冰）
警告	本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。

使用说明

注意：正式检测前，建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。

自备耗材

酶标仪或可见分光光度计（能测 505 nm处的吸光度）
96孔板和微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
低温离心机、制冰机、水浴锅
无水乙醇
匀浆器（如果是组织样本）

试剂准备

试剂盒组分	规格	储存条件
ReagentⅠ Powder	×1 vial	-20℃，避光保存
ReagentⅡ	5 mL / 10 mL	4℃
ReagentⅢ	10 mL / 20 mL	4℃，避光保存
Standard	1 mL	4℃，避光保存

Working ReagentⅠ：临用前配制；48 T加入 4 mL ReagentⅡ，96 T加入 8 mL ReagentⅡ充分溶解待用。用不完的试剂 4℃保存一周或分装后-20℃避光保存一个月，避免反复冻融。

ReagentⅡ：即用型；使用前，平衡到室温。4℃保存。

ReagentⅢ：即用型；使用前，平衡到室温；4℃避光保存。

Working Solution：现配现用，每孔配制 200 μLWorking Solution，按照实际用量将Working ReagentⅠ和 ReagentⅢ按照 1:3的比例混合均匀。

Standard：即用型；使用前，平衡到室温；-20℃避光保存。

样本制备

注意：推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存 1个月。

动物组织：称取约 0.1 g组织，加入 1 mL无水乙醇，冰浴匀浆，8,000 g，4℃离心 10 min，取上清液，置冰上待测。
细胞、细菌：收集 500万细胞或细菌到离心管内，弃上清，加 1 mL无水乙醇，超声波破碎 5 min（功率 20%或 200 W，超声 3 s，间隔 7 s，重复 30次），8,000 g，4℃离心 10 min，取上清液，置冰上待测。
血清（浆）：直接测定。

注意：提取液中含有使蛋白变性的成分，若按蛋白浓度计算时，需要重新用去离子水提取蛋白进行测定。如需测定蛋白浓度，推荐使用 Abbkine货号：KTD3001的蛋白质定量试剂盒（BCA法）进行样本蛋白质浓度测定。

实验步骤

注意：酶标仪或可见分光光度计预热 30 min，调节波长到 500 nm，可见分光光度计用去离子水调零。

试剂	空白孔（μL）	标准孔（μL）	测定孔（μL）
无水乙醇	5	0	0
Standard	0	5	0
样本	0	0	5
Working Solution	200	200	200

混匀后 37℃孵育 30 min，于 505 nm测定吸光值，记为 A 空白、A 标准、A 测定，计算ΔA 测=A 测定-A 空白、ΔA 标=A 标准-A 空白。

注意：空白孔和标准孔只需测定 1次。实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA 测小于 0.01可适当加大样本量。如果ΔA 测大于 1.0，样本可用无水乙醇进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数，或减少提取用样本量。检测时间不宜超过 1 h。

结果计算

注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

1. 样本 FC含量计算

(1) 按样本质量计算

FC含量(μmol/g 鲜重)=1.25×△A 测定÷△A 标准÷W
FC含量(μmol/g 鲜重)=CStandard×△A 测定÷△A 标准×V 样÷(W×V 样÷V 样总)

(2) 按蛋白浓度计算

FC含量(μmol/mg prot)=5×△A 测定÷△A 标准÷Cpr
FC含量(μmol/mg prot)=CStandard×V×△A 测定÷△A 标准×V 样÷(Cpr×V 样)

(3) 按细菌或细胞数量计算

FC含量(μmol/104)=0.01×△A 测定÷△A 标准
FC含量(μmol/104)=CStandard×△A 测定÷△A 标准×V 样÷(500×V 样÷V 样总)

(4) 按液体体积计算

FC含量(μmol/mL)=5×△A 测定÷△A 标准
FC含量(μmol/mL)=CStandard×△A 测定÷△A 标准

CStandard: 5 mmol/L=5 μmol/mL；Cpr: 样本蛋白浓度，mg/mL；V 样：加入反应体系中样本体积，0.01 mL；W: 样本鲜重，g；V 样总: 样品制备加入 Extraction Buffer的体积，1 mL；500: 细胞或细菌总数，500万。

常见问题

Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多？

A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。

Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证？

A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。

Q: 该产品线检测可使用分光光度计替代酶标仪吗？

A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。

Q: 该类试剂盒使用量应如何计算？

A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。

Q: 该系列试剂盒可以检测蓝藻等微生物样本吗？

A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。

文献引用

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