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组织无机磷含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™

CheKine™ Micro Tissue Inorganic Phosphorus Assay Kit

产品货号
KTB2170

产品特点:

  • 微量体系设计,节省珍贵组织样本,适配 96 孔板高通量检测
  • 经典钼蓝比色法,信号稳定,读数窗口宽,兼容常规酶标仪
  • 即用型标准品与配套试剂,简化实验流程,缩短检测时间
  • 4 ℃避光保存,有效期长达 12 个月,冰袋运输保障试剂稳定性
  • 选择规格

    96 T/96 S
    ¥198
    现货(次日发货)
    🎉 限时优惠

    买2送1活动进行中!购买任意2个规格产品,免费赠送100μL装一支。

    活动截止时间:2024年1月31日

    产品概述

    CheKine™ 组织无机磷含量检测试剂盒(微量法)是一款专为细胞及组织样本设计的微量比色法试剂盒,可在常规实验条件下快速、准确地定量检测样本中的无机磷含量,为细胞代谢研究提供可靠数据。

    背景原理

    无机磷主要以无机磷酸根(Pi)形式存在于生物体内,是能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化/去磷酸化等关键生化反应的参与者,同时也在碳水化合物的合成、转化与转运过程中发挥重要作用。本试剂盒利用经典的钼蓝比色原理:在酸性条件下,样本中的无机磷与钼酸铵反应生成磷钼酸复合物,经还原剂作用后形成蓝色钼蓝,在 620–700 nm 处具有特征吸收峰。吸光度与无机磷浓度成正比,从而实现对组织样本中无机磷含量的定量分析。

    应用领域

    本试剂盒适用于细胞代谢研究,可用于检测细胞、组织或亚细胞组分中的无机磷水平,广泛应用于能量代谢调控、信号转导通路、药物干预效果评估及疾病模型构建等方向。

    组织无机磷含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™

    产品参数

    中文名称 组织无机磷含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™
    英文名称 CheKine™ Micro Tissue Inorganic Phosphorus Assay Kit
    产品货号 KTB2170
    检测类型 离子代谢
    检测方法 比色法
    试剂盒组分 • ReagentⅠ
    •ReagentⅡ
    •ReagentⅢ
    •ReagentⅣ
    •Standard
    分子 Tissue Inorganic Phosphorus
    检测指标 Tissue Inorganic Phosphorus
    注意事项 定磷剂需临用前配制,限当天使用,建议 40 min 内完成检测。
    保存建议 4℃,避光保存 12 个月。
    运输条件 冰袋运输(蓝冰)
    警告 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。

    使用说明

    注意:正式检测前,建议选择 2-3 个预期差异较大的样本进行预实验。

    自备耗材

    • 酶标仪或可见分光光度计(能测 660 nm 处的吸光度)
    • 96 孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
    • 可调式水浴锅、台式离心机
    • 去离子水、匀浆器

    试剂准备

    ReagentⅠ:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。

    ReagentⅡ:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。

    注意:ReagentⅠ有刺激性气味,ReagentⅡ具有腐蚀性,建议在通风橱进行实验。

    试剂盒组分

    试剂盒组分规格储存条件
    ReagentⅠ120 mL4℃
    ReagentⅡ3 mL4℃
    ReagentⅢPowder×1 vial4℃,避光保存
    ReagentⅣPowder×1 vial4℃,避光保存
    Standard1 mL4℃

    ReagentⅢ:临用前配制,加入 1.5 mL 去离子水充分溶解后使用(可置于 37℃水浴 5 min 促进溶解);4℃避光保存一周。

    ReagentⅣ:临用前配制,加入 6 mL 去离子水充分溶解后使用;4℃避光保存一周。

    定磷剂:按照去离子水: ReagentⅡ: ReagentⅢ: ReagentⅣ=10:5:2:8 的比例配制(请根据实际需要进行配制),仅当天使用。

    Standard:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。

    样本制备

    1. 组织样本:称取约 0.1 g 样本,加入 1 mL ReagentⅠ(按照组织质量(g): ReagentⅠ体积(mL)为 1:10 的比例)进行冰浴匀浆,10,000 g,4℃离心 10 min,取上清液,置冰上待测。

    注意:如需测定蛋白浓度,推荐使用 Abbkine 货号:KTD3001 的蛋白质定量试剂盒(BCA 法)进行样本蛋白质浓度测定。

    实验步骤

    1. 酶标仪或可见分光光度计预热 30 min,调节波长到 660 nm。可见分光光度计用去离子水调零。

    2. 操作表(下述操作在 1.5 mL 离心管中操作):

    试剂空白孔(μL)标准孔(μL)测定孔(μL)
    样本上清0010
    去离子水1009090
    Standard0100
    定磷剂100100100

    3. 混匀后置于 40℃水浴保温 10 min,室温冷却 10 min 后取 200 μL 上清液于微量玻璃比色皿或 96 孔板中 660 nm 处测定吸光度,记为 A 空白、A 标准、A 测定,计算 ΔA 测定=A 测定-A 空白、ΔA 标准=A 标准-A 空白。

    注意:空白孔和标准孔只需测定 1 次。实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果 ΔA 测定过小可适当加大样本量。如果 ΔA 测定大于 1.0,样本可用 ReagentⅠ进一步稀释,计算结果乘以稀释倍数,或减少提取用样本量。

    结果计算

    注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。

    (1)按照蛋白含量计算

    无机磷含量(μmol/mg prot)=(CStandard×ΔA 测÷ΔA 标)×V 总÷Cpr=1×ΔA 测÷ΔA 标÷Cpr

    (2)按照样本质量计算

    无机磷含量(μmol/g 鲜重)=(CStandard×ΔA 测÷ΔA 标)×V 总÷W=1×ΔA 测÷ΔA 标÷W

    CStandard:1 mmol/L;V 总:上清液总体积,1 mL=0.001 L;W:样品质量,g。

    常见问题

    Q: 该类试剂盒一般什么单位用的多?

    A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。

    Q: 该类试剂盒做过哪些实验材料的验证?

    A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该产品线检测可使用分光光度计替代酶标仪吗?

    A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。

    Q: 该类试剂盒使用量应如何计算?

    A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    Q: 该系列试剂盒可以检测蓝藻等微生物样本吗?

    A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。

    文献引用

    请等待最新文献信息更新。

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