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组织无机磷含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™
CheKine™ Micro Tissue Inorganic Phosphorus Assay Kit
产品特点:
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活动截止时间:2024年1月31日
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CheKine™ 组织无机磷含量检测试剂盒(微量法)是一款专为细胞及组织样本设计的微量比色法试剂盒,可在常规实验条件下快速、准确地定量检测样本中的无机磷含量,为细胞代谢研究提供可靠数据。
无机磷主要以无机磷酸根(Pi)形式存在于生物体内,是能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化/去磷酸化等关键生化反应的参与者,同时也在碳水化合物的合成、转化与转运过程中发挥重要作用。本试剂盒利用经典的钼蓝比色原理:在酸性条件下,样本中的无机磷与钼酸铵反应生成磷钼酸复合物,经还原剂作用后形成蓝色钼蓝,在 620–700 nm 处具有特征吸收峰。吸光度与无机磷浓度成正比,从而实现对组织样本中无机磷含量的定量分析。
本试剂盒适用于细胞代谢研究,可用于检测细胞、组织或亚细胞组分中的无机磷水平,广泛应用于能量代谢调控、信号转导通路、药物干预效果评估及疾病模型构建等方向。
| 中文名称 | 组织无机磷含量检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Tissue Inorganic Phosphorus Assay Kit |
| 产品货号 | KTB2170 |
| 检测类型 | 离子代谢 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | • ReagentⅠ •ReagentⅡ •ReagentⅢ •ReagentⅣ •Standard |
| 分子 | Tissue Inorganic Phosphorus |
| 检测指标 | Tissue Inorganic Phosphorus |
| 注意事项 | 定磷剂需临用前配制,限当天使用,建议 40 min 内完成检测。 |
| 保存建议 | 4℃,避光保存 12 个月。 |
| 运输条件 | 冰袋运输(蓝冰) |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用,不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用,不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为,我们不承担任何责任。 |
注意:正式检测前,建议选择 2-3 个预期差异较大的样本进行预实验。
ReagentⅠ:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
ReagentⅡ:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
注意:ReagentⅠ有刺激性气味,ReagentⅡ具有腐蚀性,建议在通风橱进行实验。
| 试剂盒组分 | 规格 | 储存条件 |
|---|---|---|
| ReagentⅠ | 120 mL | 4℃ |
| ReagentⅡ | 3 mL | 4℃ |
| ReagentⅢ | Powder×1 vial | 4℃,避光保存 |
| ReagentⅣ | Powder×1 vial | 4℃,避光保存 |
| Standard | 1 mL | 4℃ |
ReagentⅢ:临用前配制,加入 1.5 mL 去离子水充分溶解后使用(可置于 37℃水浴 5 min 促进溶解);4℃避光保存一周。
ReagentⅣ:临用前配制,加入 6 mL 去离子水充分溶解后使用;4℃避光保存一周。
定磷剂:按照去离子水: ReagentⅡ: ReagentⅢ: ReagentⅣ=10:5:2:8 的比例配制(请根据实际需要进行配制),仅当天使用。
Standard:即用型;使用前,平衡到室温;4℃保存。
1. 组织样本:称取约 0.1 g 样本,加入 1 mL ReagentⅠ(按照组织质量(g): ReagentⅠ体积(mL)为 1:10 的比例)进行冰浴匀浆,10,000 g,4℃离心 10 min,取上清液,置冰上待测。
注意:如需测定蛋白浓度,推荐使用 Abbkine 货号:KTD3001 的蛋白质定量试剂盒(BCA 法)进行样本蛋白质浓度测定。
1. 酶标仪或可见分光光度计预热 30 min,调节波长到 660 nm。可见分光光度计用去离子水调零。
2. 操作表(下述操作在 1.5 mL 离心管中操作):
| 试剂 | 空白孔(μL) | 标准孔(μL) | 测定孔(μL) |
|---|---|---|---|
| 样本上清 | 0 | 0 | 10 |
| 去离子水 | 100 | 90 | 90 |
| Standard | 0 | 10 | 0 |
| 定磷剂 | 100 | 100 | 100 |
3. 混匀后置于 40℃水浴保温 10 min,室温冷却 10 min 后取 200 μL 上清液于微量玻璃比色皿或 96 孔板中 660 nm 处测定吸光度,记为 A 空白、A 标准、A 测定,计算 ΔA 测定=A 测定-A 空白、ΔA 标准=A 标准-A 空白。
注意:空白孔和标准孔只需测定 1 次。实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果 ΔA 测定过小可适当加大样本量。如果 ΔA 测定大于 1.0,样本可用 ReagentⅠ进一步稀释,计算结果乘以稀释倍数,或减少提取用样本量。
注意:我们为您提供的计算公式,包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
(1)按照蛋白含量计算
无机磷含量(μmol/mg prot)=(CStandard×ΔA 测÷ΔA 标)×V 总÷Cpr=1×ΔA 测÷ΔA 标÷Cpr
(2)按照样本质量计算
无机磷含量(μmol/g 鲜重)=(CStandard×ΔA 测÷ΔA 标)×V 总÷W=1×ΔA 测÷ΔA 标÷W
CStandard:1 mmol/L;V 总:上清液总体积,1 mL=0.001 L;W:样品质量,g。
A: 动物研究,植物研究,微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证,适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标,尤其是酶活性测定指标,我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒,并在试剂盒名称和代号上做了明确区分,请用户仔细核对,选择合适的试剂盒类型。如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 不建议用,分光光度计每次检测的样本个数不超过4个,无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
A: 可以,用超声进行破碎微生物细胞,再进行细胞上清的检测,如有疑问,请联系support@abbkine.com,进行深入探讨。
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