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活动截止时间：2024年1月31日
CheKine™ 乙醇酸氧化酶（GO）活性检测试剂盒（微量法）是一款基于比色法原理设计的细胞代谢检测工具，可在微量体系内快速测定植物组织中乙醇酸氧化酶（GO）的活性，为研究植物光呼吸与乙醇酸循环提供便捷手段。
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乙醇酸氧化酶（EC 1.1.3.15）是植物光呼吸代谢网络中的关键限速酶，负责将乙醇酸氧化为乙醛酸，进而连接乙醇酸循环与光合作用碳代谢。通过监测该酶活性，可间接评估植物在光呼吸、光合碳同化及能量代谢中的生理状态。CheKine™ 乙醇酸氧化酶（GO）活性检测试剂盒（微量法）利用酶促反应生成的乙醛酸与盐酸苯肼形成乙醛酸苯腙，在 324 nm 处产生特征吸收峰，吸光度变化与 GO 活性成正比，适用于叶片、根、愈伤组织等多种植物样本。
本试剂盒主要用于细胞代谢研究，特别适合植物生理学、作物抗逆机制、光呼吸调控及乙醇酸循环功能解析等方向，为科研工作者提供可靠的 GO 活性数据支持。
| 中文名称 | 乙醇酸氧化酶(GO)活性检测试剂盒(微量法)-CheKine™ |
| 英文名称 | CheKine™ Micro Glycolate Oxidase (GO) Activity Assay Kit |
| 产品货号 | KTB1902 |
| 检测方法 | 比色法 |
| 试剂盒组分 | • Extraction Buffer •Reagent I •Reagent Ⅱ •Reagent Ⅲ |
| 分子 | GO |
| 检测指标 | GO |
| 注意事项 | •推荐使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存数周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻。 •实验开始前，确保所有的组分及设备处于合适的温度。 |
| 保存建议 | 4℃，避光保存 6 个月 |
| 运输条件 | 冰袋运输（蓝冰） |
| 警告 | 本文列出的产品仅供研究使用，不适用于人类或临床诊断。我们产品所推荐应用，不是建议使用我们的产品去违反任何专利或许可证。对于使用本产品可能发生的专利侵权或其他违规行为，我们不承担任何责任。 |
注意：正式检测前，建议选择 2-3个预期差异较大的样本进行预实验。
Extraction Buffer：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
Reagent I：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
Working Reagent II：临用前配制；48 T加入 2.5 mL去离子水，96 T加入 5 mL去离子水，充分溶解待用。用不完的试剂-20℃分装避光可保存 1周。
注意：Extraction Buffer和Working Reagent II 有毒且有刺激性气味，建议在通风橱进行实验。
Reagent III：即用型；使用前，平衡到室温；4℃保存。
注意：尽量使用新鲜样本，如果不立即进行实验，样本可在-80℃保存 2周。测定时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在 4 h内完成样品解冻。
植物组织：称取约 0.1 g样本，加入 1 mL Extraction Buffer捣碎进行冰浴匀浆，12,000 g，4℃离心 10 min，取上清液，置冰上待测。
注意：1. 色素含量较高的样本，可在提取酶时加 5 mg活性炭吸附。
2. 如需测定蛋白浓度，推荐使用 Abbkine货号：KTD3001的蛋白质定量试剂盒（BCA法）进行样本蛋白质浓度测定。
1. 酶标仪或紫外分光光度计预热 30 min，调节波长到 324 nm。紫外分光光度计用去离子水调零。
| 试剂 | 测定孔（μL） |
|---|---|
| 样本上清 | 10 |
| Reagent I | 130 |
| Working Reagent II | 40 |
| Reagent III | 20 |
充分混匀，立即于 96孔 UV板或微量石英比色皿中测定 324 nm处 10 s和 190 s吸光值 A1和 A2，ΔA=A2-A1。
注意：1. 实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果ΔA小于 0.001可适当延长反应时间（如继续测定 310 s，610 s吸光值）或加大样本量。如果 A1大于 1.0，样本可用 Extraction Buffer进一步稀释，计算结果乘以稀释倍数，或减少提取用样本量。
2. 如需测定多个样本，可根据实验用量按比例将上述试剂配制成工作液。
注意：我们为您提供的计算公式，包括推导过程计算公式和简洁计算公式。两者完全相等。建议以加粗的简洁计算公式为最终计算公式。
按样本鲜重计算：
酶活性定义：每 g组织每分钟氧化 1 nmol乙醇酸所需的酶量为一个酶活力单位。
GO (U/g 鲜重)=784.31×ΔA÷W
ε：乙醛酸苯腙毫摩尔消光系数：17,000 L/mol/cm；d：96孔 UV板光径，0.5 cm；109：单位换算系数，1 mol=109 nmol；V 反总：反应总体积，2×10-4 L；V 样：反应中样本体积，0.01 mL；V 样总：加入 Extraction Buffer体积，1 mL；W，样本鲜重，g；T：反应时间，3 min。
将上述计算公式中光径 d: 0.5 cm调整为 d: 1 cm进行计算即可。
A: 动物研究，植物研究，微生物研究等相关单位都应用比较多。
A: 生化试剂盒已充分验证，适合于植物、动物和微生物等多种物种。 对于在植物、动物和微生物等不同材料之间确实存在很大差异的指标，尤其是酶活性测定指标，我们分别研发和生产了针对同一指标的不同类型试剂盒，并在试剂盒名称和代号上做了明确区分，请用户仔细核对，选择合适的试剂盒类型。如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 不建议用，分光光度计每次检测的样本个数不超过4个，无法做到数据检测的同步。
A: 检测孔的数量=样本个数+标准品数×重复次数+预留补测数量，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
A: 可以，用超声进行破碎微生物细胞，再进行细胞上清的检测，如有疑问，请联系support@abbkine.com，进行深入探讨。
请等待最新文献信息更新。
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